双波长测定中次波长的选择

目前,由于检验新技术的不断发展,有很多全自动生化分析仪采用了观波长测量法,即在样品的测量过程中同时记录主波长和次波长吸光度的变化值[1]。主波长（Primarywavelength）也叫分析波长,是由样品和试剂反应后,我们所要监测的吴色物质的最大吸收峰决定的,一般由试剂生产厂家提供给我们。次波长（secondarywavelength）也叫辅助波长,它的应用主要是为了消除光源强度的变化和干扰物的存在对测量结果的影响。本文就从这两方面对次波长的选择提一点看法,供同仁们参考。1光源强度的变化对吸光度的影响当前的全自动生化分析仪大部分采用…     

高雄激素调控颗粒细胞系全基因组靶基因及通路的初步探讨

目的:全基因组范围内探索高雄激素调控卵巢颗粒细胞的直接效应基因及通路,为高雄激素参与多囊卵巢综合征(PCOS)的发病机理提供数据支持。方法:以人卵巢颗粒细胞系KGN为研究对象,用高浓度睾酮(10^-5mol/L)处理,应用雄激素受体的抗体进行染色质免疫共沉淀,构建DNA文库,进行高通量测序及生物信息学分析。结果:高浓度睾酮处理后,KGN细胞中雄激素受体结合的Peak区域与对照组明显不同。高雄激素诱导其受体结合的Peak为1823个,大部分集中于基因间区与内含子。Peak关联靶基因富集到细胞凋亡、铁死亡、细胞黏附分子、磷脂酶D信号途径、cAMP信号通路、磷脂酰肌醇信号系统、磷酸肌醇代谢、神经活性配体-受体相互作用8个信号通路,涉及基因43个。结论:研究揭示了高雄激素诱导的卵巢颗粒细胞发生改变的重要信号通路,有助于从源头上阐明雄激素参与PCOS发病机理的机制,并为PCOS的治疗提供潜在的靶点。     

取卵日卵泡大小对体外受精后胚胎早期发育影响的护理研究

目的 探讨护理人员取卵日监测卵泡大小对体外受精-胚胎移植（IVF-ET）中卵子成熟及胚胎早期发育的影响.方法 以2012年3月～ 2013年12月来山东省枣庄市妇幼保健院生殖中心行IVF-ET的87个患者为研究对象,研究方法以HCG注射日辅助生殖专职护士进行健康支持教育,取卵日经过专职培训的手术室护士监测观察卵泡直径为依据,对取卵日卵泡大小进行监测、评估、测量液体量,按照卵泡大小将其分大卵泡组、中卵泡组和小卵泡组.取卵手术过程中详细告知实验室人员取出卵泡的大小、取出的液体量.结果 取卵日直径大于15 mm的卵泡获得的卵母细胞成熟度较高（P＜0.01）;（2）大卵泡组卵泡优胚率高于中卵泡组,中卵泡组高于小卵泡组,差异极显著（P＜0.01）.结论 在IVF-ET中,手术室护士通过严密观察、监测卵泡的大小,对实验室人员的详细告知,实验室人员将获得的卵子严格按照大、中、小分类培养,对优质胚胎的获得提供了良好的条件,有利于提高卵子的成熟、受精和早期胚胎发育;有利于提高体外受精-胚胎移植成功率.     

人骨髓间充质干细胞体外向肝样细胞的诱导分化

目的：研究人骨髓来源的间充质干细胞（human bone marrow derived mesenchymal stemcells,hBM-MSCs）在肝细胞生长因子（HGF）、成纤维细胞生长因子-4（FGF-4）、抑瘤素M（OSM）诱导下,体外向肝样细胞的诱导分化。方法：通过密度梯度离心和贴壁培养法获得hBM-MSCs,分离的hBM-MSCs扩增传至第6代,流式细胞仪检测hBM-MSCs表面CD34、CD45、CD105、CD166表达。第6代hBM-MSCs生长达100%融合时采用两步法对hBM-MSCs进行诱导分化。第1～第14天采用IMDM诱导培养基（含2%FCS、20ng/mL HGF、20ng/mL FGF-4）,第15～第21天在上述培养基中加OSM（10ng/mL）,促进诱导细胞的成熟,同时收集第0、第7、第14、第21天培养上清液标本,ELISA法测ALB浓度。诱导培养21d后采用RT-PCR、免疫荧光技术检测诱导后肝细胞特异标志CK18、ALB的表达,PAS染色检测诱导MSCs糖原储存。结果：传至第6代的hBM-MSCsCD34、CD45表达阴性,CD105、CD166表达阳性。在细胞因子...     

