转基因番茄防龋疫苗中外源目的基因鉴定及表达检测

背景:转基因植物可食性疫苗是以植物作为载体,将外源性基因整合到植物基因组当中,进一步激活动物或人体免疫系统以获得特异性免疫能力。但外源性基因的持续低表达量一直无法达到满意的免疫效果。目的:用分子生物学技术检测转基因番茄植株中pacA-ctxB融合基因表达及目的蛋白的表达量,为进一步观察可食用防龋疫苗的防龋效果提供研究基础。方法:(1)提取转基因番茄叶片总DNA,PCR检测外源性融合基因pacA-ctxB,实验分组3组:阳性对照组为质粒p2355-EPC10;空白对照组为普通番茄1株(红抗219);转基因组为转基因番茄9株;(2)BCA法检测转基因番茄果肉中总蛋白的水平;Western blot证实转基因番茄果实中PAcA/CTB目的蛋白的表达,目的蛋白检测分组2组:转基因组为表达外源性嵌合基因的转基因番茄5株(PCR检测阳性);空白对照组为普通番茄1株;酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测转基因番茄果实中PAcA/CTB目的蛋白浓度。结果与结论:(1)PCR扩增结果可见9株转基因番茄中有5株出现约1.7 kb特异性扩增条带,占总检测植株的55%;(2)转基因番茄总蛋白为3.15 g/L...     

康复治疗对长期住院慢性精神分裂症病人主观生活满意度的影响

目的调查比较参加康复治疗的精神分裂症病人(康复治疗病人)与未参加康复治疗的精神分裂症病人(一般治疗病人)的主观生活质量.方法随机抽取120例长期住院的慢性精神分裂症病人,随机分为两组,即康复组与对照组.在治疗前后对两组病人进行阳性与阴性症状评定量表(PANSS)、功能大体评定量表(GAS)、自知力及治疗态度评定问卷(ITAQ)的评定,由病人本人完成贝克抑郁13项自评量表(BDI-13)、精神分裂症主观生活质量评定量表(SQLS)、总体生活满意度量表(LS)、病人对医疗服务满意度问卷(PSQ)的评定.结果两组病人间的生活满意度分存在统计学差异,参加康复治疗的病人主观生活满意度高于未参加康复的病人;逐步回归分析发现,康复治疗与满意度各因子均呈明显相关,BDI也与满意度部分因子相关,在非康复组中尤为明显.结论加强康复治疗对改善长期住院慢性精神分裂症病人主观生活满意度有帮助;同时,加强对一般治疗病人抑郁的干预,可提高其主观生活质量.     

纳米材料的抗菌机制及在口腔感染性疾病中的作用

背景：口腔感染一直是威胁人体健康的一个重要因素,它是口腔医学领域的主要研究内容之一。纳米材料作为一种新兴且治疗效果卓越的抗菌材料,由于其稳定性好、不容易受到抗生素耐药性机制的影响、抗菌作用强、抗菌谱广等特点,已逐渐成为预防和治疗口腔感染性疾病的一种全新手段。目的：归纳总结纳米材料的抗菌机制及在口腔感染性疾病中的研究现状,为口腔感染的防治提供新的研究方向和依据。方法：第一作者于2022年2月使用计算机在PubMed、万方数据知识平台和中国知网数据库检索2000年1月至2022年2月发表的相关文献,以“nanomaterials,bacteriostat,oral infection”为英文检索词,以“纳米材料,抑菌,口腔感染”为中文检索词,最终纳入97篇文献进行分析。结果与结论：(1)纳米材料的抑菌机制主要为：表面接触、浸入-渗透、催化氧化以及光热细菌裂解,通过这些机制使其在口腔感染性疾病中有着良好的抑菌表现;(2)与传统材料相比,纳米材料与致病菌接触的概率大,同时具有较强的抑菌能力,这些优势使得其在口腔感染的预防和治疗中取得不俗的成效。但在临床应用方面,纳米材料仍然存在着不少问题,例如...     

康复治疗对长期住院慢性精神分裂症病人主观生活满意度的影响

目的:调查比较参加康复治疗的精神分裂症病人(康复治疗病人)与未参加康复治疗的精神分裂症病人(一般治疗病人)的主观生活质量。方法:随机抽取120例长期住院的慢性精神分裂症病人,随机分为两组,即康复组与对照组。在治疗前后对两组病人进行阳性与阴性症状评定量表(PANSS)、功能大体评定量表(GAS)、自知力及治疗态度评定问卷(ITAQ)的评定,由病人本人完成贝克抑郁13项自评量表(BDI-13)、精神分裂症主观生活质量评定量表(SQLS)、总体生活满意度量表(LS)、病人对医疗服务满意度问卷(PSQ)的评定。结果:两组病人间的生活满意度分存在统计学差异,参加康复治疗的病人主观生活满意度高于未参加康复的病人;逐步回归分析发现,康复治疗与满意度各因子均呈明显相关,BDI也与满意度部分因子相关,在非康复组中尤为明显。结论:加强康复治疗对改善长期住院慢性精神分裂症病人主观生活满意度有帮助;同时,加强对一般治疗病人抑郁的干预,可提高其主观生活质量。     

