附睾蛋白酶抑制剂对前列腺特异性抗原活性的抑制作用

目的 观察附睾蛋白酶抑制剂(Eppin)是否抑制前列腺特异性抗原(PSA)酶活性.方法 利用分子克隆技术体外构建、表达、纯化重组Eppin和PSA.利用PSA水解变色底物S-2586的颜色变化,于分光光度计下测定其吸光度值,代表PSA酶反应速度,反应体系是在缓冲液0.1 mol/LTris-HCl,pH8.3,1.0 mol/L NaCl中进行,观察不同浓度Eppin的加入对PSA酶反应速度的影响.结果通过体外重组技术获得较高纯度和生理活性的Eppin和PSA,通过PSA水解变色底物S-2586的检测,重组PSA具有酶活性,0.3 μmol/L PSA与底物S-2586反应的饱和曲线分析显示Km(反应速度为最大反应速度一半时的底物浓度)值是0.5 μmol,底物饱和浓度0.2 mmol/L,分别加入4中不同浓度的重组Eppin 0、0.56、1.16、2.32 μmol/L,随着Eppin浓度的增加,PSA水解其变色底物S-2586速度明显减慢,PSA活性越来越受到抑制.结论 附睾蛋白酶抑制剂(Eppin)是前列腺特异性抗原(PSA)一种新的特异性抑制剂.

Abstract：

Objective To investigate the inhibitory effects of the epididymal protease inhibitor (Eppin) on the activity of prostate specific antigen (PSA).Methods Recombinant Eppin and recombinant PSA were produced by molecular cloning technique in vitro.The enzymatical analysis of Eppin inhibiting PSA was done in the reaction buffer 0.1 mol/L Tris-HC1,pH 8.3,1.0 mol/L NaCl.The hydrolysis of velocity of PSA to the chromogenic substrate S-2586 was detected by spectrometer.Results Recombinant Eppin and PSA with high purity were produced by molecular cloning technique.The recombinant PSA had the enzymatical activity by hydrolyzing its substrate S-2586.0.3μmol/L PSA and the substate S-2586 reaction to the saturation curve analysis showed that Km( response rate of half the maximum reaction rate when the substrate concentration) value was 0.5μmol,and substrate saturated concentration was 0.2 mmol/L.With the increases of Eppin (0,0.56,1.16,2.32μmol/L),the hydrolysis velocity of PSA to S-2586 was slowed down.Conclusion Eppin,as a new inhibitor,specifically inhibits the activity of PSA.     

邻苯二甲酸二丁酯孕期暴露致仔鼠睾丸膜联蛋白A5的表达差异

背景:国内外关于邻苯二甲酸二丁酯导致雄性生殖系统畸形发生机制的探讨多集中于邻苯二甲酸二丁酯干扰胚胎期睾丸睾酮合成途径的研究,对其基因表达调控的因素及功能蛋白质之间相互干扰的网络效应却并不明了。蛋白质组学能够从整体水平反映蛋白质组分,并筛选功能相关蛋白。目的:探讨邻苯二甲酸二丁酯胚胎期暴露对胎鼠睾丸蛋白表达谱的影响,分离并鉴定差异表达蛋白质。设计、时间及地点:随机对照动物实验,实验于2006-08/2007-10在南京医科大学动物实验中心及南京医科大学生殖医学重点实验室完成。材料:将孕鼠随机分为实验组和对照组,每组5只。妊娠14～18d。方法:实验组按800mg/(kg·d)染毒孕鼠,对照组予大豆油5mL/d。妊娠21d取出胚胎大鼠睾丸,提取总蛋白,进行二维凝胶电泳分离和图像分析,筛选出的差异蛋白质点利用质谱技术进行鉴定,并选择关键蛋白进行验证。主要观察指标:①两组蛋白的电泳差异比较。②酶切,MALDI-TOF分析,数据库检索,生物信息学检索结果。③两组蛋白Western blotting检测及免疫组织化学染色结果。结果:共筛选出33个差异表达蛋白(t≥2.831,P<0.05),其中14个通过质谱分析和SwissProt蛋白数据库检索得到鉴定,包括膜联蛋白A5、过氧化物酶6、泛素羧基末端水解酶L1等。运用Western blotting,验证了膜联蛋白A5在实验组表达量明显高于对照组,通过免疫组织化学方法,发现膜联蛋白A5主要定位在胎鼠睾丸Leydig细胞中。结论:实验运用蛋白质组学方法,建立了邻苯二甲酸二丁酯孕期暴露雄性仔鼠睾丸与正常仔鼠睾丸蛋白质差异表达谱系,鉴定出14个蛋白点,确定了膜联蛋白A5在胎鼠睾丸的定位。     

