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Survivin反义寡核苷酸协同Taxol诱导肺癌细胞株凋亡 总被引:3,自引:0,他引:3
[目的]研究Survivin反义寡核苷酸(antisense oligonucleotide,ASODN)单独或联合Taxol对肺癌细胞株Survivin mRNA和蛋白表达,细胞凋亡,生长抑制率的影响.[方法]Survivin ASODN经脂质体介导转染人小细胞肺癌细胞株NCI-H446,用RT-PCR法、Western blot法检测Survivin表达;Survivin ASODN单独、联合Taxol作用NCI-H446细胞后,用MTT法检测细胞生长抑制率,台盼兰拒染实验检测细胞死亡率,流式细胞仪检测细胞凋亡并计算两药相互作用指数(CDI).[结果]Survivin ASODN转染NCI-H446细胞后,Survivin mRNA表达和蛋白表达明显下调,其中SurvivinASODN 500nM作用72h时Survivin mRNA抑制率达62.72%,效果最佳;Survivin ASODN单独或联合Taxol作用NCI-H446细胞后发现Survivin ASODN联合Taxol作用的效果明显优于两药单独应用(P<0.01).其联用时细胞凋亡率达73.3%,而单用时分别为43.6%和23.8%.其联用时细胞生长抑制率达80.1%,而单用时抑制率分别为50.4%和30.5%(P均<0.01).两药联用组细胞死亡率达69.9%,高于两药单用时的41.4%和24.8%(P均<0.01);CDI值为0.43,表明两药具有显著协同作用.[结论]Survivin ASODN能够抑制肺癌细胞株Survivin mRNA和蛋白表达并诱导肺癌细胞凋亡;Survivin ASODN能够增加Taxol的敏感性. 相似文献
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纤维支气管镜活检病变组织标本和痰标本Survivin基因的检测对肺癌的诊断价值 总被引:21,自引:0,他引:21
目的明确纤维支气管镜(以下简称纤支镜)活检病变组织和痰标本中SurvivinmRNA的检测在肺癌诊断中的意义。方法应用逆转录聚合酶链反应(RT PCR)法检测41例肺癌手术标本癌组织、癌旁组织和9例良性肺疾病病变组织手术标本,80例肺癌和30例良性肺疾病纤支镜活检病变组织标本及所有(160例)患者痰标本SurvivinmRNA表达情况,并与病理组织学、刷检细胞学和痰细胞学检查结果比较。结果肺癌手术切除标本癌组织SurvivinmRNA的阳性率为70.7%(29/41),高于癌旁组织[17.1%(7/41)]和良性肺疾病组织(1/9),差异有统计学意义(χ2值分别为23.97和10.93,P均<0.05),而癌旁组织与肺良性疾病组织相比,差异无统计学意义(χ2=0.20,P>0.05);纤支镜活检肺癌组织标本SurvivinmRNA的阳性率为63.8%(51/80),高于良性肺疾病的13.3%(4/30,χ2值为22.18,P<0.05);肺癌患者癌组织SurvivinmRNA表达与否及表达水平与患者年龄、性别及肿瘤的病理分型、分级、部位及转移情况均无明显相关性(P均>0.05)。肺癌患者痰标本SurvivinmRNA的阳性率是59.5%(72/121),癌细胞的检出率是47.1%(57/121);痰Survivin mRNA检测联合痰细胞学检查诊断肺癌的敏感性为80.2%(97/121),高于单独痰细胞学及单独痰SurvivinmRNA检测的敏感性(P均<0.05)。手术标本、纤支镜活检标 相似文献
