NF-κB参与低氧预适应对自体原位肝移植大鼠JNK通路的影响

背景：在肝脏缺血再灌注损伤中,NF-κB与JNK通路的串扰方式决定了细胞的死亡或存活。而将低氧预适应用于肝移植过程所导致的细胞凋亡现象,尚未见有报道。 目的：探讨低氧预适应后NF-κB的表达对移植肝JNK通路的影响及保护作用。 方法：采用经门静脉灌注法建立大鼠自体原位肝移植模型,SD大鼠随机分为正常对照组：不接受任何处理;自体移植组：行自体原位肝移植;低氧预适应组：移植前体积分数8%氮氧混合气体的低氧预处理90 min,然后行自体原位肝移植。分别于移植后 1,6,24 h处死大鼠取肝脏标本检测肝组织丙二醛、超氧化物歧化酶水平,免疫组化方法测定大鼠肝组织p-JNK蛋白,RT-PCR检测肝脏 NF-κB mRNA含量,透射电子显微镜下观察肝细胞的超微结构变化。 结果与结论：与对照组比较,两移植组肝组织丙二醛水平升高,超氧化物歧化酶水平降低(P < 0.05);与自体移植组比较,低氧预适应组丙二醛水平显著降低、超氧化物歧化酶水平显著升高(P < 0.05)。与正常对照组比较,两移植组各时相p-JNK蛋白的表达、NF-κB mRNA的转录水平显著升高 (P <0.05);与自体移植组比较,低氧预适应组NF-κB mRNA转录水平显著增高(P < 0.05),p-JNK蛋白的表达明显降低(P < 0.05)。透射电镜下自体移植组肝细胞出现典型的凋亡征象,而低氧预适应组肝细胞无明显凋亡形态。提示,肝移植大鼠低氧预适应后可能通过上调NF-κB的表达,减少活性氧释放,抑制JNK通路的持续激活,从而抑制肝细胞凋亡,减轻肝脏缺血再灌注。     

NF-κB参与低氧预适应对自体原位肝移植大鼠JNK通路的影响

背景：在肝脏缺血再灌注损伤中,NF-κB与JNK通路的串扰方式决定了细胞的死亡或存活。而将低氧预适应用于肝移植过程所导致的细胞凋亡现象,尚未见有报道。目的：探讨低氧预适应后NF-κB的表达对移植肝JNK通路的影响及保护作用。方法：采用经门静脉灌注法建立大鼠自体原位肝移植模型,SD大鼠随机分为正常对照组：不接受任何处理;自体移植组：行自体原位肝移植;低氧预适应组：移植前体积分数8%氮氧混合气体的低氧预处理90min,然后行自体原位肝移植。分别于移植后1,6,24h处死大鼠取肝脏标本检测肝组织丙二醛、超氧化物歧化酶水平,免疫组化方法测定大鼠肝组织p-JNK蛋白,RT-PCR检测肝脏NF-κB mRNA含量,透射电子显微镜下观察肝细胞的超微结构变化。结果与结论：与对照组比较,两移植组肝组织丙二醛水平升高,超氧化物歧化酶水平降低（P〈0.05）;与自体移植组比较,低氧预适应组丙二醛水平显著降低、超氧化物歧化酶水平显著升高（P〈0.05）。与正常对照组比较,两移植组各时相p-JNK蛋白的表达、NF-κB mRNA的转录水平显著升高（P〈0.05）;与自体移植组比较,低氧预适应组NF-κB mRNA转录水平显著增高（P〈0.05）,p-JNK蛋白的表达明显降低（P〈0.05）。透射电镜下自体移植组肝细胞出现典型的凋亡征象,而低氧预适应组肝细胞无明显凋亡形态。提示,肝移植大鼠低氧预适应后可能通过上调NF-κB的表达,减少活性氧释放,抑制JNK通路的持续激活,从而抑制肝细胞凋亡,减轻肝脏缺血再灌注。     

