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酿酒酵母S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达 总被引:14,自引:0,他引:14
目的 构建S 腺苷甲硫氨酸合成酶基因工程菌 ,为酶促转化法生产S 腺苷甲硫氨酸奠定基础。方法 应用PCR技术从S 腺苷甲硫氨酸高产酿酒酵母染色体DNA中扩增得到S 腺苷甲硫氨酸合成酶基因sam2 ,将其克隆至表达载体pT7 7,转化大肠杆菌 ,1%琼脂糖电泳比较大小 ,筛选重组子。结果 SDS PAGE显示重组菌S 腺苷甲硫氨酸合成酶亚基分子量约为 4 2KDa ,平均表达量约占菌体总可溶性蛋白的 4 2 % ,酶活达到 14 .1U/g湿菌体 ,比宿主菌酶活提高 15 .7倍。结论 酿酒酵母SAM合成酶基因在大肠杆菌中高效表达 ,重组菌已具有初步的工业化应用价值 相似文献
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目的:研究变应性鼻炎(AR)大鼠鼻黏膜AMCase mRNA表达,探讨其与AR的关系。方法:30只SD大鼠,随机分为实验组和对照组。实验组20只,卵清白蛋白(OVA)隔日腹腔注射基础致敏2周,继之每日鼻腔局部激发1周,建立大鼠AR模型;对照组10只,生理盐水代替OVA进行实验。末次激发后根据鼻部症状累积评分评判AR造模是否成功,并取所有大鼠双侧鼻腔及中隔黏膜,常规苏木精-伊红染色病理明确AR诊断。提取鼻黏膜RNA,应用反转录合成cDNA,采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测AMCase mRNA在大鼠AR鼻黏膜中的表达。结果:RT-PCR检测AMCase mRNA表达,显示实验组与对照组差异有统计学意义(P<0.05);2AR组AMCase mRNA表达同鼻部症状评分正相关(r=0.411,P<0.05)。结论:大鼠AR鼻黏膜AMCase mRNA表达量增多,提示AMCase表达上调在变应性鼻炎的发病机制中起作用,抑制该酶活性可以成为AR治疗新的靶点。 相似文献
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目的观察冠状动脉内注射替罗非班对老年急性ST段抬高型急性心肌梗死(STEMI)患者直接经皮冠状动脉介入治疗(PCI)术中无复流的疗效。方法收集该院2008年1月至2011年1月老年急性STEMI行直接PCI术中出现无复流患者87例,其中替罗非班组42例,对照组45例。评估心肌梗死溶栓试验(TIMI)血流分级、TIMI心肌组织灌注分级(TMPG)、PCI术后90 min ST段完全回落率、肌酸激酶工功酶(CK-MB)和肌钙蛋白T(cTnT)峰值、PCI术后7 d左心室射血分数(LVEF)、住院期间和PCI术后180 d内主要心脏不良事件(MACE)、住院期间出血发生率。结果替罗非班组TIMI 3级及TMPG 3级血流比例均高于对照组(分别为81.0%vs 51.1%,76.2%vs 46.7%,均P<0.01),替罗非班组ST段完全回落率大于对照组(76.2%vs 48.9%,P<0.01),CK-MB及cTnT峰值均低于对照组〔(177.1±36.2)U/L vs(221.6±44.6)U/L,(4.90±1.85)ng/L vs(6.55±2.04)ng/L,均P<0.01)〕,PCI术后7 d LVEF高于对照组(49.3%±6.3%vs 44.9%±5.2%,P<0.01);住院期间MACE少于对照组,但差异无统计学意义(33.3%vs 60.0%,P>0.05);PCI术后180 d内MACE少于对照组(40.5%vs 71.7%,P<0.01);替罗非班组与对照组均增加了患者住院期间出血发生率,分别为23.8%和11.1%,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论冠状动脉内注射替罗非班可以增加老年急性STEMI患者直接PCI术中发生无复流现象后冠状动脉血流和心肌组织灌注,减少心肌坏死,改善心功能和预后,不增加严重出血的风险,是老年STEMI患者直接PCI术中出现无复流现象后的一种安全、有效的治疗方法。 相似文献