用于肿瘤靶向治疗的EGF-IL-18融合蛋白在昆虫细胞中的表达及活性鉴定

目的：制备能用于肿瘤靶向治疗的重组表皮生长因子受体干扰序列-白细胞介素18(EGF-IL-18)融合蛋白，并鉴定其生物学活性。方法：利用Bac-to-Bae表达系统在昆虫细胞Sf9中表达融合蛋白，用离子交换层析、疏水层析、凝胶过滤层析等方法纯化表达产物，并以IFN-γ诱导实验和EGFR竞争结合实验初步评价融合蛋白的生物活性。结果：经SDS-PAGE和Westem blot检测，Sf9细胞中表达的重组蛋白与预期的EGF-IL-18融合蛋白分子量一致，纯化后融合蛋白具有较高纯度和良好的免疫原性。IFN-γ诱导实验和EGFR竞争结合实验显示，该融合蛋白具有肿瘤导向性和抗肿瘤活性。结论：成功表达并纯化了具有肿瘤导向性的抗肿瘤蛋白——EGF-IL-18融合蛋白，该蛋白具有较好的肿瘤导向性和抗肿瘤活性，可用于肿瘤的生物治疗研究。     

树突状细胞来源的趋化因子的免疫调节作用研究进展

树突状细胞是一类重要的免疫调控细胞 ,它所产生的趋化因子有重要的免疫调节作用 ;趋化吸引免疫细胞参与Th1或Th2类免疫反应 ,促进免疫细胞的成熟 ;介导其他细胞与树突状细胞的交互反应以及优化炎症反应 ,使其向有利于机体的方向发展等。树突状细胞可能还有更多的免疫学作用由趋化因子实现 ,有待进行深入的研究     

树突状细胞来源的趋化因子的免疫调节作用研究进展

树突状细胞是一类重要的免疫调控细胞，它所产生的趋化因子有重要的免疫调节作用；趋化吸引免疫细胞参与Th1或Th2类免疫反应，促进免疫细胞的成熟；介导其他细胞与树突状细胞的交互反应以及优化炎症反应，使其向有利于机体的方向发展等。树突状细胞可能还有更多的免疫学作用由趋化因子实现，有待进行深入的研究。     

CXCL10及其受体参与子宫内膜异位症发病的免疫机制初探

目的： 通过研究趋化因子配体10（CXCL10）及其受体（CXCR3）的表达,探讨其参与子宫内膜异位症（EM）发病的免疫机制。方法： 分别运用ELISA法及化学发光分析法检测EM患者未经手术治疗组（76例）、经手术治疗组（10例）及正常体检人员组（76例）血清标本中CXCL10及癌胚抗原CA125浓度;分离并体外活化EM患者组（10例）及正常体检人员组（10例）外周血单个核细胞（PBMC）,ELISA法检测活化后PBMC培养上清液中CXCL10的分泌表达水平、流式细胞术检测活化PBMC的表面分化抗原3（CD3）及CXCR3表达、RT-PCR检测CXCR3基因亚群（CXCR3A及CXCR3B）的表达;对结果进行统计分析。结果：血清CXCL10水平,EM患者未经手术治疗组、经手术治疗组及正常体检人员组间比较均具有显著差异（P＜0.05）;EM组与正常体检人员组比较：活化PBMC培养上清液中CXCL10的表达水平无显著差异（P>0.05）、CD3+/CXCR3+PBMC细胞数无显著差异（P>0.05）、EM组高转录表达CXCR3B亚群而正常对照组表达CXCR3A亚群。结论： EM患者的血清CXCL10缺陷表达可能是参与EM发病的免疫机制之一;EM患者PBMC对细胞活化信号具有有效的免疫反应性,但活化后的PBMC细胞表面高表达的是CXCR3B亚群、而非具有趋化效应的CXCR3A亚群,推测EM通过此种免疫逃逸机制而发病。     

