“问题·主题·课题”教学模式在研究生培养中的应用

如何提高硕士研究生培养质量一直是研究生教育改革与创新的重要课题。“问题·主题·课题”教学模式是一种由“问题导引”“主题教学”与“课题研究”相结合的立体联动式教学方法,是植根于研究生已有经验及能力提出的问题作为新知识学习起点,以主题引领教学内容,以课题研究作为切入点的问题解决教学模式。在教学实践中,该模式以学生为教学主体,教师为主导,通过查阅文献提出问题、选择与确立主题以及开展课题的形式,突出以问题为导向,模拟和还原临床检验诊断相关医学知识产生的过程,以最终达到特定具体医学知识是什么的高级认识。本文简述基于“问题·主题·课题”教学模式在临床检验诊断学硕士研究生培养中的应用和教学实践经验,以期为教学方法和教学理念创新提供思路。     

蜂蜇伤战士血清相关蛋白分析

目的分析蜂蜇伤战士与正常人血清中蛋白质图谱之间表达差异。方法分别收集来源于解放军181医院于2008年10月—2010年2月收集的11例蜂蜇伤国防战士标本和8例健康人的血清标本进行双向凝胶电泳（2-DE）检测。通过基质辅助激光解析飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS）分析鉴定蜂蜇伤患者的血清蛋白质中存在显著差异的蛋白质点。结果在蜂蜇伤战士的血清中存在5个新增蛋白质点,3个蛋白点上调,7个蛋白点下调,其中包括KRT10角蛋白Ⅰ型、KRT1角蛋白Ⅱ型、触珠蛋白相关蛋白、触珠蛋白HP、HPR蛋白、α2-巨球蛋白、β血影蛋白brain1。结论采用固相pH梯度2-DE分离鉴定血清蛋质组能够获得很好的实验重复性。蜂蜇伤患者与正常人血清存在差异表达蛋白,为进一步研究蜂蜇伤相关生物标记提供理论基础及指导。     

先天性疾病研究及产前诊断中Array CGH的应用

染色体微缺失、重复、扩增和非整倍体等基因组DNA失衡是导致胎儿发育迟缓、畸形、死胎、流产和其他先天性疾病的内在原因。微阵列－比较基因组杂交技术（Array CGH）利用基因芯片取代了传统比较基因组杂交技术的正常中期染色体作为杂交靶标,与分别采用不同荧光标记的待测DNA和参照DNA杂交,通过比较两种荧光强度的比率,检测出染色体基因拷贝数变化。Array CGH已成为一个重要的细胞遗传学研究工具,用于产前诊断和先天性疾病诊断染色体亚显微结构异常。     

血清与尿液标本巨细胞病毒DNA联合检测在肾移植受者中的应用价值

目的探讨血清和尿液标本中巨细胞病毒(CMV)DNA的检测对肾移植受者的临床意义。方法采用实时荧光定量PCR检测174例临床肾移植受者血清与尿液中巨细胞病毒DNA载量并对其进行统计分析。结果 174例受者中尿液标本CMV-DNA阳性率(16.1%)明显高于血清(5.2%),差异具有统计学意义(P0.05)。通过对实验结果进行比较分析发现,尿液标本灵敏度明显高于血清标本。结论临床选择CMV的送检样本类型对提高其检出率具有重要意义,同时检测能较大地提高肾移植受者CMV的检出率。     

桂林地区女性生殖道支原体及衣原体感染情况分析

目的：了解桂林地区沙眼衣原体（CT）和解脲支原体（Uu）感染情况,探讨女性不孕、妇科炎症与 CT 、Uu 感染之间的关系。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应法对3232例不孕症女性、833例妇科炎症女性及895例参与健康体检者的生殖道分泌物进行检测,分析3组间 CT 、Uu 感染率的差异。结果不孕症患者 Uu 阳性率59．6％,CT 阳性率3．6％,明显高于同期体检健康者阳性率;妇科炎症患者 Uu 阳性率70．7％,CT 阳性率5．9％,略高于不孕症患者,明显高于参与健康体检者阳性率,差异有统计学意义（P＜0．05）。结论妇科炎症患者是生殖道感染支原体和衣原体的高发人群,不孕症的发生可能与生殖道支原体和（或）衣原体感染密切相关。     

