人胚胎肾小球系膜细胞培养与鉴定

肾小球系膜细胞(glomerular mesangial cells,GMC) 是肾小球内具有活跃功能的固有细胞,多种刺激因素均可使肾小球系膜细胞增生, 构成各种肾小球疾病的病理基础,进而因系膜基质增多而导致肾小球硬化.自1975年Fish等[1]首次成功培养分离GMC以来,国内外学者已将肾小球系膜细胞的体外培养作为研究肾脏细胞生物学及细胞免疫病理学的常用方法之一.由于肾小球系膜细胞培养方法各异[2～4],难度较大.为此,我们在借鉴国内外学者研究方法的基础上进行探索,成功地培养了人胚胎肾小球系膜细胞,现报告如下.     

绞股蓝皂苷对糖尿病肾病大鼠肾组织转化生长因子β1表达的影响

目的：探讨绞股蓝皂苷对糖尿病肾病大鼠肾脏中转化生长因子β1（TGF-β1）表达的影响，以了解其对早期糖尿病肾病的防治作用和分子机制。方法：采用单侧肾切除加STZ注射法改良复制糖尿病肾病模型，实验分为正常组、模型组、治疗组（绞股蓝皂苷高、中、低浓度及人参皂苷Rb1对照组），观察糖尿病肾病模型大鼠一般情况、生化指标、肾组织病理变化、肾脏中TGFβ1 mRNA及蛋白表达水平。结果：治疗组一般情况、生化指标、肾组织病理变化均优于模型组，同时TGFβ1 mRNA及蛋白表达水平也较模型组明显下调，其中中剂量组与人参皂苷Rb1对照组的作用相接近。结论：绞股蓝皂苷可用于治疗早期糖尿病肾病，其机制可能与下调TGFβ1高表达，减少肾小球系膜区ECM的积聚有关。     

三七总皂苷对大鼠肾小球系膜细胞增殖及细胞周期的影响

目的:观察三七总皂苷(total Panax Notoginseng Saponins,tPNS)对体外培养的SD大鼠肾小球系膜细胞(Mesangial cells,MCs)增殖以及细胞周期的影响,以探讨tPNS在防治肾小球炎症和硬化中的作用及可能机理。方法:分离培养SD大鼠MCs,分为5组(n=8):空白对照组、血清刺激组、3个不同浓度(100,200,400μg/mL)的tPNS干预组。分别采用MTT法、细胞毒检测及流式细胞术观察大鼠MCs增殖及细胞周期的变化。结果:tPNS呈量效依赖抑制MCs增殖;降低S G2/M期细胞比例,且对MCs均无明显细胞毒性。结果:三七总皂苷通过减少DNA合成期(S期)细胞数量,抑制大鼠MCs增殖,而非依赖于诱导细胞凋亡和细胞毒性。     

雷公藤内酯醇对AngⅡ介导的大鼠GMC增殖的影响

目的:观察不同剂量雷公藤内酯醇对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)介导的肾小球系膜细胞增殖的影响,探讨其可能机制。方法:分离培养大鼠GMC,用10-6mol/LAngⅡ刺激GMC,将培养的大鼠GMC随机分为5组:正常培养对照组、AngⅡ刺激组、AngⅡ和3种不同浓度(15、10、5μg/L)的雷公藤内酯醇共孵育组。分别采用MIT法及流式细胞术检测大鼠GMC增殖及细胞周期的变化。结果:雷公藤内酯醇能抑制AngⅡ介导的大鼠GMC增殖,降低S G2/M期细胞比例,其中以高浓度雷公藤内酯醇作用最强(P<0.01)。结论:雷公藤内酯醇可能通过减少DNA合成期(S期)细胞数量,抑制大鼠GMC增殖。     

厄贝沙坦对血管紧张素Ⅱ介导的大鼠肾小球系膜细胞增殖的影响

目的观察不同剂量厄贝沙坦(Irb)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)介导的肾小球系膜细胞(MCs)增殖及细胞周期的影响,探讨Irb抑制MCs增殖的可能机制。方法分离培养大鼠MCs,用10-6mol/LAngⅡ刺激MCs,将培养的大鼠MCs随机分为空白对照组、AngⅡ刺激组、高浓度Irb组(10-5mol/L)、中浓度Irb组(10-6mol/L)、低浓度Irb组(10-7mol/L)。采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法及流式细胞术检测大鼠MCs增殖及细胞周期的变化。结果AngⅡ刺激组A值显著高于空白对照组,而高、中、低浓度Irb组A值均明显低于AngⅡ刺激组,且浓度越高作用越明显;AngⅡ刺激组较其他各组G0/G1降低,(S G2)/M升高,而高、中、低浓度Irb组较AngⅡ刺激组G0/G1明显上升、(S G2)/M明显降低,且浓度越高作用越明显;10-7～10-5mol/LIrb对MCs无明显细胞毒性作用。结论Irb可能是通过阻断AT1R介导的MCs的有丝分裂、增生及蛋白合成,从而抑制MCs的增殖。     

体味的本质

体味有不同人的体味主要是由人体皮肤中的汗腺、皮肤腺等多种腺体产生的分泌物挥发而形成的气味.人体的新陈代谢可产生几百种化学物质,均与气味有关.主要包括二氧化碳、硫化氢、甲烷、苯、醛、酮、醚、卤化烃等烃的衍生物,这些物质按不同的比例组合后输出体外.由于人们所吃的食物成分不同,身体新陈代谢不同,加之每个人皮肤汗腺、皮脂腺...     

