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目的:应用RNAi技术探讨靶向主要组织相容性复合物Ⅱ类抗原反式转录激活因子(C Ⅱ TA)的shRNA质粒载体抑制大鼠骨髓源树突状细胞(DC)表面MHC-Ⅱ类抗原表达的可行性.方法:体外培养大鼠骨髓源DC:流式细胞仪检测DC表面抗原MHC-Ⅱ、OX-62表达情况;体外合成针对C Ⅱ TA mRNA序列特异性C Ⅱ TA shRNA并构建质粒,在阳离子脂质体介导下转染DC;流式细胞仪检测细胞表面抗原MHC-Ⅱ表达水平的变化.结果:(1)经体外培养DC可用于后续反应,体外构建质粒成功;(2)流式细胞仪检测显示C Ⅱ TA-shRNA质粒组中DC转染后MHC-Ⅱ的抗原水平均较对照组明显降低.结论:利用C Ⅱ TA shRNA质粒载体沉默C Ⅱ TA基因从而下调MHC-Ⅱ的表达的策略是可行的,为降低移植排斥反应提供了实验依据. 相似文献
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近年来,抗程序性细胞死亡蛋白1(PD-1)药物在转移性结直肠癌患者错配修复缺陷治疗中的成功使得该疾病的免疫治疗得以重视。然而,失配修复缺陷的结直肠癌患者仅占结肠癌患者的一部分。目前的研究重点是将免疫治疗应用到疾病的早期阶段,包括辅助一线治疗,以及检测免疫检查点抑制剂治疗的敏感性。然而,哪些患者能够从该免疫治疗中获益仍是值得商榷的问题,因为这类药物具有自身免疫毒性。PD-1的配体之一程序性细胞死亡蛋白配体1(PD-L1)作为一种检测生物标记物,其检测可以通过免疫组化来实现。但其免疫组化的检测存在一些混杂因素,包括应用不同的检测抗体、不同的免疫组化临界值、肿瘤组织的采集准备方式不同、处理过程的不同、原发与继发的活检标本、肿瘤源性或诱导的PD-L1表达,以及肿瘤与免疫细胞的染色等。目前的结果表明,免疫组化检测肿瘤过表达PD-L1的患者在接受抗PD-L1治疗时临床效果更理想,而有些低表达的肿瘤也对该治疗有所缓解,这使PD-L1的分析中存在复杂性。阐明宿主免疫系统与肿瘤微环境的机制则能够更好地解释针对PD-L1药物是否让患者受益。 相似文献
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目的:分析胃癌全胃切除术后3种常见消化道重建对患者生活质量的影响及术式的合理选择。方法:将169例全胃切除术患者按消化道重建的方式不同,分为袢式空肠代胃+Braun吻合(Braun组,45例)、Roux-en-y空肠代胃(RY组,75例)和P型Roux-en-y空肠代胃(RYP组,49例)。对3种术式术后手术并发症、体重、进食后的症状、单餐进食量、血清学指标及Visick指数分级进行比较作为评价依据。结果:3种术式术后死亡率及并发症发生率各组之间无显著性差异(P〉0.05)。术后6个月RYP组较其他两组能显著提高体重、单餐进食量,部分血清学指标也明显改善,术后Visick指数分级较高,有显著性差异,术后12月间RYP组和RY组生活质量均优于Braun组,差异有显著意义,但RYP组与RY组差异无显著性意义。结论:RYP和RY是全胃切除术后消化道重建的较理想术式,能显著改善患者术后的生活质量。 相似文献
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同种异体组织和器官移植的供体来源有限,使异种移植再度成为研究热点.然而异种移植将面临比同种异体移植复杂得多的排斥反应.本文就异种移植排斥反应及其对策的研究近况作一综述. 相似文献
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基因治疗是将正常基因或有治疗作用的基因通过一定方式导入人体靶细胞以纠正基因的缺陷或者发挥其他作用,从而达到治疗疾病的目的的生物医学高新技术。随着遗传学和分子生物学及基因工程技术的进步,基因治疗已成为继手术、化疗、放疗之后的又一新的肿瘤治疗手段。免疫基因治疗,作为基因治疗的重要策略之一,越来越受到人们重视,已经成为研究热点, 相似文献
