栀子酸调节胆汁淤积大鼠SHP-LRH-1信号通路的实验研究

目的：研究栀子酸(geniposidic acid,GPA)对α-萘异硫氰酸酯(α-naphthyl isothiocyanate,ANIT)诱导胆汁淤积 大鼠胆汁酸代谢小分子异源二聚体伴侣受体(small heterodimer partner,SHP)与肝受体同源物1(liver receptor homologue 1,LRH-1)信号通路的调节。方法：将50只SD大鼠随机分为5组,分别为空白组、ANIT组、ANIT+GPA 100 mg/kg组 (AG100组)、ANIT+GPA 50 mg/kg组(AG50组)、ANIT+GPA 25 mg/kg组(AG25组),每组10只,连续给药10 d,空白组和 ANIT组用生理盐水灌胃,ANIT+GPA各组给予GPA,给药的第8天,除空白组外,其余各组用ANIT(65 mg/kg)灌胃1 次造模,继续给药至第10天,测血清总胆固醇(total cholesterol,TC)、三酰甘油(triglyceride,TG)和总胆汁酸(total bile acids,TBA)的含量;分离并培养大鼠原代肝细胞(rat primary hepatocytes,RPH),将RPH分为空白组、40 μmol/L ANIT 组、40 μmol/L ANIT+GPA 4.00,1.00,0.25 mmol/L组(A4G,A1G和A0.25G组),real-time RT-PCR检测RPH中SHP和胆汁 酸合成关键酶胆固醇7α羟化酶(cytochrome P450 family 7 subfamily A member 1,CYP7a1) mRNA转录水平,蛋白印迹法检 测SHP和CYP7a1蛋白表达;沉默实验中,将RPH分为空白对照组、阴性转染组、siRNA-LRH-1组(ZR组)、siRNA-LRH- 1+GPA 4.00,1.00,0.25 mmol/L组(ZR4G、ZR1G、ZR0.25G组),检测SHP,CYP7a1和LRH-1蛋白和基因的表达;过表 达实验中,将RPH又分为空白对照组、阴性转染组(空白转染siRNA-阴性组)、LRH-1过表达组(LRH-1过表达质粒,OE 组)、LRH-1过表达质粒+GPA 4.00,1.00,0.25 mmol/L组(OE4G,OE1G,OE0.25G组),检测SHP,CYP7a1和LRH-1蛋 白和基因的表达。结果：在体实验中,与空白对照组比较,ANIT组的TC和TBA均显著升高(均P<0.01)、TG无差别; 与ANIT组比较,AG100组和AG50组的TC和TBA均显著降低(均P<0.01)。RPH实验中,与空白对照组比较,ANIT组中 SHP的蛋白和基因水平均显著降低(均P<0.01),CYP7a1的蛋白和基因水平均显著升高(均P<0.01);与ANIT组比较, A4G和A1G组的SHP基因和蛋白水平均显著升高(均P<0.01),A0.25G组SHP基因和蛋白水平均升高(P<0.05),A4G和A1G 组的CYP7a1基因和蛋白水平均显著降低(均P<0.01)。LRH-1沉默实验中,与阴性转染组比较,ZR组中CYP7a1和LRH-1 蛋白和基因均显著抑制(均P<0.01),SHP无变化;与ZR组比较,ZR4G,ZR1G和ZR0.25G组SHP基因和蛋白水平均显 著升高(均P<0.01),LRH-1和CYP7a1无显著变化。LRH-1过表达实验中,与阴性转染组比较,OE组的CYP7a1和LRH-1 蛋白和基因均显著抑制(均P<0.01),SHP无变化;与OE组比较,OE4G和OE1G组SHP基因和蛋白水平均显著升高(均 P<0.01),OE0.25G组SHP基因显著升高(P<0.05),LRH-1和CYP7a1无显著变化。结论：RPH中LRH-1的过表达能上调 CYP7a1的活性,GPA可以改善ANIT诱导的胆汁淤积大鼠的生物化学水平和肝脏病理,其机制可能与GPA激活大鼠 RPH中SHP造成LRH-1的消耗来降低CYP7a1的表达有关。     