雷帕霉素抑制JAK/STAT通路对大鼠梗阻性黄疸肝肿瘤坏死因子-α表达的影响

目的探讨雷帕霉素抑制JAK/STAT信号通路在大鼠梗阻性黄疸中对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响。方法采用胆总管结扎方法建立大鼠梗阻性黄疸模型,将54只SD大鼠随机分为假手术组(A组)18只,梗阻性黄疸+STAT抑制剂雷帕霉素处理组(B组)18只,梗阻性黄疸组(C组)18只,A、B、C三组分别于术后1、3、5d处死大鼠,每个时间段6只。监测各时间段大鼠肝功能酶学变化,Westernblot法检测受试样品TNF-α蛋白表达,RT-PCR测各组不同时间段TNF-αmRNA的表达。结果与假手术组比较,两梗阻性黄疸组肝功能酶学差异显著,TNF-α蛋白及基因表达升高明显,与雷帕霉素干预组比较,梗阻性黄疸组TNF-α蛋白及基因表达升高明显,有统计学差异(P<0.01)。结论雷帕霉素可能通过抑制JAK/STAT信号转导通路降低梗阻性黄疸大鼠TNF-α表达,减少对肝细胞的损伤,对肝脏起到一定的保护作用。     

直视微创技术在肝硬化门静脉高压患者肝外胆管手术中的应用

胆囊结石及胆囊良性疾病是胆道系统常见的疾病,腹腔镜胆囊切除术是其治疗的首选方法,但合并肝硬化门静脉高压者施行腹腔镜手术的风险性较高。从手术时机和手术方式选择、手术技巧及围手术期处理等方面,将开腹直视微创手术技术应用于肝硬化门静脉高压肝外胆管手术的治疗体会进行总结。     

肝动脉/门静脉早期复流对肝移植大鼠小肠缺血再灌注损伤的影响

背景:当肝动脉与门静脉早期复流时序不同时,是否会加重对肝移植大鼠小肠缺血/再灌注的损伤尚未见大量报道.目的:探讨肝动脉与门静脉早期复流对肝移植太鼠小肠缺血/再灌注损伤的影响.方法:采用门静脉灌注的大鼠自体肝移植模型,78只SD大鼠以简单随机化法分为3组:肝动脉组(忙36):行自体肝移植手术,以40C乳酸林格液由门静脉灌肝40min,开放肝动脉及下腔静脉,10min后开放门静脉;门静脉组(n=36):行自体肝移植手术,门静脉开放恢复肝脏血流后10 min再开放肝动脉血流:假手术组(n=6):打开腹腔,游离肝脏后关腹.观察各组小肠显微及超微结构变化并测定一氧化氮水平.结果与结论:术后各实验组不同时段先后出现小肠绒毛排列不整或紊乱,小肠黏膜细胞线粒体大小不一,明显肿胀,呈类圆形,内有空泡变性,严重者可见嵴减少、断裂或消失.小肠组织一氧化氮水平均升高.上述变化在术后12 h达高峰.术后肝动脉先复流组小肠显微及超微结构损伤及小肠组织一氧化氮水平明显高于门静脉先复流组.提示,肝动脉早期复流可以通过早期肝脏供氧以减少移植肝脏的损害,但门静脉的延迟开放则加重了肝移植大鼠小肠的缺血,再灌注损伤.     

板蓝根多糖减轻自体肝移植大鼠缺血再灌注损伤的研究

目的：探讨板蓝根多糖对自体肝移植大鼠缺血再灌注损伤的作用。方法：将72只SD大鼠随机分为3组：自体肝移植模型组、板蓝根多糖＋自体肝移植模型组、假手术组。分别于术后1、12、24、48 h采血检测血清转氨酶及TNF-α的水平,并使用透射电镜观察肝细胞及其线粒体的形态学改变。结果：板蓝根多糖＋自体肝移植模型组血清转氨酶及TNF-α水平显著低于自体肝移植模型组,差异有统计学意义（P〈0.05）。透射电镜示：自体肝移植模型组肝细胞线粒体肿胀明显,膜结构模糊不清、部分破碎,线粒体嵴疏松溶解,有空泡形成;板蓝根多糖＋自体肝移植模型组线粒体结构改变不明显,肝细胞结构形态基本正常。结论：板蓝根多糖具有减轻移植肝缺血再灌注损伤的作用。     

