液质联用法测定大鼠心力衰竭过程中全基因组DNA及总RNA的甲基化水平变化

本文建立了超高效液相色谱-串联质谱法(ultra-high performance liquid chromatography tandem mass spectrometry, UPLC-MS/MS)检测心力衰竭过程中全基因组DNA及总RNA的甲基化水平的方法,以观察心梗组织及外周血甲基化率的变化及同步性。动物福利和实验过程均遵循广州医科大学动物伦理委员会的规定。建立了心肌梗死(myocardial infarction, MI)大鼠模型,并分为梗死1、4及8周组,以模拟心功能不同级别,并将大鼠在同一周龄实施安乐死,以保持周龄一致。从梗死边缘区心肌组织及外周血淋巴细胞中提取DNA及RNA,应用酶解法将DNA及RNA分解成单个核苷,定量测定并计算全基因组DNA及总RNA的甲基化率。结果显示,大鼠心梗后梗死组织与外周血淋巴细胞的全基因组DNA及总RNA甲基化水平增加且结果呈现一致性。本研究获得了心衰的发生和发展过程中DNA及RNA甲基化率变化的初步数据,进一步表明了表观遗传改变可作为心衰早期诊断的生物标志物。     

脑中风后遗症偏瘫应用早期康复治疗的效果研究

目的研究脑中风后遗症偏瘫应用早期康复治疗的临床效果。方法选择2014年1月-2015年6月该院收治的52例脑中风后遗症偏瘫患者临床资料进行分析,52例患者在应用常规护理基础上,实施肢体训练、心理疏导及针灸等早期康复措施进行治疗,分析52例患者生活自理能力改善情况、各项指标改善情况。结果根据日常生活能力量表(ADL)分析,52例患者的生活自理能力得到明显改善,经过早期康复治疗,52例患者日常生活能力及痉挛情况等指标得到明显改善,治疗前后对比差异有统计学意义(P<0.05)。结论脑中风后遗症偏瘫患者在应用常规护理基础上,给予早期康复治疗,能明显改善患者生活质量,改善患者各项功能指标,值得推广应用。     

间断抗雄激素联合手术去势治疗 晚期前列腺癌的疗效分析

目的 探讨手术去势联合间断抗雄激素药物治疗晚期前列腺癌的疗效和安全性。方法 选取 2009 年8 月—2014 年8 月于佛山市第一人民医院收治的90 例雄激素敏感且失去根治手术机会的晚期前列腺 癌患者作为研究对象,根据患者意愿分为手术组及对照组,其中手术组给予手术去势联合间断抗雄激素药物 治疗;对照组给予常规间歇内分泌治疗。比较两组患者治疗前后的前列腺特异性抗原（PSA）水平、生活质 量评分、疾病无进展生存时间（PFS）、总生存时间（OS）及不良反应情况。结果 手术组患者的PSA 水平, 生活质量评分,PFS 时间和OS 时间优于对照组患者（P <0.05）,手术组患者性欲减退发生率高于对照组患者 （P <0.05）;两组患者潮热、骨质疏松、乳房胀痛的发生率比较,差异无统计学意义（P >0.05）。结论 手术 去势联合间断抗雄激素药物治疗晚期前列腺的疗效确切,值得临床推广。     

沉默pim-3基因对黑色素瘤细胞B16的抑制作用

目的:观察靶向沉默原癌基因pim-3对小鼠黑色素瘤细胞B16的抑制作用.方法:用脂质体将特异性靶向沉默pim-3载体(pim-3-shRNA)和pin-3过表达载体(pim-3-MIGR1)转染到黑色素瘤细胞B16中,荧光定量PCR和Western blotting法检测pim-3 mRNA和蛋白表达的变化,Annexin V/PI染色和TUNEL染色检测细胞凋亡情况,荧光定量PCR和Western blotting法检测p-Bad、Bcl-2、Bcl-xl、Bax、caspase-3等凋亡相关分子表达的变化,MTT法检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞周期,RTCAxCELLigence系统检测细胞迁移情况,Transwell侵袭实验检测细胞侵袭的变化.结果:转染pim-3-shRNA组B16细胞的pim-3mRNA及蛋白表达较对照组明显下降(P＜0.05),转染pim-3过表达质粒组B16细胞的pim-3 mRNA及蛋白表达较对照组显著增加(P＜0.05).转染pim-3-shRNA后,B16细胞的凋亡明显增加,在此基础上共转pim-3过表达质粒后则明显逆转沉默pim-3所引起的凋亡(p＜0.05);进一步检测发现沉默pim-3明显下调凋亡相关分子p-Bad、Bcl-2、Bcl-xl的表达,上调Bax的表达,最终引起caspase-3活性增加(P＜0.05).沉默pim-3后B16细胞增殖和迁移受到抑制(P.＜0.05),而细胞周期无明显变化.结论:靶向沉默pim3基因能促进黑色素瘤细胞的凋亡,抑制细胞的增殖和迁移,提示pim-3基因可以作为黑色素瘤基因治疗的新靶点.     