IL—2和γ—IFN对晚期肝癌患者淋巴细胞粘附肿瘤细胞能力的 …

目的 研究重组ＩＬ－２（ｒＩＬ－２）的γ－ＩＦＮ对晚期肝癌患者淋巴细胞粘附肿瘤细胞能力的影响。方法 晚期肝癌患者２４例,用ｒＩＬ－２和γ－ＩＦＮ预培养患者外周血淋巴细胞细胞４ｈ,采用肿瘤淋巴细胞花环试验测定淋巴细胞粘附试验测定淋巴细胞粘附肿瘤细胞直接接触效应与活性,结果 ｒＩＬ－２对正常人和肝癌患者的淋巴细胞免疫粘 附肿瘤能力都有明显的提升效应,但单独使用ｒＩＬ－２对肝癌患者淋巴细胞免疫粘附肿瘤细     

慢性乙型肝炎患者CD8~+CD28~+T/CD8~+CD28~-T比值变化及临床意义

目的探讨慢性乙型肝炎患者CD8+CD28+T/CD8+CD28-T比值变化及临床意义。方法 流式细胞仪测定正常对照、慢性乙型肝炎患者CD8+CD28+T/CD8+CD28-T的百分数,并计算CD8+CD28+T/CD8+CD28-T比值,慢性乙型肝炎组根据HBV-DNA含量分为两组,低病毒载量组(HBV-DNA<106拷贝/ml)和高病毒载量组(HBV-DNA>106拷贝/ml),并分别计算CD8+CD28+T/CD8+CD28-T比值。结果慢性乙型肝炎患者组CD8+CD28+T/CD8+CD28-T比值与正常对照组相比明显降低,两者差异有统计学意义(P<0.01);慢性乙型肝炎高病毒载量组CD8+CD28+T/CD8+CD28-T比值低于低病毒载量组(P=0.039),两组差异有统计学意义。结论 慢性乙型肝炎患者CD8+CD28+T/CD8+CD28-T比值下降可能是病毒不能清除,而长期存在的原因之一。     

慢性HBV感染者调节性T细胞、黏附细胞对细胞毒T淋巴细胞体外增殖的影响

乙型肝炎患者体内细胞毒T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocytes,CTL)的功能和数量直接影响着病毒的清除和肝细胞的损伤.本实验主要探讨慢性HBV感染者调节性T细胞(Tr)、黏附细胞(AC)对HLA-A2限制的HBV特异性CTL体外增殖的影响.     

子宫内膜癌中Syk基因的表达及其甲基化分析

目的 探讨Syk基因在子宫内膜良、恶性组织中的表达及其启动子甲基化与子宫内膜癌发生、发展的关系.方法 采用RT-PCR方法检测52例子宫内膜癌及癌周组织、30例子宫内膜不典型增生、28例复杂型増生、30例单纯型增生和40例正常内膜组织中Syk mRNA 的表达情况,同时采用MSP方法检测其基因启动子甲基化情况.结果 在子宫内膜癌组、癌周组织、不典型增生组、复杂和单纯型增生及正常子宫内膜组中Syk基因表达依次增高,Syk基因甲基化程度依次降低,差异有统计学意义(P<0.05);Syk基因表达水平及其基因启动子甲基化程度在复杂型增生、单纯型增生及正常子宫内膜间的差异无显著性(P>0.05);子宫内膜癌中Syk基因的阳性表达及甲基化程度与癌症的临床分期(χ2=4.65,P<0.01;χ2=4.33,P<0.05)、淋巴结转移(χ2=10.68,P<0.01; χ2=5.86,P<0.05) 、肌层浸润深度(χ2=5.82,P<0.05; χ2=3.90,P<0.05)相关,而与内膜癌组织学分级无明显相关性(χ2=0.03,P>0.05;χ2=0.94,P>0.05).Syk基因启动子甲基化与Syk基因表达缺失明显相关(P<0.05).结论 Syk 基因启动子甲基化可能是导致Syk基因失活的原因之一,Syk基因启动子甲基化可能与子宫内膜癌发生发展有关.     

双波长测定法中次波长毫摩尔消光系数的计算

目前 ,有很多生化分析仪采用了双波长测量法进行酶活力浓度的测定。如果在样品的测量过程中全程用双波长读取吸光度 ,由于呈色物质在次波长上也有吸光度 ,所以在计算 F(计算因子 )时要用呈色物质在主波长上毫摩尔消光系数减去其在次波长上的毫摩尔消光系数〔1〕。因此 F的计算公式 :F=(SV RV)× 1 0 3(ε主 -ε次 )· L· SVε主 :呈色物质在主波长上的毫摩尔消光系数(Lmmol- 1、cm- 1 )。ε次 :呈色物质在次波长上的毫摩尔消光系数(Lmmol- 1、cm- 1 )。1光径 (cm)。 RV;试剂的体积 (μl)。 SV:样品的体积(ul)一般的生化分析仪都有自…     

IL-2和γ-IFN对晚期肝癌患者淋巴细胞粘附肿瘤细胞能力的影响

目的 研究重组 ＩＬ－ ２（ｒＩＬ－２）和 γ－ＩＦＮ对晚期肝癌患者淋巴细胞粘附肿瘤细胞能力的影响。方法　　　晚期肝癌患者２４例,用 ｒＩＬ－２和 γ－ＩＦＮ预培养患者外周血淋巴细胞 ４ｈ,采用肿瘤淋巴细胞花环试验测定淋巴细胞粘附肿瘤细胞直接接触效应与活性．结果 ｒＩＬ－２对正常人和肝癌患者的淋巴细胞免疫粘附肿瘤能力都有明显的的提升效应,但单独使用 ｒＩＬ－２对肝癌患者淋巴细胞免疫粘附肿瘤细胞的提升效应较差,ｒＩＬ－２与γ－ＩＦＮ联合使用可显著增强淋巴细胞对肿瘤细胞的免疫粘附功能．结论　　肝癌患者淋巴细胞免疫粘附肿瘤细胞能力明显低下,ｒＩＬ－２与γ－ＩＦＮ联合使用具有协同刺激肝癌患者淋巴细胞活性之作用．