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目的:优化提取基因组的方法,建立高效、简便、快速提取基因组DNA的方法,用于大批量转基因小鼠鉴定。方法:用一管酒精基因组DNA抽提法抽提基因组DNA。结果:经过分光光度法检测基因组DNA浓度、纯度及电泳分析DNA质量,显示一管酒精抽提法提取的基因组与经典酚氯仿提取法提取的基因组产量、纯度及质量没有明显差别;酶切全基因组后,2种方法获得的基因组都可以被酶完全切开;两者模板都能成功应用PCR扩增来鉴定基因敲入小鼠并可应用于基因组测序及Real-timePCR检测基因敲入小鼠中外源基因并鉴定其相对拷贝数。结论:一管酒精基因组抽提法得到的DNA质量可靠,可高效、简便、快速鉴定转基因小鼠及进行基因组DNA酶切、测序、Real-timePCR等后续实验。 相似文献
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目的 检测胚胎期小鼠Tbx18在mRNA及蛋白水平的表达情况,了解Tbx18在小鼠胚胎发育过程中的时空表达模式.方法 用整体原位杂交技术检测小鼠整胚TBX18 mRNA的表达,用X-gal染色检测Tbx18-Cre/Rosa26R/LacZ 双杂合基因谱系示踪模型小鼠胚胎的报告基因LacZ蛋白的表达,用荧光定量PCR检测小鼠胚胎期心脏mRNA的定量表达.结果 发现在小鼠胚胎期9.5~10.5 d转录因子Tbx18主要在前体心外膜表达,由前体心外膜逐渐迁移定位于心外膜;在11.5~12.5 d的小鼠胚胎Tbx18主要定位于心脏、上下肢、体节及上下唇鄂区域;大于12.5d的小鼠胚胎Tbx18除了上述部位外还定位于肾、输尿管、膀胱等区域.结论 转录因子Tbx18在小鼠胚胎发育过程中的表达具有时空特异性,对小鼠心脏的发育可能起着至关重要的作用;同时在上下肢、体节、唇鄂、肾、输尿管、膀胱的发育中也可能起非常重要的作用. 相似文献
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目的探索小剂量米索前列醇不同服药方法在人工流产中的应用。方法290例自愿要求行人工流产术终止妊娠的正常宫内妊娠妇女,随机分为A组150例和B组140例。A组舌下含化米索前列醇400μg,B组口服米索前列醇400μg,并于用药后2~3h行人工流产术,观察2组腹肌松弛及宫颈扩张情况和手术时间、镇痛效果和不良反应发生情况。结果A组显效率和总有效率分别为81,3%和96.7%,B组为56.4%和86.4%,2组比较差异均有统计学意义(P〈0.05);A组疼痛为0级的百分比为59.3%高于B组的35.7%,差异有统计学意义(P〈0.05);A组手术时间≤min者占71.3%高于B组的59.3%,差异有统计学意义(P〈0.05);A组不良反应发生率为36.7%低于B组的54.3%,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论小剂量米索前列醇舌下含服用于人工流产扩张宫颈,效果显著,不良反应少,值得临床推广应用。 相似文献
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目的 研究分析前列腺钬激光剜除术(Ho LEP)治疗良性前列腺增生(BPH)临床疗效。方法 选取2021年1月至2022年2月本院收治的BPH患者共60例作为研究对象,按手术方法不同将60例患者分为2组,其中观察组30例行HoLEP治疗,对照组30例行TURP治疗。结果 观察组术中出血量、留置尿管时间、住院时间均小于对照组(P<0.05);2组患者术后3 d及1周的白细胞介素-6(IL-6)、C-反应蛋白(CRP)指标水平均明显小于对照组(P<0.05);观察组术后6个月的国际前列腺症状评分(IPSS)、生活质量评分(QoL)均小于对照组(P<0.05);术后6个月,观察组的最大尿流率提高更为明显,且对照组残余尿量、前列腺体积均明显大于观察组(P<0.05)。结论 采用钬激光剜除术治疗BPH可以获得较好的疗效,且炎症反应小,患者术后生活质量改善明显,适合临床选择应用。 相似文献
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目的 了解拱墅区2012—2022年宫颈癌筛查情况,提供相关防治数据。方法 收集2012—2022年拱墅区“惠民工程”项目宫颈癌筛查数据,采用描述性统计方法和卡方检验进行分析。结果 2012—2022年,共有169 933名女性接受了TCT检查,发现异常者3 086例,总体异常率为1.8%;随访发现癌前病变238例,检出率140.1/10万;发现宫颈癌23例,检出率13.5/10万。共有207 334名女性接受了阴道B超检查,检查出生殖系统良性疾病92 171例,检出率44.5%。2012年到2022年,TCT检查年异常率波动下降,各年间异常率差异具有统计学意义;生殖系统良性疾病年检出率波动升高,各年间总体检出率的差异具有统计学意义。结论 要继续加强相关健康教育工作,扩大HPV疫苗接种覆盖率,加强宫颈癌筛查和早诊早治工作。 相似文献
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一管酒精法提取转基因小鼠胚胎组织基因组的实验方法及应用 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:优化提取基因组的方法,建立高效、简便、快速提取基因组DNA的方法,用于大批量转基因小鼠鉴定。方法:用一管酒精基因组DNA抽提法抽提基因组DNA。结果:经过分光光度法检测基因组DNA浓度、纯度及电泳分析DNA质量,显示一管酒精抽提法提取的基因组与经典酚/氯仿提取法提取的基因组产量、纯度及质量没有明显差别;酶切全基因组后,2种方法获得的基因组都可以被酶完全切开;两者模板都能成功应用PCR扩增来鉴定基因敲入小鼠并可应用于基因组测序及Real-time PCR检测基因敲入小鼠中外源基因并鉴定其相对拷贝数。结论:一管酒精基因组抽提法得到的DNA质量可靠,可高效、简便、快速鉴定转基因小鼠及进行基因组DNA酶切、测序、Real-time PCR等后续实验。 相似文献