多囊卵巢综合征病人血清 Ⅲ型纤连蛋白域蛋白 5、过氧化物酶体增殖物激活受体 γ辅助激活因子 -1α水平与胰岛素抵抗的关系

目的探究多囊卵巢综合征( PCOS)病人血清 Ⅲ型纤连蛋白域蛋白 5(FNDC5)、过氧化物酶体增殖物激活受体 γ辅助激活因子 -1α(PGC-1α)表达水平与胰岛素抵抗的关系。方法选取 2017年 1月至 2021年 12月在重庆松山医院接受治疗的 118例 PCOS病人为 PCOS组,另选取与 PCOS病人年龄、身体质量指数( BMI)、腰臀比相匹配的同期健康体检者 94例作为对照组。酶联免疫吸附测定( ELISA)检测两组血清 FNDC5、PGC-1α表达水平;全自动生化分析仪检测空腹胰岛素( FINS)、空腹血糖(FBG)水平,并计算胰岛素抵抗相关指标胰岛 β细胞功能指数( HOMA-β)和胰岛素抵抗指数( HOMA-IR); Pearson相关性分析研究病人血清 FNDC5、PGC-1α水平与胰岛素抵抗相关指标之间的关系。结果与对照组相比, PCOS组 FBG、FINS、三酰甘油(TG)、 HOMA-β、HOMA-IR显著升高( P<0.05);与对照组相比, PCOS组 FNDC5［( 18.46±2.76)μg/L比( 30.25±5.87)μg/L］、 PGC1α［(1.87±0.45)μg/L比( 4.91±1.34)μg/L］表达水平显著降低( P<0.05)。 Pearson相关性分析结果显示, PCOS病人血清 FNDC5、 PGC-1α水平均与 FBG、FINS、HOMA-β、HOMA-IR呈显著负相关( P<0.05)。结论 PCOS病人血清 FNDC5、PGC-1α表达水平降低,与胰岛素抵抗存在负相关。     

Ku80基因RNAi逆转录病毒载体的构建及稳定转染人肾癌786-O细胞株的建立

目的 构建并鉴定逆转录病毒介导的Ku80基因RNA干扰表达体系,并建立稳定、高效、长久低表达Ku80的人肾癌786-O细胞株.方法 针对Ku80基因,设计并合成3对特异性RNA干扰靶序列,退火形成双链DNA,与BglⅡ和Hind Ⅲ双酶切后的pSUPERretro-puro载体连接,构建pSUPERretro-puro-siKu80干扰表达载体,并对重组载体进行测序鉴定.筛选出基因沉默效应最强的干扰序列后使用磷酸钙法共转染293FT细胞,产生的病毒颗粒随后感染786-O细胞,经嘌呤霉素筛选得到阳性克隆.用RT-PCR检测Ku80基因mRNA表达,Western blot测定转染后786-O细胞中Ku80蛋白的表达量,以鉴定稳定细胞株.结果 测序结果证实目的 片断正确插入pSUPERretro-puro表达载体中,成功构建了pSUPERretro-puro-siKu80干扰表达载体,稳定转染干扰表达载体的786-O细胞Ku80基因的表达显著降低.结论 成功构建了抑制Ku80基因表达的逆转录病毒载体,并获得Ku基因稳定干扰的人肾癌786-O细胞株,为下一步利用小干扰RNA技术研究肾癌的基因治疗奠定了基础.     

多沙唑嗪联合盐酸屈他维林治疗输尿管下段结石的效果

目的 评估多沙唑嗪联合盐酸屈他维林治疗输尿管下段结石的有效性及安全性.方法 选取2017年1月至2020年1月广东省佛山市第一人民医院收治的输尿管下段结石患者400例为研究对象,依据治疗方案分为A、B、C、D组,每组100例.四组患者均常规服用尿石通丸;A组未加用任何输尿管平滑肌松弛剂;B组加用多沙唑嗪;C组加用盐酸屈...     

一次性包皮环切缝合器治疗包茎的麻醉选择及疗效分析

目的：探讨一次性包皮环切缝合器治疗包茎的麻醉选择及临床疗效。方法：将210例包茎患者依据手术及麻醉方式的不同随机分成三组，每组70例，其中A组使用利多卡因乳膏麻醉及一次性包皮环切缝合器治疗，B组使用阴茎背神经阻滞麻醉及一次性包皮环切缝合器治疗，C组使用阴茎背神经阻滞麻醉及包皮环扎术治疗。比较A组与B组的手术时间、术中疼痛评分及满意度情况。比较B组及C组的手术时间、术中及术后疼痛评分、术中出血量、切口愈合时间、术后并发症及满意度情况。结果：A组与B组相比较，B组的手术时间短于A组，术中疼痛评分低于A组，满意度高于A组，差异均有统计学意义(P<0.05)。B组与C组相比较，两组的术中疼痛评分无明显差异(P>0.05);C组的手术时间短于B组，术中出血量少于B组，而B组的术后疼痛评分低于C组，切口愈合时间短于C组，术后并发症少于C组，满意度高于C组，差异均有统计学意义(P<0.05)。结论：阴茎背神经阻滞麻醉联合一次性包皮环切缝合器治疗包茎患者，具有疼痛感低、愈合快、并发症少及满意度高等优点，值得临床推广。