滁菊总黄酮对异丙肾上腺素致大鼠急性心肌缺血的影响

目的 观察滁菊总黄酮对异丙肾上腺素（ISO）致急性心肌缺血模型大鼠的保护作用。方法 将大鼠皮下注射ISO复制大急性心肌缺血模型,观察滁菊总黄酮对模型大鼠心电,血清肌酸激酶（CK）、乳酸脱氢酶（LDH）、心肌组织超氧物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）和丙二醛（MDA）含量的影响。结果 滁菊总黄酮能够抑制急性心肌缺血模型大鼠心电图J点抬高,降低血清CK、LDH活性,升高心肌组织SOD、CAT活性,降低MDA含量。结论 滁菊总黄酮对ISO致心肌缺血模型大鼠有保护作用。     

白藜芦醇下调肌球蛋白轻链激酶过表达抑制大鼠肝肿瘤增生

目的研究白藜芦醇(Res)通过影响肌球蛋白轻链激酶(MLCK)在肝脏中表达水平抑制原发性肝癌的增生。方法采用口服饮水中含0.9 mmol.L-1二乙基亚硝胺10周诱发原发性肝肿瘤;20周后,治疗组大鼠每天给予肌肉注射Res 50 mg.kg-16周;26周后,处死大鼠,计数肝表面癌结节数,称量和计算体重、肝重,肝/体重比,测定血清中甲胎蛋白的变化,观察大鼠肝脏的病理改变;用免疫组化和Westernblot法检测Res对MLCK的表达影响,用细胞凋亡试剂盒检测Res诱导肿瘤细胞的凋亡。结果 Res治疗组大鼠和模型组大鼠相比,体重增加,肝肿瘤结节数和肝/体重比和血清甲胎蛋白值减少或降低(P<0.05)。模型组大鼠肝组织MLCK的表达水平明显增加,而Res治疗可逆转MLCK的过表达水平,并诱导肿瘤细胞凋亡。结论 Res通过下调肝组织MLCK的表达水平诱导凋亡,抑制大鼠肝肿瘤细胞的增生。     

汪建民教授应用推拿手法辨证治疗小儿泄泻的临床经验

小儿泄泻是儿科的常见病、多发病。汪建民教授认为小儿泄泻的基本病因是“小儿脾常不足”,而小儿又是“纯阳之体”,推拿治疗手法宜轻柔,以补脾为主,重在摩腹,从而达到祛病健体的功效。通过学习汪建民教授辨证论治小儿泄泻的临床经验与推拿手法,明确了小儿泄泻的临床诊治思路。     

2015年江苏省肾及泌尿系统不明恶性肿瘤流行现状及趋势分析

目的 了解江苏省2015年肾及泌尿系统不明恶性肿瘤(以下简称"肾癌")发病和死亡的流行现状及2006—2015年的变化趋势,为制定相关防控措施提供科学依据.方法 利用江苏省2015年肿瘤登记资料,分析城乡、不同性别、年龄别的肾癌发病/死亡率和(0～74)岁累积率,结合2015年江苏省户籍人口资料,估计全省肾癌发病/死亡...     

儿童供肝在成人肝移植中应用的单中心研究

目的探讨儿童供肝成人肝移植的治疗效果及影响移植物存活的相关因素。方法回顾性收集2015年1月至2021年8月浙江大学医学院附属第一医院完成的55例儿童供肝成人肝移植的临床资料。供者中男性34例, 女性21例, 年龄(11.8±4.7)岁(范围:1～17岁)。17例(30.9%)为脑死亡器官捐献(DBD)供肝, 32例(58.2%)为心脏死亡器官捐献供肝, 6例(10.9%)为脑-心双死亡器官捐献供肝。受者中男性32例, 女性23例, 年龄(51.6±10.1)岁(范围:27～70岁), 其中10例患者为血型不合肝移植(18.2%)。通过Studentt检验、Mann-WhitneyU检验或χ2检验分析移植物早期存活(术后90 d)的相关因素, 通过Kaplan-Meier法绘制移植物存活曲线, 采用Logistic多因素分析术后早期移植物失活的独立相关因素。结果随访截至2021年10月31日, 中位随访时间[M(IQR)]为36.0(43.1)个月(范围:5.9～81.7个月), 移植物失活13例(其中2例因急性肝功能衰竭行再次肝移植)。单因素分析结果显示, 冷缺血时间、供受者血型是否...     

