荧光定量PCR检测异尖线虫类病原体

目的运用荧光定量PCR法检测异尖线虫类病原体。方法于鱼类内脏中检获6种异尖线虫类幼虫:抹香鲸异尖线虫、简单异尖线虫、内弯对盲囊线虫、带鱼针蛔线虫、灰海鳗对盲囊线虫和台湾海峡鱼类中一优势种对盲囊线虫。提取各虫体DNA,PCR扩增ITS-2序列,测序并进行数据库比对。依据测序结果设计特异引物,常规PCR检验引物特异性。将ITS-2序列扩增产物回收、纯化后经T克隆转入大肠埃希菌DH5α,提取重组质粒,鉴定后作为标准品模板建立荧光定量PCR标准曲线,并做敏感性和重复性试验。结果构建的荧光定量PCR标准曲线循环阈值与模板浓度呈良好的线性关系,相关系数均在0.998以上。重复性实验中,6种虫体对应的变异系数(cv)最小值为0.18%,最大值为2.80%,试验间平均cv最小值为0.55%,最大值为1.94%,无非特异性扩增,溶解曲线的特异性和重复性良好。灵敏度实验中,可检出的最低模板浓度为1×102拷贝/μl,比常规PCR灵敏度高100倍。结论初步建立了SYBRGreenⅠ荧光定量PCR检测异尖线虫类病原体的方法 。     

针刺疗法联合尼莫地平片治疗血管性痴呆临床研究

目的：观察针刺疗法联合尼莫地平片治疗血管性痴呆的临床疗效。方法：选取90 例血管性痴呆患者,按随机数字表法分为对照组及研究组各45 例。对照组给予口服尼莫地平片治疗,研究组在对照组基础上加用针刺疗法。比较2 组治疗前后血清超敏C-反应蛋白（hs-CRP）、精神状态［简易智力状态检查表（MMSE量表）］、智能状态［长谷川痴呆量表（HDS 量表）］ 及日常生活能力量表（ADL 量表） 评分的变化。结果：治疗后,2 组血清hs-CRP 水平均较治疗前下降,研究组hs-CRP 水平低于对照组,差异均有统计学意义（P＜0.05）。治疗后,2 组MMSE 评分、HDS 评分均较治疗前升高,比较研究组MMSE 评分、HDS 评分均高于对照组,差异均有统计学意义（P＜0.05）。治疗后,2 组ADL 评分均较治疗前升高,研究组ADL 评分高于对照组,差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论：针刺疗法联合尼莫地平片治疗血管性痴呆效果确切,能有效抑制炎性反应,改善患者认知功能,提高智力水平及日常生活能力。     

严重外伤患者的凝血功能变化

严重外伤对伤员全身各系统功能产生严重的损害,其中外伤出血引起的低体温、酸中毒和凝血功能障碍是导致伤员死亡的主要原因[J].本研究中针对多发伤患者入院时的凝血功能指标进行分析,报告如下.     

情景教学在中医院住培医师急救技能培训中的应用

目的 对中医院住院医师规范化培训学员进行情景模拟教学在急诊技能培训的应用进行研究。方法 选择本院进行住院医师规范化培训的学员180名,随机分为观察组与对照组各90名。对照组采用常规培训方法进行急救技能的基础知识和临床实践知识教授,包括如何识别危重患者、心肺复苏术、气管插管术、电除颤等。观察组采取情景模拟教学方法,以临床实际案例为依托,针对前述常用急救技能,选择适宜疾病和典型病例制作相关临床模拟材料,让学员主动思考,结合案例进行具体抢救方案的实施。引导学员解析病例,以及实施救治中的思维方向。每次培训将学员分成5人1组,分角色演练。设置患者心脏骤停等临床场景,住院医师进行心肺复苏和气管插管等急救操作。对教师及学员用时、学员理论及技能考核成绩、满意度、工作能力评估等方面进行评分。结果 观察组教师用时明显低于对照组,学员活跃度较对照组高（P <0.05）。两组学员的基础知识、单项技能的考核中,观察组均显著高于对照组（P <0.05）。观察组对情景模拟教学方式的技能培训满意度显著高于对照组,在基础知识培训、技能培训、课题活跃度、师生互动方面均有显著差异（P <0.05）。观察组...     

简单异尖线虫L-样半胱氨酸蛋白酶基因的克隆与表达

目的克隆简单异尖线虫L-样半胱氨酸蛋白酶基因(AsCP)全长,研究其表达特性。方法根据GenBank中简单异尖线虫表达序列标签L-样半胱氨酸蛋白酶基因的部分信息,设计特异引物,用cDNA末端快速扩增技术扩增3′端部分,获得基因全长序列。根据基因全长序列设计引物,以简单异尖线虫总RNA为模板,RT-PCR扩增AsCP基因编码序列,产物经EcoRⅠ和SalⅠ双酶切,克隆至表达载体pET32а(+),转化大肠埃希菌BL21(DE3)株,以异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,表达效果经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测。结果3′端扩增片段大小为1211bp,拼接完整后基因全长1462bp,编码411个氨基酸,与秀丽隐杆线虫的L-半胱氨酸蛋白酶相似性达36.4%;重组载体pET32a(+)-AsCP经EcoRⅠ和SalⅠ双酶切后有一条约1150bp的条带,测序结果显示重组载体构建成功。SDS-PAGE结果表明,重组蛋白相对分子质量约为Mr60000(含6个组氨酸的标签),与目的蛋白相符。用不同浓度的IPTG诱导对表达量的影响很小,1mmol/LIPTG诱导2h后表达量达到最高水平。结论成功克隆并表达了L-样半胱氨酸蛋白酶。     

