人类DNA分型研究进展

聚合酶链式反应技术克服了以往ＤＮＡ多态性检测技术的缺点，引起了ＤＮＡ多态性检测的一次革命。本文从扩增片段碱基序列多态性、扩增片段患联重复序列多态性和随机扩增的多态性ＤＮＡ等多方面，系统地综述了近年来聚合酶链式反应技术在ＤＮＡ分型研究中的进展。     

人类细胞遗传学命名的国际体制(1978) ISCN(1978) 人类细胞遗传学命名常务委员会的报告(续)

2.4.命名符号为了描述人类染色体及其畸变,提出了一个命名符号的体制,这些符号的目录列于表3。表3 符号和缩写术语表。根据需要这些缩写术语可配合使用。那些在正文中已详细说明的术语,在括号中列有参考节段。其它术语按Rieger等(1976) 提出的定义。     

一例46，XX，t（2;10）（q23;q22），t（4;12）（q35;q2103）

一例４６，ＸＸ，ｔ（２；１０）（ｑ２３；ｑ２２），ｔ（４；１２）（ｑ３５；ｑ２１０３）龙志高李麓芸夏家辉患者女，３５岁。智力正常，结婚５年，自然流产１次。体查：生长发育正常，表型正常。细胞遗传学检查：外周血淋巴细胞培养，Ｇ显带，核型为４６，ＸＸ，ｔ（...     

真核生物RNA聚合酶Ⅱ启动子的计算机预测

启动子是基因组序列中靠近基因转录起始位点的区域，是影响基因表达的重要功能单位之一。除实验方法发现或验证序列的启动子外，现已经有多种启动子序列的计算机预测方法，如位点比重阵列(PWM)、隐马尔柯夫模型(HMM)、神经网络、低聚复合物和CpG岛等。本文综述了现有真核生物基因启动子序列的生物信息研究技术。     

用原核增强子提高hTERT启动子介导的基因表达

目的:探讨原核增强子能否提高hTERT启动子的转录活性及对其肿瘤特异性的影响。方法:将增强子SV40、CMV分别或组合构建一系列GFP和荧光素酶报告基因载体,转染人肝癌、鼻咽癌、宫颈癌、结直肠癌细胞、成纤维肉瘤和正常成纤维细胞,流式细胞仪计数和双荧光酶分析系统检测基因的表达效率。结果:在正常成纤维细胞中这些载体均不能有效表达;而在肿瘤细胞中hTERT启动子能介导基因表达但效率不高,增强子能使基因表达增强3~26倍,特别是单独CMV增强子和SV40-CMV双增强子使荧光素酶表达提高20~26倍,是常用的CMV增强子/启动子的2~7倍;完整CMV增强子/启动子对hTERT启动子的活性影响因不同细胞而异。结论:增强子能显著增强hTERT启动子的转录活性并对其肿瘤特异性没有影响,CMV增强子或SV40-CMV双增强子/hTERT启动子是高效特异的通用调控元件,用于靶向性肿瘤基因治疗具有巨大潜力。     

脐血来源内皮祖细胞的生物学特性与安全性评价

目的:探讨脐血来源的内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)的生物学特性,评价其长期体外培养后的安全性.方法:分离脐血单个核细胞(mononuclear cells,MNCs),采用MCDB1 31.培养基联合VEGF等生长因子进行培养.观察培养细胞的形态,测定其生长动力学,采用流式细胞仪及免疫细胞化学方法检测其表型,应用细胞荧光化学法分析EPCs对乙酰化低密度脂蛋白(acetylated low-density lipoprotein,ac-LDL)的摄取功能,Matrigel上培养并检测其形成血管能力,染色体核型分析其遗传稳定性,裸鼠实验、软琼脂实验观察致瘤性.结果:脐血来源的内皮祖细胞体外进行长期传代培养,群体倍增水平可达42代,有内皮细胞表面抗原的表达,具有内吞ac-LDL的功能和结合UEA-1的特性及体外形成血管的能力,分离培养的EPCs不同代次的内皮细胞均具有正常核型,并未见致瘤性.结论:脐血来源的内皮祖细胞具有较高的增值潜能,在体外传代可以大量扩增,长期传代时核型稳定,无致瘤性,是作为细胞治疗和基因治疗的理想种子细胞.     

原位杂交及其医学应用

原位杂交技术为核酸顺序在细胞水平的定位与测定提供了直接方法。1969年Gall等首先进行了细胞学水平上的DNA-RNA分子杂交。随着方法学的改进,应用放射标记探针与中期染色体的原位杂交发展到可以直接定位单拷贝基因或DNA顺序及细胞内存在的20个转录单位以上的RNA。然而细胞遗传学高分辨技术的应用,更进一步使特异的DNA顺序得到染色体上的精细定位。这样,原位杂交将细胞遗传学与分子遗传学紧密地结合起来,得以涉足双方在研究和应用上的一些新领域。     

脑胶质瘤及其颅内病变P16基因失活方式的研究

脑胶质瘤及其颅内病变Ｐ１６基因失活方式的研究何正文夏家辉曹亚刘运生袁贤瑞方加胜曹美鸿已有的研究认为，Ｐ１６基因失活方式主要是纯合缺失，而点突变比较罕见［１］。这与原有的抑癌基因Ｐ５３、Ｒｂ等的失活方式主要是点突变明显不同。这种不同究竟是Ｐ１６基因的一...     

人皮肤角质形成细胞的分离与原代无血清培养

目的：建立一种体外人皮肤角质形成细胞分离与原代培养的方法。方法：采用两步消化法对皮肤进行消化，获取角质形成细胞进行体外无血清培养基培养，进行细胞形态学观察、免疫组织化学、透射电镜鉴定及生长曲线的绘制与分析。结果：该方法可获取较多高纯度的角质形成细胞，且在体外可快速稳定增殖。结论：两步消化法和体外无血清培养是一种理想的皮肤角质形成细胞分离培养的方法。