住院慢性非传染性疾病病人死亡风险监测指标调查研究

[目的]调查慢性非传染性疾病病人的死亡风险监测指标,为制定慢性病危重病人护理评估标准提供依据。[方法]选择2015年1月—12月在上海某三级甲等医院死亡的556例慢性非传染性疾病病人为研究对象,采用自行设计调查表提取病人死亡前24h的临床资料进行分析。[结果]慢性非传染性疾病死亡病人年龄为(72.47±12.96)岁;死亡高峰时间为08:00~12:00;恶性肿瘤、心血管系统、脑血管系统、呼吸系统疾病等为主要死亡原因,不同疾病病人死亡前24h生命体征、白蛋白、血小板、D-二聚体的异常指标分布差异具有统计学意义(P0.05);不同疾病异常指标的范围均在危急值边缘且范围各不相同。[结论]护理人员应针对慢性病各专科的预警范围进行护理评估,促进病人不良结局的转归。     

燃煤型氟斑牙动物模型复制方法的改进

目的建立高仿真燃煤型大鼠氟斑牙动物模型。方法以高氟煤拌粘土为燃料复制疫区空气环境,病区煤烘玉米配制饲料,30只SD大鼠按雌雄各半体重均等随机分为5组,即高氟空气饲养室内给予食物氟40 mg/kg(H)、25 mg/kg(M)、10 mg/kg(L)、2.1 mg/kg(A)组,阴性对照(C)组,观测大鼠体重、氟斑牙发生情况、尿氟及血氟含量、下切牙牙冠长度及釉质表面的超微结构。结果生火期空气氟浓度为(28.5±5.3)μg/m3、闭火期为(4.1±1.2)μg/m3。高氟空气环境下各组雌、雄大鼠体重增长均较C组缓慢(P<0.05)。H、M组大鼠下切牙釉质出现白色条纹和白垩色斑等变化,尿氟、血氟含量较C组升高(P<0.05)。H、M组下切牙冠长度增长较C组慢(P<0.05)。釉质表面白垩色区域矿化不全、釉柱间隙增宽。结论高氟空气环境对大鼠的生长发育可能会产生一定影响,通过模拟高氟空气环境并饲予煤烘玉米成功复制了高仿真的燃煤型氟斑牙动物模型。     

转基因番茄防龋疫苗中外源目的基因拷贝数的检测

目的：采用SYBR Green实时荧光定量 PCR方法检测转基因番茄防龋疫苗中外源目的基因的拷贝数。方法：用本课题组前期构建的重组质粒pEAC10、pEPC10作为标准品,SYBR Green实时荧光定量PCR法对含外源目的基因pacA-ctxB、pacP-ctxB的转基因番茄植株总基因组样本重复检测,取平均值作为目的基因拷贝数。结果：含pacA-ctxB转基因番茄植株外源目的基因的拷贝数为1.3,含pacP-ctxB转基因番茄植株外源目的基因的拷贝数为3.2。结论：构建的转基因番茄植株属低拷贝转基因植物,具有较好的稳定性。     

转基因番茄可食防龋疫苗免疫大鼠的实验研究?

目的用表达变异链球菌表面蛋白PAcP和霍乱毒素B亚单位融合蛋白的转基因番茄免疫SD大鼠,检测其免疫原性,探索研制安全、有效的可食用防龋疫苗的可能性。方法选择雌性 SD 大鼠18只,建立龋齿模型,随机分成3组(n=6),分别为转基因番茄组(实验组)、变异链球菌灭活全菌免疫组(阳性对照组)、非转基因番茄组(阴性对照组),免疫方式为灌胃免疫,每周免疫1次,连续免疫4周。分别于首次免疫前1 d 和每次免疫1周后采集血液、唾液样品,用酶联免疫吸附实验法检测血清中免疫球蛋白 G(IgG)、唾液中分泌型免疫球蛋白 A(SIgA)抗体水平;鼠龄70 d 时处死动物,并取上下颌骨进行龋齿计分。结果免疫后,实验组和阳性对照组大鼠血清中 IgG、唾液中 SIgA 抗体水平与阴性对照组比较差异有统计学意义(P <0.05);实验组和阴性对照组在 Dx 级外的各级差异有统计学意义(P <0.05)。结论转基因番茄防龋疫苗具有免疫原性,能够诱导实验动物产生有效的免疫应答,降低龋齿的发生。