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锌转运体(ZnT)的发现深化了对锌在细胞和分子水平的认识.迄今为止所克隆出的4种哺乳动物ZnT(ZnT1、ZnT2、ZnT3、ZnT4)在蛋白结构上具有6个跨膜域、富组氨酸胞内袢、C,N末端位于胞内等共性.对ZnT的分布及基本功能进行了初步研究.ZnT1分布广泛,位于细胞膜上,可使细胞内锌外排;ZnT2分布于肠、肾、睾丸,ZnT3主要分布于脑、睾丸,ZnT4分布于乳腺、脑、睾丸,ZnT2、ZnT3、ZnT4均定位于胞内囊泡膜上,且功能相似,可使细胞内锌转运入囊泡.通过ZnT对胞内锌的这种外排或胞内转运作用,可使细胞避免高锌引发的细胞毒性.涉及锌的非专一性转运体包括二价金属离子转运体(DMT1)、调控锌铁的转运体样基因(ZIRTL)和人类调控锌铁蛋白(hZIP2)等.另外,对非哺乳动物涉及锌转运的组分作了简要介绍. 相似文献
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小鼠ZnT3 cDNA片断的克隆及其mRNA表达 总被引:5,自引:0,他引:5
为了解ZnT3(zinc transporter3)mRNA在小鼠各组织中的表达状况,用反转录多聚酶链反应法(RTPCR)克隆ZnT3 cDNA片段,荧光标记的全自动测序法确定ZnT3 cDNA片断的减基顺序,RT-PCR法检测小鼠各组织ZnT3mRNA表达并比较在组织中的表达量,结果:RT-PCR获得单一条带的片断,其大小700bp,碱基顺序与文献报道序列一致,在大脑皮层,海马和睾丸中检测到ZnT3 mRNA表达,其中睾丸中表达量最高,大脑皮层,海马表达量无显著性差别,心,肝脾,肺,肾,小肠及嗅球,小脑等组织中未见ZnT3 mRNA表达,说明克隆到正确的ZnT3 cDNA片断,ZnT3 mRNA主要表达于睾丸,大脑皮层,海马,提示ZnT3可能在脑功能和生殖功能中具有重要作用。 相似文献
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目的 探讨父亲亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因C677T多态性是否与母亲不明原因反复自然流产(URSA)的发生有关.方法 通过聚合酶链式反应-测序(PCR-测序)的方法对329对河南汉族URSA夫妇(观察组)及292对河南汉族健康夫妇(对照组)基因型进行分析.结果 无论是在对照组中还是观察组中,男、女之间的MTHFR C677T多态性位点的C和T等位基因频率和各基因型频率分布差异均无统计学意义(P>0.05);观察组中男女各方的MTHFR C677T多态性位点的T等位基因频率和含T的各基因型频率均显著高于相应的对照组(P<0.05),在女性中T等位基因是C等位基因发生URSA风险的2.267倍(95%CI:1.804~2.843),在男性中T等位基因是C等位基因发生URSA风险的2.239倍(95%CI:1.783~2.811).夫妻联合基因型分析中,夫妇TT/TT基因型发生URSA的风险最高,是CC/CC基因型夫妇的19.909倍(95%CI:8.608~46.049).结论 父母的MTHFR 677C>T是URSA发生的独立遗传易感因素. 相似文献
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黄素单核苷酸对羟自由基损伤的大鼠肝线粒体复合物Ⅰ的保护作用 总被引:2,自引:0,他引:2
龙建纲 王学敏 高宏翔 刘志 缪明永 刘健康 LONG Jian-gang WANG Xue-min GAO Hong-xiang LIU Zhi MIAO Ming-yong LIU Jian-kang 《第二军医大学学报》2005,26(10):1136-1139
目的:观察黄素单核苷酸(FMN) 对羟自由基(OH·) 损伤线粒体酶复合物1(complex Ⅰ) 的作用,分析FMN与complex Ⅰ的相互作用机制.方法:差速离心法分离大鼠肝线粒体,OH·体外损伤线粒体,氧电极法测定线粒体耗氧速率,比色法检测线粒体complex Ⅰ动力学参数及线粒体内MDA、GSH 含量及SOD活性.结果:OH·损伤后,线粒体3态、4态(state3,state4) 耗氧速率、complex Ⅰ最大反应速度(Vm) 降低(P<0.05) ,但呼吸控制率(respiratory control ratio,RCR) 、磷氧比(P/O) 及complex Ⅰ米氏常数(Km) 不变,线粒体中GSH含量下降(P<0.05) ,SOD活性降低(P<0.05) ,MDA含量升高.