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目的:建立并优化SYBR GreenI实时RT-PCR体系,定量检测人、小鼠成熟精子中的CatSper1 mRNA。方法:用TRIzol分别提取人、小鼠成熟精子中的总RNA,逆转录后用SYBR GreenI实时PCR定量检测CatSper1 mRNA。SYBR GreenI实时PCR采用普通PCR试剂,加入SYBR GreenI染料,优化退火温度、Mg2+浓度及上、下游引物比例,并在PCR循环时采用四步法以消除引物二聚体的影响。优化完成后用不同浓度的精子cDNA为模板做标准曲线,以检测SYBR GreenI实时PCR的扩增效率。结果:定量检测CatSper1 mRNA的SYBR GreenI实时PCR体系适宜退火温度、Mg2+浓度及上、下游引物比例分别为63℃、3.0mmol/L和1∶1,四步法中采集荧光的温度为88℃。优化后用人和小鼠精子cDNA为模板做标准曲线分别为Y=-3.402log(X)+25.99和Y=-3.409log(X)+24.09,扩增效率分别为96.8%和96.5%,可定量检测人、小鼠成熟精子中的CatSper1 mRNA。结论:用普通的逆转录及PCR系统和试剂,建立了一种方便、廉价、可靠的SYBR GreenI实时荧光定量RT-PCR系统,可用于人、小鼠精子中CatSper1 mRNA定量检测。 相似文献
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目的:探讨兔视网膜挫伤后Müller细胞波形蛋白(Vimentin)表达的变化
方法:通过3J能量自由落体方式制作兔眼挫伤性视网膜病变模型,于伤后1/8,1,3,7,14d时处死动物取材,免疫组化染色和计算机图像分析仪检测视网膜挫伤后Müller细胞Vimentin的表达和分布。
结果:视网膜挫伤后1d Vimentin开始阳性表达增强,7d达到高峰,14d略有下降。随着视网膜挫伤时间的延长,Vimentin的免疫染色范围也逐渐向外扩展,3d时免疫染色达外界膜,7d时视网膜全层都有表达,二组比较,各时段差别均P〈0.01,存在统计学差异。
结论:视网膜挫伤后Müller细胞Vimentin反应动态增强。 相似文献
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目的:研究上皮细胞钠离子通道α亚基(ENaC-α)在大鼠和人的睾丸、精子上的表达及其与人精子活力之间的关系。方法:用western-blot检测ENaC-α在大鼠和人睾丸、精子上的表达,同时免疫荧光检测其在大鼠睾丸的分布特点。用计算机辅助精液分析检测ENaC-α的特异阻断剂EI-PA[5-(N-ethyl-N-isopropyl)-amiloride hydrochloride]对精子活力的影响。结果:ENaC-α亚基表达于大鼠睾丸精母细胞、精子细胞,以及大鼠成熟精子的鞭毛中段;它也存在于人睾丸和成熟精子的鞭毛中段。体外精子活力实验表明,获能过程中ENaC的阻滞,可以促进人精子活力的增加,差异有显著性意义(P<0.01)。结论:ENaC-α构成的离子通道在生精细胞中表达,最终局限分布于成熟精子的鞭毛中段的质膜中。而特异阻断剂EIPA可以抑制上皮细胞钠离子通道,从而提高精子活力。 相似文献
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20 0 0年 6- 7月 ,兴义市威舍镇猪场村发生一起发热、头昏、乏力等症状的病例 ,经临床流行病学、细菌学及血清学调查证实是一起甲型副伤寒沙门氏菌引起的甲型副伤寒暴发流行。现报告如下。本次流行波及 1个村 7个村民组 ,受威胁人口达1645人 ,共发生病例 10 7例 ,罹患率为 6 5 0 %。首例发病时间为 6月 8日 ,末例发病时间 7月 2 5日 ,流行时间 4 7天。高峰在 7月 1- 2 0日 ,共发生病例 87例 ,占发病总数的 81 31%。10 7例患者中 ,最小年龄 3个月 ,最大 70岁 ,发病主要集中在 10 - 35岁年龄组 ,病例 60例 ,占发病总数的 5 6 0 7% ;10 7例患者… 相似文献
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背景 眼压的异常可导致眼球形态和功能的改变,以往人们对影响眼压因素的研究多集中在眼部因素方面,全身因素对眼压的影响研究较少. 目的 研究中国人群正常眼压分布及其全身的影响因素.方法 采用横断面研究设计.研究对象为广州市干部疗养院健康体检者中自愿参加眼科检查的受试者.按照事先培训的统一标准测量受检者的身高、体质量及血压,利用非接触眼压计测量眼压,由接受统一培训并有经验的专业人员对受检者进行裂隙灯及眼底检查,眼底视盘表现可疑者接受倍频视野检查,通过问卷调查了解受检者眼部手术史,视野异常、任何一侧眼有手术史者排除.