冠心病血清对氧磷酯酶1活性与氧化功能指标的研究

目的初步探讨冠心病（CHD）中血清对氧磷酯酶1（PON1）的抗氧化功能。方法测定心绞痛及心肌梗死患者血清中PON1活性,比较其与氧化指标丙二醛（MDA）、还原型谷胱甘肽（GSH）及血脂指标的相关性。结果心绞痛组及心肌梗死组患者血清PON1均低于正常对照组,且心肌梗死组低于心绞痛组。与脂质氧化产物MDA呈负相关,与抗氧化指标GSH呈正相关。结论血清PON1参与脂质抗氧化机制,可能是高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）抑制动脉粥样硬化的主要酶。     

血清中对氧磷酯酶1活性的自动化检测

目的血清对氧磷酯酶1(PON1)的自动化检测方法建立及评价.方法在Hitachi 7600上建立自动化测定血清PON1的参数,对该方法的重复性、线性、干扰分析进行评估.并对正常人血清PON1活性进行分析.结果低、中、高3个浓度PON1的总变异分别为6.5%、4.2%、1.7%,测定线性可达800 U/ml.标本中胆红素浓度在430 μmol/L以下,血红蛋白浓度在5.5 g/L以下以及三酰甘油浓度在25.0 mmol/L以下对血清PON1的测定均无明显影响.正常人血清PON1活性呈正态分布,参考范围为45.5～268.8 U/ml.结论建立的血清PON1自动化检测方法简单、可靠、快速、廉价,适合临床实验室常规测定需要.     

一步法检测乙型肝炎病毒前S1蛋白及其临床意义

[目的]探讨乙型肝炎病毒前S1蛋白(PreS1)检测方法及在乙型病毒性肝炎中的诊断意义。[方法]采用ELISA法对156例各型乙型病毒性肝炎患者血清标志物PreS1进行了检测，同时对每个标本进行了HBV—DNA定量及乙肝三系的双盲测定。比较各组PreS1、HBV—DNA及乙肝三系。[结果]并结合临床进行分析。[结论]血清乙型肝炎病毒前S1蛋白(PreS1)测定可以作为HBV感染、复制及预后的有意义的指标。     

448例消化系统疾病中甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶的检测

目的探讨甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶(GPDA)在消化系统疾病中检测的意义.方法用连续检测法检测448例我院消化科住院病人血清中GPDA的活性,比较分析各组病人GPDA结果.对胃溃疡组、正常人组、良性胃病各组结果进行了对比研究.结果胃癌组GPDA活力较健康组显著降低(P＜0.01);胃溃疡组GPDA活力等有较大下降(P＜0.05);肝癌组明显升高(P＜0.01),食道肿瘤与健康组比较无显著性差异(P＞0.05).结论血清GPDA活力测定可以作为胃溃疡、胃癌等消化系统疾病的辅助诊断的指标之一.     

血清对氧磷酯酶联合氧化低密度脂蛋白在缺铁性贫血的临床意义

目的探讨血清对氧磷酯酶1（PON1）在缺铁性贫血中的意义。方法测30例缺铁性贫血（IDA）患者血清PON1和氧化低密度脂蛋白（OX-LDL）的水平，并与33例健康对照组比较。结果30例IDA患者PON1值为78．9±6．4U／L，明显低于对照组PON1（147．1±8．2U／L）；而OX-LDL水平为640．1±168．9μg/L，明显高于健康对照组（390．9±199．6μg／L），差别具有统计学意义（P〈0．01）。相关性分析发现，IDA组PON1活性与OX-LDL含量存在明显的负相关（r=-0．598，P〈0．01）。结论PON1活性下降，OX-LDL升高．提示IDA患者体内抗氧化防御体系缺陷，脂质发生过氧化反应，存在动脉粥样硬化的高风险。     

百草枯中毒患者血清趋化因子的测定及其意义

目的 观察百草枯(paraquat,PQ)中毒患者血清趋化因子巨噬细胞炎症蛋白-1α(MIP-1α)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)及基质细胞衍生因子-1(SDF-1)的水平,探讨其在PQ中毒肺损伤发生发展中的作用.方法 用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测20例PQ中毒患者中毒后1、7、12、21 d时血清中MIP-1α、MCP-1及SDF-1水平,并与21例健康对照组进行比较.结果 MIP-1α水平于中毒后1 d上升,7d达到高峰后逐渐下降,中毒后1、7和14 d MIP-1α水平分别为(62.6±14.2)、(101.3±21.2)、(69.8±13.8)pg/ml,明显高于健康对照组,差异有统计学意义(P＜0.01);MCP-1的水平在中毒后7、14、21 d逐渐升高.明显高于健康对照组,差异有统计学意义(P＜0.01);中毒组SDF-1水平于中毒后7和14 d明显高于健康对照组,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 MIP-1α、MCP-1及SDF-1通过趋化靶细胞迁移,调节细胞分化增殖等路径参与PQ中毒的发生进展.     

百草枯中毒患者血清趋化因子的测定及其意义

目的 观察百草枯(paraquat,PQ)中毒患者血清趋化因子巨噬细胞炎症蛋白-1α(MIP-1α)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)及基质细胞衍生因子-1(SDF-1)的水平,探讨其在PQ中毒肺损伤发生发展中的作用.方法 用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测20例PQ中毒患者中毒后1、7、12、21 d时血清中MIP-1α、MCP-1及SDF-1水平,并与21例健康对照组进行比较.结果 MIP-1α水平于中毒后1 d上升,7d达到高峰后逐渐下降,中毒后1、7和14 d MIP-1α水平分别为(62.6±14.2)、(101.3±21.2)、(69.8±13.8)pg/ml,明显高于健康对照组,差异有统计学意义(P＜0.01);MCP-1的水平在中毒后7、14、21 d逐渐升高.明显高于健康对照组,差异有统计学意义(P＜0.01);中毒组SDF-1水平于中毒后7和14 d明显高于健康对照组,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 MIP-1α、MCP-1及SDF-1通过趋化靶细胞迁移,调节细胞分化增殖等路径参与PQ中毒的发生进展.     