损伤线粒体补充FMN 165 ng/ml 可部分恢复complex Ⅰ呼吸途径state3耗氧速率(P<0.05) ,补充FMN 82.5~165 ng/mg可显著提高OH·损伤的线粒体复合物Ⅰ的Vm(P<0.05) .损伤线粒体补充较低剂量的FMN(FMN<82.5 ng FMN/ml),线粒体中GSH、SOD、MDA含量不发生变化,在补充较高剂量FMN(>165 ng FMN/ml)时 ,SOD活性升高(P<0.05) ,但线粒体MDA含量升高(P<0.05) 、GSH含量下降(P<0.05) .结论:FMN能够提高氧化损伤线粒体复合物Ⅰ活性,促进complex Ⅰ呼吸途径的state3耗氧速率.FMN不能直接清除OH·及自由基,可能通过保护complex Ⅰ中的酶结合/活性位点免受OH·等自由基攻击从而维持酶活性. 相似文献
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二价金属离子转运体DMT1的研究进展 总被引:5,自引:1,他引:4
1997年 ,两个研究组分别用表达克隆和定位克隆方法单独地克隆到同一个功能基因 :二价金属离子转运体 (divalentmetaltransporter 1,DMT1)。DMT1是具有 12个跨膜域的糖蛋白 ,在机体各组织广泛分布 ,特别在肠、肝、肾、脑等处有特征分布 ,肠中DMT1定位于十二指肠刷状缘膜表面 ,在其它组织细胞中定位于细胞膜和 或胞浆内内吞小体 (endosome)和溶酶体 (lysosome)的膜上。相关研究已基本证实 ,分布于十二指肠吸收细胞的DMT1可将肠道非血红素铁转运入细胞 ;组织细胞内吞小体膜的DMT1可将内吞小体中已解离铁转入胞浆 ,供细胞利用。DMT1表达主要受膳食铁水平调节。除遗传性血色素沉着症等疾病与DMT1表达过量有关外 ,亦已证实脑铁代谢紊乱相关的一些神经元变性病变与DMT1异常表达有密切联系。深入研究DMT1将为了解金属离子代谢机制提供重要的研究资料。 相似文献
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目 的研究SMO保存液对犬肾低温保存期间线粒体功能的保护作用。方法 建立犬离体肾脏单纯低温保存模型,分别采用0~4℃的SMO保存液、HTK保存液和UW保存液对犬肾进行灌注和保存,并根据所用保存液的不同分为SMO组、HTK组和UW组。分别于低温保存2、24、48和72h后取各组的肾组织皮质标本,进行病理学观察并应用氧电极(Clark)法测定肾组织细胞线粒体的呼吸控制率(RCR)和磷/氧比(P/O)。结果 犬肾在保存48h和72h后,SMO组肾组织病理学改变较HTK组轻;保存24h内肾组织RCR与HTK组无明显差异,但其余时间点均高于HTK组(P〈0.05),保存72h时差异最为明显(P〈0.01)。SMO组犬肾保存2h后,肾组织的P/O比值与HTK组无明显差异(P〉0.05),但在保存24h后则明显高于HTK组(P〈0.05)。SMO组与UW组各项观察指标比较,差异无统计学意义(P〉0.05)。结论 SMO保存液在减轻细胞形态学改变和保持线粒体整体功能方面显著优于HTK保存液,与UW保存液效果相当。 相似文献
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通过RT—PCR法检测不同锌营养状态小鼠肾脏MT—1 mRNA表达水平,探讨两者间关系。 相似文献
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锌对Caco2细胞ZIP4 mRNA表达的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
目的研究锌对Caco2细胞ZIP4mRNA表达的影响及其规律。方法通过锌特异螯合剂TPEN建立低锌Caco2细胞模型,RT-PCR法获得ZIP4cDNA片断,10μmol/LTPEN培养基诱导后,分别检测0、2、4、6、8和10h时点ZIP4mRNA的表达,及0、2·5、5、7·5、10μmol/LTPEN培养基诱导6h,检测各浓度组ZIP4mRNA的表达。结果RT-PCR获得单一条带的片断,大小与设计一致,获得正确的ZIP4cDNA片断,随着低锌时间的增加,ZIP4mRNA表达也升高,6h达到峰值;随着TPEN浓度的升高,ZIP4mRNA表达也随之升高。结论ZIP4mRNA表达受锌的调控,提示可能参与小肠对锌的吸收。 相似文献