阑尾嵌顿性股疝1例

患者,女,76岁。因右腹股沟部肿块不能回纳15小时入院。发病前2天搬物用力过猛后发现右腹股沟部鸽蛋大肿块,伴有隐痛。肿块不能消失,无发热、恶心、呕吐及腹痛。肛门有排气。检查:T37℃,P86次,R20次,BP17/11kPa。腹部平坦,无肠型。右下腹有轻压痛,肝脾未触及。肠鸣音正常。右腹股沟韧带内1/3下方扪及3×3cm 肿块,质软,光滑,有压痛并稍有移动。肿块不能回纳腹腔。诊断:右侧嵌顿性股疝。术中在卵圆窝处找到疝囊,剪开囊壁,见     

医源性输尿管损伤的诊治（附13例报告）

目的：探讨医源性输尿管损伤的原因、诊断、手术时机和治疗经验。方法：总结分析13例医源性输尿管损伤的临床资料。结果：13例患者中妇产科、普外科、腔内泌尿外科导致输尿管损伤分别为8、2、3例。损伤部位输尿管上段3例,下段10例。损伤方式为缝扎1例,切断切开7例,结扎4例,原因不明1例。3例于术中发现,10例于术后48 h-30 d发现。术式包括松解缝扎线1例,输尿管端端吻合1例,输尿管膀胱再植4例,输尿管膀胱瓣吻合1例,仅放置双J管引流5例。随访6个月-2年,仅1例轻度肾积水,输尿管通畅,尿漏消失,肾功能正常。结论：医源性输尿管损伤只要一般情况良好,均可行一期修复手术。对盆腔手术后有漏尿的输尿管损伤,只要裂伤或瘘口较小,均可行输尿管镜下置入双J管引流,尿瘘可自行愈合。     

邻苯二甲酸二丁酯孕期暴露致仔鼠睾丸膜联蛋白A5的表达差异

背景：国内外关于邻苯二甲酸二丁酯导致雄性生殖系统畸形发生机制的探讨多集中于邻苯二甲酸二丁酯干扰胚胎期睾丸睾酮合成途径的研究，对其基因表达调控的因素及功能蛋白质之间相互干扰的网络效应却并不明了。蛋白质组学能够从整体水平反映蛋白质组分，并筛选功能相关蛋白。 目的：探讨邻苯二甲酸二丁酯胚胎期暴露对胎鼠睾丸蛋白表达谱的影响，分离并鉴定差异表达蛋白质。 设计、时间及地点：随机对照动物实验，实验于2006-08/2007-10在南京医科大学动物实验中心及南京医科大学生殖医学重点实验室完成。 材料：将孕鼠随机分为实验组和对照组，每组5只。妊娠14~18 d。 方法：实验组按800 mg/(kg?d)染毒孕鼠，对照组予大豆油5 mL/d。妊娠21d 取出胚胎大鼠睾丸，提取总蛋白，进行二维凝胶电泳分离和图像分析，筛选出的差异蛋白质点利用质谱技术进行鉴定，并选择关键蛋白进行验证。 主要观察指标：①两组蛋白的电泳差异比较。②酶切，MALDI-TOF分析，数据库检索，生物信息学检索结果。③两组蛋白Western blotting检测及免疫组织化学染色结果。 结果：共筛选出33个差异表达蛋白（t≥2.831，P < 0.05），其中14个通过质谱分析和SwissProt蛋白数据库检索得到鉴定，包括膜联蛋白A5、过氧化物酶6、泛素羧基末端水解酶L1等。运用Western blotting，验证了膜联蛋白A5在实验组表达量明显高于对照组，通过免疫组织化学方法，发现膜联蛋白A5主要定位在胎鼠睾丸Leydig细胞中。 结论：实验运用蛋白质组学方法，建立了邻苯二甲酸二丁酯孕期暴露雄性仔鼠睾丸与正常仔鼠睾丸蛋白质差异表达谱系，鉴定出14个蛋白点，确定了膜联蛋白A5在胎鼠睾丸的定位。     

运用国产单孔机器人手术系统完成腹膜后入路单孔肾上腺切除术的初步经验(附视频)