CT冠脉成像、超声心动图对老年冠心病患者左心室功能的评估价值

目的 以超声心动图(Echo)为标准,探讨320排CT冠脉成像(CCTA)评价老年冠心病患者左心室功能的诊断价值。方法 回顾性分析2021年7月至2022年5月收治的78例冠心病患者的临床影像资料,所有患者在1周内接受CCTA与Echo检查,运用心功能分析软件分别计算出射血分数(EF)、每搏输出量(SV)、左心室舒张末期容积(EDV)和收缩末期容积(ESV),以Echo左心室功能的评估结果为标准,采用配对样本T检验以及Pearson相关分析比较两种检验方法的差异和一致性。结果 2种检查方式对于冠心病患者左心室功能的评价具有较好的一致性,320-CCTA和Echo左心室功能指标相比,EF、SV、EDV和ESV之间均无显著差异(P>0.05);通过组内相关系数(ICC)分析显示：CCTA与Echo左心室功能测量结果一致性较好(P<0.05)。结论 以Echo为标准,CCTA在诊断冠心病患者左心室功能方面结果准确,可以一站式完成冠状动脉狭窄程度与左心室功能的评估,具有较好的临床应用前景。     

化痰复遂饮联合铜砭刮痧疗法治疗风痰阻络型中风后失眠临床研究

目的：观察化痰复遂饮联合铜砭刮痧疗法治疗风痰阻络型中风后失眠的临床疗效及对脑血流动力学、神经元的影响。方法：采用随机数字表法将142例风痰阻络型中风后失眠患者分为对照组与治疗组各71例。2组均给予基础治疗,对照组联用铜砭刮痧疗法治疗,治疗组在对照组基础上联合化痰复遂饮治疗,2组均治疗1个月。比较2组治疗前后血清γ-氨基丁酸（GABA）、褪黑素（MT）、神经元特异性烯醇化酶（NSE）、5-羟色胺（5-HT）、泛酸羧基末端水解酶1 (UCH-L1)、脑源性神经生长因子（BDNF）及血浆食欲素A水平;比较2组治疗前后中医证候评分、匹兹堡睡眠质量指数（PSQI）评分;比较2组治疗前后多导睡眠图（PSG）参数（睡眠潜伏期、总睡眠时间、觉醒次数）及脑血流动力学指标（大脑前动脉、中动脉、后动脉、基底动脉血流速度）,并评估2组临床疗效及不良反应发生情况。结果：治疗组总有效率95.77%,高于对照组83.10%(P<0.05)。2组治疗后血清UCH-L1、NSE及血浆食欲素A水平均较治疗前降低（P<0.05）,血清GABA、MT、5-HT、BDNF水平升高（P<0.05）,治疗组治疗后...     

严重外伤患者的凝血功能变化

严重外伤对伤员全身各系统功能产生严重的损害,其中外伤出血引起的低体温、酸中毒和凝血功能障碍是导致伤员死亡的主要原因[J].本研究中针对多发伤患者入院时的凝血功能指标进行分析,报告如下.     

蛋白质组学在糖尿病肾病生物标志物应用中的研究进展

糖尿病肾病是糖尿病常见并发症,是终末期肾病的主要病因,已成为危害人类健康的重大疾病。现有临床常用诊断指标的灵敏度和准确性存在不足,亟需新型生物标志物的挖掘应用。本文基于蛋白质组学研究技术,从糖尿病肾病诊断预测、进展预后、治疗靶点3个方面对蛋白质组学在糖尿病肾病生物标志物研究中的应用进行综述。随着肾脏病学开始朝着精确医学...     

血液灌流治疗百草枯中毒的临床总结

目的 研究血液灌流(HP)治疗对百草枯中毒患者的疗效.方法 回顾性分析2005年1月至2009年12月收治的222例百草枯中毒患者的临床资料,按治疗方案分为对照组(140例)和HP组(82例).两组均给予常规治疗;HP组加用HP,每日1次,持续4 h.比较两组患者临床指标、实验室指标、序贯器官功能衰竭评分系统(SOFA)评分与预后.结果 HP组患者动脉血氧分压(PaO2)、白细胞计数(WBC)、丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)均较治疗前明显改善,且明显优于对照组(均P<0.05).HP组患者SOFA评分显著低于对照组[(2.69±0.36)分比(2.78±0.39)分,P<0.05].HP组患者28 d生存率明显高于对照组[48.8%(40/82)比43.6%(61/140),P<0.053.结论 HP能够减轻百草枯中毒患者的器官损害,并改善预后.