用Stata 11.0统计学软件进行数据整理和统计分析.结果 共7763人完成眼压检查,其中男4213人,女3550人;曾行内眼手术或诊断为青光眼者415人剔除本研究,共7348人符合本研究的纳入标准,平均年龄(59.1±10.3)岁.纳入的受检者平均眼压为(15.6±2.8)mmHg(1 mmHg=0.133 kPa),其中男性为(15.6±2.8) mmHg,女性为(15.7±2.8) mmHg,不同性别间眼压的差异有统计学意义(t=2.415,P=0.016).受检者右眼与左眼眼压测量值一致(r=0.830,P<0.001),故将右眼纳入统计分析.检查显示受检者眼压测量值呈近似正态分布,随年龄的增长眼压逐渐下降;多因素回归分析结果显示,眼压与年龄、性别均呈负相关(P<0.001),与体质量指数(BMI)、收缩压及舒张压均呈正相关(P<0.001).结论 在中国人群中年龄、性别、BMI及血压与眼压相关,与以往东亚地区的研究结论一致. 相似文献
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目的 分析佛山市第二人民医院2013年白内障住院患者的疾病构成比。设计 以医院为基础的横断面调查。研究对象 2013年1-12月佛山市第二人民医院眼科中心住院的白内障患者。方法 分析住院白内障患者的电子病历系统的病历资料。主要指标 住院白内障患者类型、住院天数及月份构成与分布。结果 2013年白内障专科收治住院患者3763例,占眼科中心住院年患者总数的58.69%。符合纳入标准者3755例,其中男性1512例(40.3%)。老年性、并发性、代谢性、外伤性和先天性白内障分别占85.9%、7.3%、4.3%、0.6%和0.2%。老年性白内障中女性是男性1.5倍;代谢性白内障中,女性是男性1.6倍,并发性白内障及先天性白内障中,男性和女性约为1:1;而外伤性白内障男性是女性3倍。老年性白内障平均住院(1.3±1.2)天,外伤性白内障住院(2.0±1.4)天。2月份白内障手术最少(115台),而 11月份手术最多(434台),是2月份的3.8倍。结论 在广东地级市医院眼科住院的白内障患者中,老年性白内障仍是最常见的类型。老年性白内障及代谢性白内障患者中女性更多,外伤性白内障中男性更多。白内障住院患者数量有明显季节波动。(眼科,2015,24: 56-58) 相似文献
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目的研究简体中文版老年男性症状量表(Chinese version of the Aging Males'Symptoms scale,CN-AMS)应用于国内中老年男性迟发性性腺功能减退时的信度、效度及实际使用效果。方法受访人群包括33岁以下青年男性27人,40岁以上中老年男性81人。要求所有受访志愿者完成AMS量表填写及间隔4周后的复填,以验证CN-AMS量表的有效性。为了验证中老年受访者是否存在雄激素缺乏,在每次填写量表时抽取空腹晨血,检测血清总睾酮(total serum testosterone,TT)、性激素结合球蛋白(sex hormone binding globulin,SHBG)水平,计算出血清游离睾酮(calculated free testosterone,cFT)水平。统计学上采用α信度系数法(Cronbach’s alpha)和重测信度法(test-retest stability)验证CN-AMS量表的信度。重测信度法采用Pearson相关性(Pearson's correlation)分析重测相关系数。采用单项与总和相关效度分析(Pearson's correlation)验证CN-AMS量表的逻辑效度。结果 27位青年男性完成了量表填写及4周后的复填。81位中老年男性中有57人接受了重复抽血,其中46位完成量表复填。CN-AMS量表的Cronbach’sα信度系数和Pearson's correlation系数在青年组为0.86和0.91,老龄组是0.91和0.83,两组人群合并后的数值则是0.94和0.91,显示出很好的效度和内在结构一致性。以cFT 225 pmol/L作为诊断迟发性性腺功能减退(late onset hypogonadism in males,LOH)的血清学阈值。量表的敏感度为81%,特异性为44%。结论研究证明CN-AMS在中国中老年男性LOH筛查中具有良好的适用性,但其特异性并不高,不适合单独用于LOH的诊断。 相似文献
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目的 对比分析欧堡Daytona 200度超广角激光扫描检眼镜和三面镜在孔源性视网膜脱离术前的结果,评估两种检查方法的一致性并分析相关影响因素.方法 回顾性分析行玻璃体切除术的孔源性视网膜脱离患者共111例(111眼),术前均进行自然瞳孔下欧堡Daytona 200度超广角激光扫描眼底检查和散瞳后三面镜检查,记录术中和... 相似文献