荧光原位杂交法与免疫组织化学法检测乳腺癌HER-2基因扩增及蛋白表达的对比研究

目的比较桂林市荧光原位杂交法（FISH）和免疫组织化学法（IHC）检测乳腺癌组织中人表皮生长因子受体（HER-2）基因扩增及其蛋白表达情况的一致性．探讨FISH与IHC检测乳腺癌HER-2基因状态的临床意义。方法应用IHC和FISH对50例乳腺癌患者HER-2蛋白表达、基因扩增情况及17号染色体倍体性进行检测,分析IHC与FISH检测HER-2基因状态的差异以及HER-2蛋白状态与17号染色体倍体性的相关性。结果FISH与IHC结果总的符合率为82．0％．两者之间存在较好的一致性fkappa=0．6401,FISH检测IHC结果为3＋、2＋和0／1＋者的符合率分别为92．9％、70．0％和80．8％;IHC3＋及2＋者出现17号染色体多体性的几率比IHC0／1＋者高（P〈0．05）。结论FISH可以准确和稳定地检测乳腺癌组织中HER-2的基因状态及17号染色体倍体性：FISH检测IHC3＋者符合率较高,FISH与IHC的差异主要在于IHC2＋和IHC0／＋组,IHC仅作为检测HER-2基因状态的初筛方法．而IHC结果为2＋或0／1＋者的HER-2基因状态必须应用FISH进一步确定。     

荧光原位杂交法与免疫组织化学法检测乳腺癌HER-2基因扩增及蛋白表达的对比研究

目的 比较桂林市荧光原位杂交法(FISH)和免疫组织化学法(IHC)检测乳腺癌组织中人表皮生长因子受体(HER-2)基因扩增及其蛋白表达情况的一致性,探讨FISH与IHC检测乳腺癌HER-2基因状态的临床意义.方法 应用IHC和FISH对50例乳腺癌患者HER-2蛋白表达、基因扩增情况及17号染色体倍体性进行检测,分析IHC与FISH检测HER-2基因状态的差异以及HER-2蛋白状态与17号染色体倍体性的相天性.结果 FISH与IHC结果 总的符合率为82.0%,两者之间存在较好的一致性(kappa=0.640),FISH检测IHC结果 为3+、2+和0/1+者的符合率分别为92.9%、70.0%和80.8%;IHC3+及2+者出现17号染色体多体性的几率比IHC0/1+者高(P<0.05).结论 FISH可以准确和稳定地检测乳腺癌组织中HER-2的基因状态及17号染色体倍体性;FISH检测IHC3+者符合率较高,FSH与IHC的差异主要在于IHC2+和IHC0/+组,IHC仅作为检测HER-2基因状态的初筛方法 ,而IHC结果 为2+或0/1+者的HER-2基因状态必须应用FISH进一步确定.     

FISH技术检测桂林地区妇女宫颈脱落细胞hTERC基因扩增及其临床意义

目的探讨妇女宫颈上皮脱落细胞hTERC基因扩增情况和临床意义。方法采用荧光原位杂交技术(FISH)检测20例健康人及100例妇科疾病患者宫颈上皮脱落细胞hTERC基因扩增情况,确定hTERC基因扩增阳性阈值,研究临床病理诊断与hTERC基因扩增的关系。结果 FISH检测hTERC基因扩增阳性阈值为3.4%,CIN1患者FISH检测阳性率为8.8%(3/34例),CIN2患者为35.7%(5/14例),CIN3患者为77.8%(7/9例)以及宫颈癌患者为83.7%(36/43例)。健康对照组及CIN1者hTERC扩增发生机率显著低于CIN2及以上者(P<0.01)。结论 FISH可以成功地应用于妇女宫颈上皮脱落细胞hTERC基因扩增情况的研究;hTERC基因扩增与临床病理诊断密切相关。     

智力障碍小家系中致病基因的研究

目的 研究一个智力发育障碍家系中的致病基因突变.方法 染色体核型G显带方法分析先证者染色体核型,用全基因组外显子测序的方法探究致病基因,并在先证者家系中用Sanger测序法进行验证.结果 G显带核型分析未显示先证者染色体核型的数目和结构异常.全基因组外显子测序的方法共从先证者外显子基因中鉴别出1 455个单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNPs)和187个indels,结合家系信息筛选出X染色体上ARHGAP4基因突变与智力障碍表型相关,Sanger测序法验证结果一致,符合孟德尔家系遗传.结论 X染色体上ARHGAP4的C2822T突变位点可能与家系中的智力障碍疾病表型相关.