不同基因融合方式对HIV-1AE2f Tat、Rev和Nef蛋白免疫原性的影响

目的 构建表达HIV-1 AE2f gp145-tat-rev-nef融合基因的DNA疫苗,并比较gp145-tat-rev-nef(AE-Gp145TRN)和tat-rev-integrase(c-half)(AE-TRIVN)两种不同基因融合方式对Tat、Rev和Nef蛋白免疫原性的影响.方法 按人源密码子使用频率对HIV-1 AE2f的gp145、tat、rev和nef基因序列进行优化并构建DNA疫苗.经Western blot进行体外表达检测后,利用小鼠模型比较AE-Gp145TRN与AE-TRIVN的免疫原性.结果 限制性酶切及DNA测序结果表明AE-Gp145TRN融合基因表达重组质粒构建正确;Western blot结果显示其能够在体外表达相应的融合蛋白.小鼠免疫后IFN-γ ELISPOT检测结果显示:AE-TRIVN所活化的针对Tat、Rev和Nef蛋白的总T细胞反应强度[(148±91)SFCs/106脾细胞]显著高于Gp145TRN[(55±28)SFCs/106脾细胞,P=0.017].T细胞反应分布情况显示:AE-TRIVN所活化的T细胞反应主要集中在Rev蛋白上;而Gp145TRN则可以显著提高对Nef蛋白的免疫识别.结论 AE-TRIVN与Gp145TRN在小鼠体内所活化的T细胞反应特征有明显区别,提示不同的抗原融合方式可能影响融合基因DNA疫苗的免疫结果.

Abstract：

Objective To construct DNA vaccine expressing HIV-1 AE2f gp145-tat-rev-nef fusion gene( AE-Gp145TRN) and to compare the immunogenicities of DNA vaccines expressing Tat, Rev and Nef in gene fusion formulations of tat-rev-integrase(c-half)-vif-nef( AE-TRIVN) and AE-Gpl45TRN. Methods DNA vaccine was constructed by inserting the codon optimized HIV-1 AE2( gp145-tat-rev-nef fusion gene into mammalian expression DNA vector. In vitro expression efficiency of the constructed DNA vaccine was determined by Western blot and the immunogenicities of AE-Gpl45TRN and AE-TRIVN were compared by immunizing female BALB/c mice. IFN-r ELISPOT assay was used to read out the specific T cell immunity. Results Western blot assay showed the constructed DNA vaccine could be expressed efficiently in vitro. After vaccination, AE-TRIVN mounted significantly higher T cell responses against Tat, Rev and Nef[(148±91)SFCs/106 splenocytes]than Gpl45TRN[(55±28) SFCs/106 splenocytes]. Specific T cell responses elicited by AE-TRIVN predominantly targeting Rev, whereas Gpl45TRN could significantly enhance T cell responses against Nef. Conclusion AE-TRIVN and Gpl45TRN induced distinct T cell response modalities, which implied different gene fusion formulations may affect the immunogenicity of specific DNA vaccines.     

大鼠非酒精性脂肪性肝炎形成过程中肠道通透性的变化

非酒精性脂肪性肝炎（NASH）的发病机制尚未明确，有研究认为与内毒素有关。内毒素主要来源于肠道。有研究发现，酒精性肝病及肝炎肝硬化患者肠道大分子物质的通透性增加。现尚少有对大鼠NASH各阶段肠道通透性动态变化情况的相关报道。本研究动态观察了NASH模型大鼠肠道通透性的变化，旨在探索肠道通透性改变在NASH发病中的作用。     

不同基因融合方式对HIV-1AE2f Tat、Rev和Nef蛋白免疫原性的影响

Objective To construct DNA vaccine expressing HIV-1 AE2f gp145-tat-rev-nef fusion gene( AE-Gp145TRN) and to compare the immunogenicities of DNA vaccines expressing Tat, Rev and Nef in gene fusion formulations of tat-rev-integrase(c-half)-vif-nef( AE-TRIVN) and AE-Gpl45TRN. Methods DNA vaccine was constructed by inserting the codon optimized HIV-1 AE2( gp145-tat-rev-nef fusion gene into mammalian expression DNA vector. In vitro expression efficiency of the constructed DNA vaccine was determined by Western blot and the immunogenicities of AE-Gpl45TRN and AE-TRIVN were compared by immunizing female BALB/c mice. IFN-r ELISPOT assay was used to read out the specific T cell immunity. Results Western blot assay showed the constructed DNA vaccine could be expressed efficiently in vitro. After vaccination, AE-TRIVN mounted significantly higher T cell responses against Tat, Rev and Nef[(148±91)SFCs/106 splenocytes]than Gpl45TRN[(55±28) SFCs/106 splenocytes]. Specific T cell responses elicited by AE-TRIVN predominantly targeting Rev, whereas Gpl45TRN could significantly enhance T cell responses against Nef. Conclusion AE-TRIVN and Gpl45TRN induced distinct T cell response modalities, which implied different gene fusion formulations may affect the immunogenicity of specific DNA vaccines.