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1.
开放式实验教学在七年制分子生物学实验课中的应用 总被引:5,自引:1,他引:4
开放式实验教学是一种新的教学模式,克服了传统实验教学的弊端。通过对七年制学生的分子生物学实验课进行开放式实验教学的尝试,阐述了实行开放式实验教学的形式和内容及其优越性和必要性。 相似文献
2.
Objective: To observe the oxidative modification of high density lipoprotein (HDL) induced by culturedhuman arterial smooth muscle cells (SMCs). Methods: HDL cocultured with SMCs at 37℃ in 48 h was subjected,and native HDL (N-HDL) served as control. Oxidative modification of HDL was identified by using agarose gel electro-phoresis. Absorbances of conjugated diene (CD) and lipid hydroperoxide (LOOH) were measured with ultravioletspectrophotometry at 234 and 560 nm respectively, and fluorescence intensity of thiobarbuturic acid reaction substance 相似文献
3.
4.
本实验将编码人TNFα分子上与其受体相关的部分核苷酸序列缺失,代之以人EGF基因cDNA,实现基因重组,转化子经快速细胞破碎法切初筛,经Dot blot和Southern blot鉴定,从中挑选出20个人TNFα-EGF阳性重组质粒。为进一步获得重组嵌合人TNFα-EGF分子和TNFα分子和TNFα作用机制的深入探讨奠定了初步基础。 相似文献
5.
为了寻找和研究新的人类基因cDNA,本实验以T7DNA聚合酶对一DXFD52相关人肝细胞cDNA(DE)进行了分段部分测定,并将所测各部分序列分别在EMBL(欧洲分子生物学库)中进行核酸同源性检索,结果在库中没有找到任何具有同源性的人类基因或DNA片段。因此,我们初步认为DE为一新的人类基因cDNA片段。同时为初步探讨DE的功能,我们还成功地将DE构建于反转录病毒载体PLXSN上。 相似文献
6.
盐酸青藤碱诱导EA.hy926细胞自噬及其在抗炎中的作用 总被引:1,自引:0,他引:1
目的探讨中药单体提取物盐酸青藤碱诱导人内皮细胞EA.hy926自噬的机制及其在抗炎中发挥的作用。方法Western blot检测分别以终浓度为50、100μg/mL的盐酸青藤碱处理12h后的EA.hy926细胞中自噬相关蛋白LC3Ⅱ、ERK2、磷酸化ERK2及炎症细胞因子HMGB1表达变化情况;荧光显微镜观察吖啶橙染色的经盐酸青藤碱诱导后EA.hy926细胞酸性小体变化情况。结果经终浓度为50、100μg/mL的盐酸青藤碱处理EA.hy926细胞后,与对照组比较,100μg/mL的盐酸青藤碱可使自噬相关蛋白LC3Ⅱ表达(0.67±0.05)及ERK2的磷酸化水平(1.08±0.05)上调(P<0.05),ERK抑制剂U0126可使LC3Ⅱ表达下调(P<0.05)及EA.hy926细胞中酸性小体减少;盐酸青藤碱可抑制EA.hy926中LPS诱导的HMGB1表达,自噬抑制剂氯喹可逆转该细胞中盐酸青藤碱对LPS诱导HMGB1表达的抑制作用(P<0.05)。结论盐酸青藤碱可通过ERK通路诱导EA.hy926细胞自噬,该自噬过程是盐酸青藤碱下调炎症细胞因子HMGB1进而发挥抗炎活性的机制之一。 相似文献
7.
目的阐明GSK3β对于肾脏小管间质纤维化的作用。方法以TGF-β1诱导的体外肾小管间质纤维化模型为研究对象,以GSK3β特异抑制剂LiCl处理细胞和不同GSK3β表达质粒(野生型GSK3β表达质粒GSK3β-WT;第9位点上丝氨酸突变为丙氨酸,由此不能再被磷酸化失活而具有固有活性的GSK3β突变质粒GSK3β-S9A;第85、86位点上赖氨酸突变为丙氨酸、失去激酶活性的GSK3β突变质粒GSK3β-KD)转染细胞,观察肾脏纤维化的标志性分子纤维连接素蛋白(fibronectin,FN)表达水平的改变,以及对TGF-β/Smad信号通路的作用。结果 LiCl增加HK-2细胞GSK3β的磷酸化,抑制GSK3β的活性,同时降低了细胞基础水平和TGF-β1诱导的FN表达。过表达的GSK3β-WT增强TGF-β1诱导的FN表达,而这种效应在GSK3β-S9A转染细胞更为显著。过表达GSK3β-KD抑制TGF-β1诱导的FN表达。分析对TGF-β/Smad信号通路的作用,LiCl可以抑制TGF-β1诱导的Smad3磷酸化,而对Smad2磷酸化水平无影响。同时,LiCl也不改变Smad3的总蛋白表达。结论 GSK3β通过TGF-β1/Smad3信号通路促HK-2细胞纤维化,抑制GSK3β可以抗纤维化。 相似文献
8.
9.
人TRAIL分子胞外区的克隆及新型表达载体的构建 总被引:2,自引:1,他引:2
目的:利用基因工程技术克隆人TRAIL分子胞外区41-281片断的cDNA,构建其原核表达载体,从而建立原核表达体系。方法:采用RT-PCR方法从人早幼粒白血病细胞系HL-60的总RNA中扩增TRAIL分子41-281片断的cDNA,以限制性酶切和DNA测序进行鉴定,并将目的片断克隆至原核表达载体pQE-80L。结果:克隆到人TRAIL分子41-281片断的cDNA,DNA测序结果与报道的完全一致;构建了该片断的原核表达载体,为后续基因工程研究打下了基础。结论:成功克隆人TRALL分子41-281片断的cDNA并构建了其原核表达载体。 相似文献
10.
目的:制备具有功能活性的重组小鼠高迁移率族蛋白B1(recombinant mouse high-mobility group box-1,rmHMGB1)并观察其抗菌活性,为深入研究HMGB1抗菌功能创造条件.方法提取BALB/c小鼠脾脏总RNA,经RT-PCR扩增得到编码小鼠HMGB1的cDNA片段,序列测定正确后,构建于原核表达载体pQE-80L,转化于大肠杆菌DH5α,经IPTG诱导表达目的蛋白,再经Ni2 -NTA亲和层析柱纯化后,通过试管稀释法、琼脂扩散法两种抗菌实验观察并比较rmHMGB1对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌(JM109、ATCC25922、DH5α)、绿脓杆菌抗菌活性的差异.结果RT-PCR扩增得到了约648bp的cDNA片段,序列分析与GenBank中报道的编码小鼠HMGB1的cDNA序列一致,纯化后的rmHMGB1对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌(JM109、ATCC25922、DH5α)有明确的抗菌活性,其抗菌活性强弱依次为金黄色葡萄球菌>JM109>ATCC25922>DH5α,对绿脓杆菌则无抗菌活性.结论利用大肠杆菌可表达重组小鼠HMGB1,所获得纯化产物对部分细菌确有抗菌活性,此研究为进一步探讨HMGB1抗菌功能的机制奠定了基础. 相似文献