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目的 探究miR-149-5p与成纤维细胞生长因子21(FGF21)的靶向关系,及其对大鼠心肌细胞缺氧/复氧(H/R)损伤的影响。方法 将10只C56BL/6J雄性小鼠构建缺血再灌注(I/R)模型,qRT-PCR法检测I/R小鼠心脏组织中miR-149-5p表达水平的变化。将培养至生长对数期的H9c2大鼠心肌细胞分为对照组、H/R组、H/R+miR-149-5pinhibitor组、H/R+miR-149-5p NC组、H/R+miR-149-5p mimics组、H/R+miR-149-5p mimics+FGF21组,并诱导H/R模型及转染处理。ELISA法检测H9c2细胞中乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸激酶(CK)的活性;MTT法检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡情况;qRT-PCR检测细胞中miR-149-5p的表达水平;Western blotting检测Bcl-2、Bax、cleaved caspase-3、FGF21蛋白的表达水平;双荧光素酶测定miR-149-5p与FGF21的靶向关系。结果 与假手术组比较,I/R小鼠心脏组织中miR-149-5p表达水平明显升高(P&l... 相似文献
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目的:探究薯蓣皂苷元对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)大鼠细胞凋亡的影响,并初步分析其对NOD样受体蛋白3(NLRP3)/半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶1(Caspase-1)信号通路的作用。方法:采用左冠状动脉前降支结扎法建立MIRI大鼠模型,将造模成功的72只大鼠,按照随机数字表法分成MIRI组、薯蓣皂苷元低剂量组(50 mg/kg)、薯蓣皂苷元中剂量组(75 mg/kg)和薯蓣皂苷元高剂量组(100 mg/kg),每组18只;另取18只大鼠为假手术组。造模完成后,给予相应药物灌胃,每日1次。末次给药后,记录每组大鼠在不同时间段的心脏血液动力学参数;三苯基四氮唑(TTC)法检测大鼠心肌梗死面积;苏木素-伊红染色检测各组心肌组织病理学变化;TUNEL法检测心肌细胞凋亡情况;ELISA法检测大鼠血清中白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量;免疫蛋白印迹法检测大鼠心肌组织中NLRP3、Caspase-1、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、IL-1β蛋白表达水平。结果:与假手术组相比,MIRI组大鼠心肌梗死面积更大,心肌细胞凋亡率、左心室舒... 相似文献
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目的:探讨爪蟾驱动蛋白样蛋白2靶蛋白(TPX2)基因沉默对膀胱癌耐药细胞株T24/顺铂(DDP)的化疗敏感性的影响,并阐明其作用机制。方法:采用DDP浓度梯度刺激法建立DDP耐药细胞株T24/DDP,将细胞分为T24细胞组和T24/DDP细胞组。MTT法检测各组细胞增殖活性,并根据半数抑制浓度(IC50)值计算耐药指数(RI);实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)法和Western blotting法检测细胞中TPX2 mRNA及蛋白表达水平。通过小干扰RNA (siRNA)沉默T24/DDP细胞中TPX2基因表达,再将细胞分为空白对照组、阴性对照干扰(si-NC)组、TPX2沉默(si-TPX2)组、 si-NC+DDP (2mg·L-1DDP)组和si-TPX2+DDP (2mg·L-1DDP)组。RT-qPCR法和Western blotting法检测转染后细胞中TPX2 mRNA及蛋白表达水平,MTT法检测各组细胞增殖活性,流式细胞术检测各组凋亡细胞率和细胞周期G2/M期百分率,Transwell小室实验... 相似文献
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