BCOR突变通过PI3K/Akt/mTOR通路介导 MDS细胞生物学行为改变的机制研究

目的 探讨BCOR(BCL6 co-repressor)基因突变介导骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndromes, MDS)细胞生物学行为的分子机制。方法 通过构建BCORP483L过表达慢病毒以及空载体病毒,转染K562细胞,采用集落形成实验检测BCOR突变对细胞克隆形成能力的影响,流式细胞术检测细胞凋亡、细胞周期,Western blot法和实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction, RT-qPCR)方法检测细胞焦亡和PI₃K/Akt/mTOR通路分子水平,采用转录组测序技术(RNA-sequencing, RNA-Seq)检测分析BCORP483L突变对下游靶基因表达的影响。结果 BCORP483L突变显著地抑制细胞克隆形成能力,促进细胞凋亡,并导致细胞周期阻滞和细胞焦亡水平增加。RNA-Seq分析发现,BCORP483L突变后K562内与细胞凋亡、G₂M周期检查点、慢性髓系白血病、细胞衰老、细胞内炎性反应相关的基因以及原癌基因MYC目标基因表达上调。Western blot法实验进一步证实,BCORP483L突变细胞的PI₃K/Akt/mTOR通路明显受到抑制。结论 BCOR突变导致细胞PI₃K/Akt/mTOR通路受到抑制,进而导致细胞凋亡增加、增殖受抑。BCOR突变能通过上调细胞衰老相关基因以及原癌基因MYC目标基因表达,提高细胞内炎性反应水平,从而促进MDS疾病进展。