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目的:探讨凋亡:抑制基因survivin反义寡核苷酸单用或联用bcl-2反义寡核苷酸对肺癌细胞株的作用,探讨其在抗癌方面的作用。方法:①实验于2002-08/2003-04在蚌埠医学院免疫学实验室完成。将对数生长期NCI—H446细胞分为6组:空白对照组,脂质体10mg/L组(仅加空脂质体),NSODN 500nmol/L组(该3组均为对照组),survivin反义寡核苷酸500nmol/L组,bcl-2反义寡核苷酸5μmol/L,survivin反义寡核苷酸500nmol/L+bcl-2反义寡核苷酸5μmol/L组(分别在脂质体介导下转染不同寡核苷酸,48h后收取细胞进行以下检测)。②在脂质体介导下,以survivin的反义寡核苷酸作用于肺癌细胞株NCI-H446和SPC—A1,于72h用反转录聚合酶链反应检测survivin mRNA表达。凋亡指数:(静止期/DNA合成前期)占整个细胞周期的百分比;增殖指数=(DNA复制期+合成后期/有丝分裂期)占整个细胞周期的百分比。②survivin反义寡核苷酸单独或联合bcl-2反义寡核苷酸作用NCI—H446后,用四甲基偶氮唑盐法检测细胞生长抑制率并计算两药相互作用指数,锥虫蓝拒染实验检测细胞死亡率。(3)计量资料差异性比较采用方差分析和q检验。结果:①两种肺癌细胞株皆表达survivin基因。survivin反义寡核苷酸作用细胞株后,出现生长抑制和细胞凋亡,细胞survivin mRNA明显下调,反义寡核苷酸500nmol/L作用72h后NCI—H446和SPC—A1细胞survivin mRNA抑制率分别达62.72%和67.43%。②四甲基偶氮唑盐法检测结果显示,survivin反义寡核苷酸和bcl-2反义寡核苷酸单独应用对NCI—H446细胞均有生长抑制作用;联合应用survivin反义寡核苷酸和bcl-2反义寡核苷酸的细胞生长抑制率为64.9%,优于单独应用(单用bcl-2反义寡核苷酸为34.2%)(P〈0.01),两药相互作用指数为0.708。锥虫蓝拒染实验显示,survivin反义寡核苷酸500nmol/L+bcl-2反义寡核苷酸5μmol/L组细胞死亡率为62.1%,高于两药单用时的31.4%和41.4%。流式细胞仪检测凋亡显示,与各对照组相比,survivin反义寡核苷酸和bcl-2反义寡核苷酸均可诱导细胞凋亡,凋亡率分别为43.6%和30.7%,两者联用凋亡率提高到58.6%(p〈0.01)。结论:①survivin反义寡核苷酸能抑制肺癌细胞株survivin基因表达,并诱导细胞凋亡和抑制生长。②survivin反义寡核苷酸联合bcl-2反义寡核苷酸具有显著协同抗癌作用。 相似文献
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以40%甘油作为保护液,红细胞在-80℃低温保存,实现了稀有血型红细胞、自身输血者的红细胞的长期保存使用(使用年限为10年)[1]。笔者采用40%甘油冰冻红细胞,用血细胞处理机洗涤红细胞去甘油化,最后添加MAP液制备成冰冻解冻去甘油红细胞,各项技术指标检测结果较为满意,现报告如下。1材料与方法1.1材料57.1%的甘油、三珠袋、9%的浓氯化钠(北京博得桑特输血器材公司);羟乙基淀粉40氯化钠(江苏常熟制药厂);0.9%的氯化钠(上海市血液中心)。1.2仪器RC.12BP离心机(美国Sorvall公司);Haemon-etics115细胞洗涤系统(美国血液公司);Julabo MP.19循… 相似文献
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口服葡萄糖水和蔗糖水预防献血反应的效果观察 总被引:2,自引:0,他引:2
随着无偿献血事业的飞速发展,人们对献血反应越来越重视,文献[1]有采用喝糖水等方法预防和控制献血反应的规定,为此,笔者于2004年11月-2005年3月采用献血前口服葡萄糖水和蔗糖水预防献血反应,结果报告如下。1材料与方法1.1对象观察期间本中心献血点体检合格的献血者10206名。1.2方法将献血者随机分为2组,献血前分别给与口服葡萄糖水(葡萄糖组)和蔗糖水(蔗糖组),(200-500)ml/人。按规定[1]采集200ml或400ml全血。献血后10min内观察献血反应情况。1.3统计分析采用χ2检验。2结果(表1)观察献血者10206名,有献血反应的99人,反应率为0·97%。表1… 相似文献