绞股蓝总皂苷对糖尿病肾病大鼠肾皮质基因表达谱的影响

目的：探讨绞股蓝总皂苷对糖尿病肾病大鼠肾皮质基因表达谱的影响及分析绞股蓝总皂苷对糖尿病肾病在基因水平上的作用机制。方法：应用基因芯片技术比较绞股蓝总皂苷治疗组与糖尿病肾病模型组基因表达谱差异。结果：绞股蓝总皂苷治疗组与糖尿病肾病模型组间差异表达的基因有135条,上调基因31条,下调基因104条。结论：绞股蓝总皂苷能减少糖尿病肾病小鼠的蛋白尿、保护肾功能的机制可能与其抑制晚期糖基化终末产物的作用有关。     

抑肺饮对肺腺癌细胞A549裸鼠移植瘤的抑瘤作用

目的：观察中药抑肺饮对肺腺癌细胞A549裸鼠移植瘤的抑制作用，探讨其抑制细胞增殖的作用机制。方法：将肺腺癌细胞A549接种于裸鼠腋窝皮下，形成移植瘤，实验分为阴性对照组、鸦胆子油对照组、抑肺饮高、中、低剂量治疗组，采用流式细胞术检测细胞周期，免疫组织化学法检测P16基因及血管内皮生长因子（VEGF）、P53基因的表达。结果：抑肺饮可明显抑制移植瘤的增长，使G0／G1期细胞明显增多，显著上调P53、P16蛋白的表达，并下调VEGF的表达，与阴性对照组比较，有统计学差异（P〈0．05），中剂量组与鸦胆子油对照组效果相当（P〉0．05）。结论：中药抑肺饮对肺腺癌细胞A549裸鼠移植瘤具有抑制作用，其机制可能与其抑制细胞增殖有关。     

雷公藤内酯醇作用机制研究进展

雷公藤内酯醇(triptolide,Tri;又称雷公藤甲素、PG-490),是从雷公藤中分离出的含有3个环氧基的二萜内酯化合物,外观呈无色针状结晶体,相对分子质量为360,分子式为C2OH24O6,在体内化学性质稳定,生理活性强,是雷公藤发挥免疫抑制作用的主要成分之一,其相关效价比雷公藤总苷高100～200倍[1]。相对雷公藤的其他单体而言,雷公藤内酯醇获得较易,全合成也已成功。近年来国内外学者对其药理作用机制进行了大量的研究,本文综述了近20年来国内外的研究进展。1理化性质和结构特点雷公藤内酯醇为白色晶体,熔点(mp)226～230℃,不溶于水,溶于二甲亚砜、…     

雷公藤内酯醇对AngⅡ介导的肾小球系膜细胞核因子-κB活化及MCP-1表达的影响

目的：观察不同剂量雷公藤内酯醇对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）介导的肾小球系膜细胞（GMC）核因子-κB（NF-κB）活化及单核细胞趋化因子-1（MCP-1）表达的影响，探讨雷公藤内酯醇抑制肾小球系膜细胞炎症因子表达的可能机制。方法：分离培养大鼠GMC，用10^-6mol／L AngⅡ刺激GMC，将培养的大鼠GMC随机分为5组：正常培养对照组、AngⅡ刺激组、AngⅡ和3种不同浓度的雷公藤内酯醇共孵育组。分别采用酶联免疫激光扫描共聚焦显微镜、ELISA、RT—PCR法、Western Blot法，检测GMC内NF-κB p65核易位阳性率、细胞培养上清液中MCP-1水平、GMC内MCP-1 mRNA表达及ⅠκBα蛋白表达水平。结果：雷公藤内酯醇呈剂量依赖性下调AngⅡ介导的大鼠GMC内NF-κB p65水平，抑制AngⅡ诱导的大鼠GMC MCP-1及MCP-1 mRNA的表达，抑制AngⅡ诱导的大鼠GMC内ⅠκBα蛋白表达下调。结论：雷公藤内酯醇能够抑制AngⅡ诱导的大鼠GMC ⅠκB的磷酸化降解及NF—κB活化；抑制AngⅡ诱导的大鼠GMCMCP-1 mRNA表达MCP-1分泌。