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目的 使用慢病毒介导的RNA干扰(RNAi)方法抑制小鼠血管内皮细胞异种抗原半乳糖α1,3-半乳糖(Galα1,3-Gal)的表达.方法 经体外设计合成针对α1,3-半乳糖基转移酶(α1,3-GT)mRNA的序列特异性小发夹RNA(shRNA),并构建携带α1,3-GT shRNA的重组慢病毒载体,以慢病毒感染小鼠血管瘤内皮细胞系EOMA细胞.采用荧光实时定量聚合酶链反应检测转染后的EOMA细胞α1,3-GT mRNA表达水平的变化;免疫荧光法和流式细胞术检测转染后的EOMA细胞异种抗原Galα1,3-Gal表达水平的变化.并将转染后的EOMA细胞与人血清混合培养,用四甲基偶氮唑盐比色法测定细胞存活率.结果 成功获得携带α1,3-GT shRNA的成熟重组慢病毒颗粒,转染EOMA细胞效率可达75%.与空白对照组、空转染组以及阴性siRNA对照组比较,重组慢病毒转染EOMA细胞后,能有效抑制α1,3-GT的表达,抑制率为88%(P<0.05);Galα1,3-Gal抗原表达水平明显降低(P<0.05);而空白对照组、空转染组和阴性siRNA对照组间的差异无统计学意义(P>0.05).重组慢病毒转染后的EOMA细胞与人血清混合培养后的存活率较各对照组明显提高(P<0.05).结论 成功构建靶向α1,3-GT基因的重组慢病毒载体,通过RNAi沉默α1,3-GT基因,抑制EOMA细胞异种抗原Galα1,3-Gal的表达,在体外实验中可减轻异种超急性排斥反应. 相似文献
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急性胆源性胰腺炎的外科治疗 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:探讨急性胆源性胰腺炎(ABP)的外科治疗方法。方法:回顾性分析165例ABP病例的临床资料。将首次住院期间接受手术治疗病例设为手术组,出院3月以后再入院行胆道手术者设为对照组,比较手术组/对照组的平均总住院时间(D),12月内复发数,死亡病例数,术后并发症发生情况。结果:手术组与对照组相比,死亡率无统计学意义,平均总住院时间相比差异有统计学意义(t=18.582,P〈0.05),12月内复发率相比差异有统计学意义(χ2=4.714,P〈0.05),术后出现并发症率相比差异亦有统计学意义(χ2=9.731,P〈0.05)。结论:ABP的外科治疗应遵循个体化治疗原则,选择合适的手术时机在治疗过程中起关键作用。 相似文献
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目的 体外诱导甲胎蛋白(AFP)158-166特异性T细胞,检测其对AFP+肝癌细胞的特异性杀伤能力.方法 采用流式细胞术及PCR-SSP法从20例健康志愿者中筛选基因型HLA-A0201阳性者,每例取外周血50 ml获取单核细胞,细胞因子贴壁黏附培养收获树突状细胞(DC).将DC负载HLA-A0201表位态AFP158-166后按1∶10比例与新鲜淋巴细胞混合培养、增殖,噻唑蓝法检测其对HepG2、负载和未负载AFP158-166的T2细胞的杀伤能力.结果 成熟DC表面抗原CD83、CD80和CD86阳性率分别为(81.3 ±2.4)%、(92.8±1.4)%和(70.5 ±1.9)%.诱导的T细胞在效靶比40∶1时对HepG2、负载和未负载AFP158-166的T2细胞杀伤率分别为(61.1±3.4)%、(70.6±2.4)%和(16.3 ±2.7)%.结论 人外周血体外诱导的AFP158-166特异性T细胞可杀伤AFP+ HepG2和负载AFP158-166的T2细胞. 相似文献
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胃癌组织中游离氨基酸变化与肿瘤进展程度的关系 总被引:5,自引:0,他引:5
目的:探讨胃恶性肿瘤病人氨基酸代谢变化与肿瘤进展程度之间的关系,为胃恶性肿瘤氨基酸失衡疗法提供理论依据。方法:采用Beckman-6300高效氨基酸自动分析仪,检测41例胃恶性肿瘤组织和癌旁胃粘膜组织中19种游离氨基酸的含量,对不同分期肿瘤组织氨基酸进行比较分析。结果:与癌旁胃粘膜组织比较,胃恶性肿瘤组织中牛磺酸、苏氨酸、丝氨酸、脯氨酸、甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、酪氨酸、赖氨酸含量升高(P<0.05)。进展期肿瘤与早期肿瘤相比,脯氨酸、缬氨酸、蛋氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸升高(P<0.05)。结论:胃癌组织多种游离氨基酸含量显著高于癌旁胃粘膜组织,进展期胃恶性肿瘤组织某些氨基酸含量显著高于早期肿瘤组织。 相似文献