宁心滴丸对大鼠急性心肌缺血保护作用的实验研究

目的：观察宁心滴丸对大鼠急性心肌缺血的影响。方法：采用结扎大鼠冠状动脉左前降支建立急性心肌缺血模型，观测宁心滴丸对急性心肌缺血大鼠心电图、心肌梗死范围、肌酸激酶（CK）、乳酸脱氢酶（LDH）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、血栓素（TXB2）及6-酮-前列环素（6-Keto-PGF1a）的影响。结果：宁心滴丸能显著抑制急性心肌缺血大鼠心电图J点升高，减小心肌梗死范围，降低CK、LDH、MDA及TXB2水平，升高SOD、6-Keto-PGF1a水平。结论：宁心滴丸对大鼠急性心肌缺血具有保护作用。     

^131I—McAbJHⅢ对裸鼠荷人肝细胞癌的放射免疫显像研究

用氯胺Ｔ法标记抗人肝癌单克隆抗体，对荷人肝细胞癌ＢＥＬ－７４０２裸鼠进行体内生物学分布和肿瘤放射免疫显像研究。腹腔注射＾１３１Ｉ－ＭｃＡｂＪＨⅢ后２４－１２０ｈ，肿瘤部位的放射性浓聚，以７２－９６ｈ的影像最为清晰；而注射＾１３１Ｉ－ｍＩｇＧ则呈全身性均匀分布，无肿瘤部位选择性浓聚现象。＾１３１Ｉ－ＭｃＡｂＪＨⅢ注射后７２ｈ，１３种器官的肿瘤组织与非瘤组织的放射性比值均大于５，肿瘤的定位指数为７．０     

RORα与REV-ERBα在人胃癌组织表达情况及其临床意义

目的 研究维甲酸相关孤儿受体(RORα)与孤儿核受体(REV-ERBα)在人正常胃组织和胃癌组织中的表达情况、相关性及其临床病理意义.方法 收集50例不同临床病理分期的胃癌患者的石蜡切片,运用免疫组织化学染色技术检测RORα与REV-ERBα在人正常胃组织及不同临床病理分期胃癌组织中的表达,同时Western blot研究RORα与 REV-ERBa在人正常胃组织及不同TMN分期人胃癌组织中的表达情况.结果 免疫组织化学染色结果显示,RORα与 REV-ERBα在人胃癌组织中表达明显降低,同时RORα与 REV-ERBα的表达水平与胃癌患者TMN分期(P =0.013、 0. 010)及有无淋巴结转移(P=0.001、0. 002)密切相关,与患者年龄、性别及肿瘤大小无相关性.McNemar检验显示 RORα与REV-ERBα在人胃癌组织中的表达呈正相关性(Kappa =0. 377, P =0. 007). 同时 Western blot 结果显示 RORα与REV-ERBα在人胃癌组织中表达明显下降,且与 TMN分期有显著相关性(P<0.05).结论 RORα与REV-ERBα在人胃癌组织中表达降低与人胃癌组织的TMN分期及有无淋巴结转移有密切关联,并且RORα与REV-ERBα可能在人胃癌组织中存在协同表达及调控,从而影响胃癌的发生与发展.     

RORα对人胃癌细胞株AGS凋亡的影响

目的 探寻维甲酸相关孤儿受体（RORα）对于人胃癌细胞AGS的凋亡的影响。方法 根据处理浓度不同将以1 μmol/L的SR001处理的AGS设为1 μmol/L浓度组,将以0.1 μmol/L的SR001处理的AGS设为0.1 μmol/L浓度组,另设溶媒组及对照组,分别给予等量的溶媒、等量喜树碱（50 μmol/L）处理。采用MTT检测化疗药物5-FU介导的细胞凋亡情况,Western blot检测细胞中磷酸化RORα（p-RORα）的表达及cleaved caspase-3的蛋白的含量并比较。结果 用RORα激动剂处理可显著增加5-FU介导的AGS细胞凋亡率,差异有统计学意义（P＜0.05）;RORα激动剂处理48h后,人胃癌细胞中磷酸化RORα的表达增高,cleaved caspase-3的蛋白含量增多,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 RORα可以提高人胃癌细胞AGS5-中FU介导的细胞凋亡,具有作为化疗药物的增敏剂的潜质。