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目的 构建BAG-1、Bcl-2双靶区反义RNA重组载体并初步探讨其对SGC-7901细胞增殖活性的影响.方法 从SGC-7901细胞总RNA中逆转录扩增包括全部编码序列的BAG-1和Bcl-2 cDNA,利用生物工程技术,反向插入真核细胞双表达载体pVITR02的多克隆位点中,转染SGC-7901细胞,MTT法检测对细胞增殖的影响,RT-PCR法观察对细胞BAG-1和Bcl-2 mRNA表达水平的变化,流式细胞术检测对细胞周期的影响.结果 限制性内切酶和测序分析表明,双表达质粒pVlTR02-AsBAG-1-Bcl-2构建成功.MTT法检测显示pVITR02-AsBAG-1-Bcl-2载体抑制SGC-7901细胞增殖,并旱时间依赖性,其中以72 h转染组抑制作用最显著(P<0.01);与对照组比较,pVITR02-AsBAG-1-Bcl-2组BAG-1和Bcl-2mRNA表达水平下降(P<0.05),细胞捌亡比例升高(P<0.01).结论 成功构建反义双靶区重组载体pVITR02-AsBAG-1-Bcl-2,并发现其能抑制SGC-7901细胞增殖并引起细胞凋亡. 相似文献
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目的优化梅毒螺旋体抗体(Anti-TP)筛查方案,制定Anti-TP反应性献血者屏蔽、归队策略。方法收集甘肃省红十字血液中心2016年5月-2017年5月ELISA筛查Anti-TP反应性标本249份,经TPPA法确证以及3个月后追踪检测,鉴别这些献血者Anti-TP是否为真(假)阳性,确定其归队还是继续屏蔽。结果 249份Anti-TP反应性标本中,TPPA确证阳性89份,不确定16份,此105名献血者作暂时性屏蔽;阴性144份,这部分献血者可以归队。任1种ELISA反应性标本中有2份为TPPA阳性,其S/CO值均≥1。符合归队的献血者追踪到61人,TPPA均为阴性。结论成功建立、完善了一个适合兰州地区初筛Anti-TP ELISA反应性献血者的筛查方案和归队流程。 相似文献
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目的:克隆和表达Alloferonl基因2串联体.方法:利用同尾酶法基因同向串联方案,在人工合成Allofemnl全基因的基础上,将Alloferonl基因由单体连接成2串联体,继而将获得的正确Alloferonl基因2串联体插入pGEX-4T-1表达载体诱导表达.结果:构建的Alloferonl基因2串联体经酶切和DNA测序分析,结果表明该基因串联体的序列与设计的序列完全相同.Alloferonl基因2串联体插入pGEX-4T-1载体后,重组菌经37℃诱导4 h,SDS-PAGE分析结果显示,该串联体得到较高水平的表达.结论:Alloferonl基因2串联体的构建与表达均获得了成功. 相似文献
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目的了解兰州市无偿献血者ABO、Rh(D)血型分布,合理有效利用血液资源。方法采集兰州市无偿献血者167649份血样,按国家规定的血型分型检测方法进行检测。结果兰州市无偿献血者ABO血型分布特征为:O>B>A>AB,基因频率:r>q>p,Rh(D)阴性无偿献血者所占比例为0.60%,Rh(D)阴性无偿献血者ABO血型分布为B>O>A>AB。结论本次调查结果可为制订兰州市采供血计划、合理调整血液库存及建立血型资料库提供有效的理论依据。 相似文献
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目的了解人T淋巴细胞病毒(HTLV-Ⅰ/Ⅱ)在兰州地区无偿献血人群中的感染情况状况,分析本地区流行趋势,为卫生行政部门制定输血相关政策和法规提供科学参考依据,防止经输血传播疾病。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)随机抽取2017年本地区无偿献血者14 686人进行HTLV-Ⅰ/Ⅱ病毒抗体筛查,反应性标本送检至卫生部临检中心做补充实验鉴定。结果初筛检出6例HTLV-Ⅰ/Ⅱ反应性标本(0.041%),经确证1例阳性(0.007%),所有阳性者累计献血1次,献血方式5名个人自愿,1名团体献血。结论本地区献血人群中存在HTLV-Ⅰ/Ⅱ感染者,对献血人群更大规模的HTLV-Ⅰ/Ⅱ筛查,实现献血者信息资源共享化,有效预防本地区输血传播HTLV。 相似文献
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目的 观察血站型去白细胞悬浮红细胞(以下称“去白红细胞”),在不同的保存时间段内细胞活性和功能的变化,为确定去白红细胞的保存效期,提供数据和参考依据.方法 用一次性去白细胞四联血袋采集全血,按标准操作规程离心、分浆后,红细胞悬浮于MAP液中,并通过去白细胞滤器,制成去白红细胞.提取400 mL全血制备的去白红细胞21袋,每袋各留取样品管6管,置4℃冰箱保存.用未过滤的悬浮红细胞做对照.于采血后d1、d7、d14、d21、d28、d35,测2组红细胞ATP和2,3-DPG值,并做统计学分析.结果 去白红细胞与悬浮红细胞各对应天数的ATP含量相比,均无统计学差异.组内比较:2组细胞各自d1和d35比较,去白红检验值为2 454.17±217.98,1 275.52±126.86;悬浮红检验值为2 270.83±220.99,1 190.76±86.95 (P<0.05).2组红细胞2,3-DPG含量,除d21外,其余各时间段比较均无差异.组内d1和d35比较,2组均无统计学差异.结论 去白红细胞在MAP液中保存至d35,其ATP含量(51.97%)与悬浮红细胞(52.44%)相似,均<70%.2,3-DPG含量优于悬浮红细胞.综合考虑其脆性、形态和游离血红蛋白变化等结果,我们推荐去白红细胞保存效期为28 d. 相似文献
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