浙江省HIV-1 CRF01_AE流行株的分子特征分析

目的 分析艾滋病病毒1型(HIV-1)CRF01_AE重组毒株在浙江省的分子流行特征.方法 提取234例HIV-1感染者基因组DNA用巢式聚合酶链反应(nPCR)方法扩增gag部分基因片段,测定序列以后分析核苷酸和氨基酸序列.结果 在扩增阳性并成功测序的192个序列中HIV-1CRF01 AE有81个,占42%,是浙江省HIV主要的流行毒株之一.系统进化树中存在3个bootstrap值＞60的分支簇,其中MIX组包括47个序列,内部基因离散率为2.4%±0.7%,与参考株CM240的基因离散率为3.4%±0.5%;SEX组包括7个样本,组内基因离散率为3.0%±1.2%,与参考株的基因离散率为3.9%±1.0%;MSM组包括12个样本,组内基因离散率为2.8%±1.1%,与参考株的基因离散率为4.9%±0.6%,三者差别有统计学意义.特征性氨基酸分析表明MIX组、SEX组、MSN组共享序列与国际参考株共享序列之间分别存在2个、4个和8个位点的差异.结论 浙江省内HIV-1 CRF01 AE流行株中主要存在三个进化簇,其中两个簇与广西来源株密切相关.CRF01_AE毒株在浙江省内主要以异性性途径和注射吸毒形式传播.     

HIV抗体免疫印迹法检测中不确定结果的分析研究

目的 收集HIV抗体免疫印迹法检测中出现的不确定结果,统计分析各种带型的临床意义,为检验人员提供判定结果的方法和建议.方法 采集187份不确定实验结果和随访复检结果,以随访最终结果为金标准,统计分析各种带型出现的频度和阳性预测值,分析非特异性条带出现的频度和复检结果.结果 条带gp160、p24的阳性预测值分别为32....     

CXCL10基因对乳腺癌细胞株MCF-7肿瘤相关基因表达的影响

EGF在实验组、对照组及未转染组灰度值分别为0.183±0.003、0.787±0.019及0.789±0.011,3组间比较差异有统计学意义(F=2 232,P<0.01);STAT3在实验组、对照组及未转染组灰度值分别为0.573±0.016、0.707±0.008及0.711±0.013,3组间比较差异有统计学意义(F=115,P<0.01).结论 CXCL10能在MCF-7细胞株稳定表达,且CXCL10能抑制MCF-7细胞VEGF及STAT3表达,从而发挥抗肿瘤作用.     

我国HIV-1 CRF07_BC流行重组毒株Tat蛋白第一外显子CTL表位预测

目的 通过测定和分析我国HIV-1 CRF07_BC毒株Tat蛋白第一外显子的基因序列预测其CTL表位的分布情况.方法 236份来自第3次全国HIV分子流行病学调查中感染CRF07_BC毒株的患者的血浆样本,应用巢式聚合酶链反应(nested-PeR)扩增tat基因第一外显子基因区并测序,使用BIMAS HLA Peptide Binding Predictions在线软件和统计学软件对CTL表位进行预测分析.结果 236份CRF07_BC毒株来自16个省份,主要为静脉吸毒传播(58.9%),其次为性传播(25.0%).236条CRF07_BC Tat蛋白第一外显子区共分布有12种CTL表位,主要分布于脯氨酸富集区、半胱氨酸富集区和疏水核心区,碱性区和谷氨酰胺富集区没有发现已知的CTL表位分布,这些表位主要受5种HLA基因型(A * 2501、A * 2902、B * 15、B * 5301和Cw * 1203)以及6种HLA血清型(B53、B58、B57、A3、A68和Cw12)限制,其中5种表位的单氨基酸变异频率大于50%.结论 我国HIV-1 CRF07_BC毒株Tat蛋白第一外显子CTL表位分布于不同功能区,并且存在氨基酸变异.     

全基因组关联在研究疟原虫耐药基因中的应用

疟原虫多重耐药性的出现以及日趋扩散的耐药形势成为在疟疾防治工作中的最大挑战。新近发展起来的全基因组关联研究（Genome-wide association studies,GWAS）已经广泛应用于多种复杂疾病或性状易感基因分析的工作中。GWAS提供了一种高通量的在全基因组范围内筛选疟原虫耐药基因的强有力的工具,能够进一步明确耐药机制并指导合理用药。本文对GWAS在疟原虫耐药基因分析中的应用进行初步探讨,以期为疟原虫耐药性基因的研究提供参考。