目的:探讨运用国产“术锐”单孔蛇形臂机器人手术系统完成腹膜后入路单孔肾上腺切除术的初步经验。方法:南京医科大学第二附属医院泌尿外科于2021年11月—2021年12月收治的4例肾上腺肿瘤患者,运用国产“术锐”单孔蛇形臂机器人手术系统完成单孔肾上腺切除术,手术均采用经腹膜后入路,记录肿瘤大小、手术时间、术中出血量等信息,并对围手术期资料、手术并发症及术后恢复情况进行分析。结果:4例患者中男女各2例,年龄40～68岁,平均年龄54岁,平均BMI值为26.2(24.8～29.8)kg/m²;肿瘤最大直径1.2～3.3 cm,其中左侧1例,右侧3例;4例手术均采用纯单孔方式,术中均未增加辅助通道,手术总时间104～200 min,机器人操作时间50～96 min,术中出血量10～50 ml。术后病理诊断为肾上腺皮质腺瘤3例,右血管内乳头状内皮细胞增生(Masson瘤)1例。术后均未出现出血、发热、切口感染等并发症。结论:运用“术锐”单孔蛇形臂机器人手术系统可安全、有效地完成腹膜后入路单孔肾上腺切除术,蛇形臂具有动作灵活、指向性准确等优势,可保障手术的顺利实施。     

尿道下裂大鼠与正常大鼠睾丸蛋白质二维电泳图谱分析

目的:探讨二维电泳技术在尿道下裂大鼠与正常大鼠睾丸差异表达蛋白研究中的应用.方法:孕SD大鼠10只,随机分为2组,妊娠12～19天,实验组和对照组分别予邻苯二甲酸二丁酯(DBP)500mg/(kg·d)、大豆油5 ml/d灌胃,第2l天取出仔鼠睾丸,提取总蛋白,进行二维凝胶电泳分离和图像分析.结果:按照5倍的表达量计算,发现有差异表达的蛋白质点9个,5个点在尿道下裂大鼠睾丸中高表达,而在正常大鼠睾丸为低表达;相反,在正常大鼠睾丸中高表达的4个点,在尿道下裂者为低表达.结论:初步建立了正常和尿道下裂大鼠睾丸的二维电泳图谱,并发现两者之间存在一些差异表达蛋白,为进一步进行尿道下裂大鼠睾丸差异表达蛋白的分离及鉴定奠定了良好基础.     

围术期循证护理对老年患者前列腺电切术后出血的影响

良性前列腺增生（benign prostatic hyperplasia , BPH）是随年龄的增长而进行性加重的良性病变,是引起老年男性排尿障碍的最常见原因。而经尿道前列腺电切术（ transurethral resection of the prostate , TURP）,以其创伤小、疗效好、恢复快等优点成为目前临床治疗BPH的主要方法[1,2]。术后出血是TURP最主要和最常见的术后并发症。目前,国内外有关护理对TURP术后出血的影响报道较少[3],缺乏系统性研究,本研究拟就此展开,现报道如下。     

精囊镜在顽固性血精诊疗中的应用价值

目的 评价精囊镜检查在顽固性血精诊疗中的应用价值。方法 回顾性分析我院2010—2012年收治的9例顽固性血精病人的临床资料,病人均于MRI检查后使用WOLF F6/7.5细输尿管硬镜进行精囊内检查。结果 9例病人手术过程顺利,手术时间17~37min,平均(26.1±9.5)min。术中发现精囊慢性炎症6例,精囊内结石2例,射精管梗阻扩张1例。2例囊腔内有充血改变,有散在出血点,活组织病理检查示炎症改变。给予相应治疗后随访半年,7例未再出现血精;2例精囊慢性炎症病人再次出现血精,再次行精囊镜检查并给予相应治疗后未再复发。结论 精囊镜检查可以在一定程度上明确血精的病因,并针对病因给予相应的治疗,手术风险小,并发症少,对治疗顽固性血精有一定的价值。     

U100双波长激光治疗泌尿系结石(附21例报告)

20 0 2年 9月～ 2 0 0 3年 3月 ,我科利用德国微猛公司生产的U10 0 双波长激光碎石机治疗泌尿系结石 2 1例 ,效果满意 ,现报道如下。1　临床资料1.1　一般资料　本组 2 1例。男 16例 ,女 5例。年龄 2 1～ 72岁 ,平均 49岁。输尿管结石 2 0例 ,均为单发 ,术前均行KUB、IVU及B超检查确诊。其中左侧 12例 ,右侧 8例。结石位置 :输尿管下段 14例 ,上段 6例。结石直径 7～ 18mm ,平均 11mm。 4例曾在外院行ESWL治疗 4～ 9次 ,结石未粉碎。 1例膀胱结石 ,伴有前列腺摘除术后膀胱颈疤痕狭窄 ,结石直径 2 0mm。所有结石均为不透X光阳性结石。1…