肝移植中肠道屏障功能保护的研究进展

肝移植过程中,肝缺血再灌注损伤因素等可导致肠道屏障功能受损。通过谷氨酰胺、益生菌、组胺等制剂的干预,以及低氧预适应等方法可减轻肝移植过程中肠道屏障的损伤作用,进而提高移植肝的功能,提高患者存活率。

     

门脉高压性结肠病发生机制及防治进展

门静脉高压性结肠病的发生主要与门静脉高压时肠道血流动力学改变、扩血管物质的增加及内毒素血症等有关。降低门静脉压力及应用肠黏膜保护剂则是其主要防治措施。     

低氧预适应诱导肝脏HIF-1α高表达对自体原位肝移植大鼠JNK信号转导通路的影响

目的 检测低氧诱导因子α(HIF-1α)在自体原位肝移植大鼠肝脏的表达情况,探讨HIF-1α在JNK信号转导通路中的作用机制.方法 采用单纯随机抽样法将96只SD大鼠分为正常对照组、自体肝移植组、低氧预适应+自体肝移植组,每组32只.正常对照组:仅开腹分离血管,不作其他处理;自体肝移植组:采用经门静脉灌注法建立稳定的70%自体原位肝移植模型;低氧预适应+自体肝移植组:术前用8%氮氧混合气体低氧预处理90min,其他处理同自体肝移植组.分别于术后1、2、12、24h检测大鼠血清ALT、AST水平,免疫组织化学染色法测定大鼠肝脏组织HIF-1α的表达,RT-PCR检测c-Jun mRNA表达水平,Western blot检测Cleaved Caspase-3蛋白表达水平.多组比较采用方差分析,两组比较采用t检验.结果 术后1、2、12、24 h,低氧预适应+自体肝移植组大鼠血清ALT和AST水平显著低于自体肝移植组,但高于正常对照组,差异有统计学意义(F=2631.371、1177.642、810.383、682.848,743.618、1095.522、375.995、580.613,P＜0.05).自体肝移植组大鼠术后各时相点HIF-1α蛋白的表达水平明显低于低氧预适应+自体肝移植组,但均高于正常对照组,差异有统计学意义(F=191.737,284.482,459.419,213.782,P＜0.05).低氧预适应+自体肝移植组大鼠术后1、2、12 h c-Jun mRNA表达水平显著低于自体肝移植组,但均高于正常对照组,差异有统计学意义(F=66.211,53.169,9.645,P＜0.05),术后24 h c-Jun mRNA表达水平3组间比较,差异无统计学意义(F=1.100,P＞0.05).低氧预适应+自体肝移植组大鼠术后各时相点Cleaved Caspase-3蛋白表达水平显著低于自体肝移植组,但均高于正常对照组,差异有统计学意义(F=23.133,31.158,14.347,29.043,P＜0.05).结论 肝移植大鼠低氧预适应后HIF-1α的高表达可能通过抑制JNK信号通路的持续激活,下调Cleaved Caspase-3蛋白的表达,从而抑制肝细胞凋亡,减轻肝脏缺血再灌注损伤.     

低氧预适应对自体原位肝移植大鼠肠道TLR4表达的影响

目的：探讨低氧预适应（HP）对大鼠自体肝移植后肠道TLR4蛋白表达的影响。方法：将SD大鼠随机分为正常对照组（NC）、自体肝移植（AT）组和低氧预适应＋AT（HP）组3组,每组24只,采用改良的自体肝移植模型。HP组术前用8%氮氧混合气体处理90 min,分别于术后1、6、12 h处死大鼠取小肠标本,抽血检测血清ALT及AST水平,采用免疫组化法测定各组小肠组织TLR4蛋白表达情况,及应用逆转录-聚合酶反应（RT-PCR）检测小肠组织TNF-αmRNA的含量。结果：HP组血清ALT、AST水平,小肠组织TLR4蛋白表达及TNF-αmRNA的含量均显著低于AT组,但均高于NC组,差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论：HP通过下调肝移植大鼠小肠组织TLR4蛋白的表达,进一步抑制TLR4信号转导通路,减少TNF-α等细胞因子的合成与释放,从而减轻对移植肝功能的损伤。