2015年乐山市HIV-1抗体阳性病例抗病毒治疗效果及耐药分析

目的分析乐山市接受抗病毒治疗的HIV-1抗体阳性病例治疗效果及毒株耐药、突变情况。方法选取乐山市2015年接受抗病毒治疗时间>6个月的HIV-1抗体阳性病例共计620例,采集其抗凝全血进行病毒载量检测,对病毒载量>1 000copy/mL的样本采用自建基因型耐药检测进行耐药检测及分析。结果 620例患者中,419例病毒载量<200copy/mL,抗病毒治疗有效率为67.58%;175例病毒载量>1 000copy/mL,均值1.85×105copy/mL,病毒抑制失败率28.22%;其中93例样本核酸扩增阳性,主要为CRF07-BC亚型(占68.82%)和CRF01-AE亚型(占19.35%)。总耐药率6.13%(33/538),其中对核苷类反转录酶抑制剂(NRTIs)、非核苷类反转录酶抑制剂(NNRTIs)和蛋白酶抑制剂(PIs)的耐药率分别为57.58%、84.85%和18.18%;耐药毒株对NRTI主要突变位点为M184V、K65R,对NNRTI主要突变位点为K103N、K101E、Y181C、G190A,对PI未发现主要位点突变,次要突变位点主要是Q58E、A71V。结论乐山地区部分HIV-1抗体阳性患者抗病毒治疗效果较差。与2014年相比,总耐药率及对NRTIs、NNRTIs耐药率均有所下降,但对PI耐药率上升。应加强对接受HAART的HIV-1抗体阳性病例的病毒载量及耐药检测,及时评估治疗效果及耐药情况。     

鼠疫F1-V重组蛋白疫苗滴鼻免疫应答效果的研究

目的 以重组霍乱毒素B亚单位（rCT-B）为鼠疫F1-V重组蛋白的佐剂制备黏膜疫苗,观察小鼠诱导的黏膜免疫和系统免疫应答效果。方法以制备的鼠疫黏膜疫苗滴鼻免疫小鼠4次免疫后,采用间接ELISA检测血清特异性抗F1-V的IgG和IgA抗体及抗体亚型分类,检测鼻咽喉、肺、小肠及阴道灌洗液中特异性抗F1-V的黏膜分泌型IgA;采用流式细胞术检测鼻相关淋巴组织淋巴细胞、脾淋巴细胞、肠系膜淋巴结及小肠PP结T淋巴细胞表型的变化。结果以rCT-B为佐剂的鼠疫F1-V重组蛋白黏膜疫苗滴鼻免疫后,能够诱导血清中IgG、IgA抗体比正常对照组显著升高（P〈0．01）,同时诱导鼻咽、肺、小肠和阴道内特异性黏膜抗体升高,尤其是肺和生殖道冲冼液内抗体升高极为显著（P〈0．01）。与单纯的F1-V组相比,不同剂量比例疫苗组都能诱导较高、较快的血清IgG、IgA和黏膜sIgA,其中1：2疫苗组能诱导更强的系统免疫和黏膜免疫,但是相比之下,5：1疫苗组是最合适的免疫剂量。结论rCT-B佐剂不仅能提高鼠疫F1-V黏膜疫苗的系统全身免疫应答,还能促进诱导呼吸道、消化道和生殖道等局部黏膜sIgA抗体,增强局部免疫应答,提示rCT-B佐剂能显著提高鼠疫感染的免疫应答作用,这为下一步疫苗的免疫保护评价奠定了基础。     

蛋白体佐剂及用于鼠疫F1-Ⅴ抗原的免疫效果

目的以蛋白体(proteosomes)佐剂,非共价结合鼠疫F1-V重组蛋白为免疫原,探讨滴鼻免疫BALB/c小鼠后诱导的免疫应答和免疫保护效果。方法佐剂与鼠疫F1-V重组蛋白为免疫原非共价结合,滴鼻免疫BALB/c小鼠4次后,采用间接ELISA检测血清特异性抗F1-V的IgG和IgA抗体及抗体亚型分类,并检测鼻咽、肺、小肠及阴道灌洗液中特异性抗F1-V的黏液分泌型IgA;并用流式细胞术检测鼻相关淋巴组织淋巴细胞、脾淋巴细胞、肠系膜淋巴结及小肠PP结T淋巴细胞表型的变化。第4次免疫后7d,用100 LD_(50)的鼠疫141强毒株进行腹腔攻毒。结果(1)以蛋白体为佐剂的鼠疫F1-V抗原与单纯的F1-V组相比,蛋白体疫苗组诱导血清IgG、IgA抗体显著升高(P<0.01),同时蛋白体疫苗组能诱导鼻咽、肺、小肠和阴道内多个黏膜部位特异性IgA抗体的产生,尤其是肺和生殖道冲冼液内抗体升高极为显著(P<0.01);(2)蛋白体疫苗组主要引起IgG1型抗体,主要诱导T_H2型免疫反应;(3)蛋白体疫苗组NALT和SP中CD4~ /CD8~ 比值比PBS对照有显著增高(P<0.01),MLN和PP中CD4~ /CD8~ 比值与PBS对照差异无统计学意义(P>0.05)。(4)小鼠在100 LD_(50)的鼠疫141强毒株腹腔攻毒后鼠疫F1-V重组蛋白组小鼠免疫保护率为0,而蛋白体佐剂疫苗组小鼠免疫保护率为67%。结论以自制的蛋白体为鼠疫F1-V抗原的佐剂滴鼻免疫小鼠,蛋白体不仅提高鼠疫F1-V抗原的系统免疫应答,而且能诱导小鼠呼吸道、消化道和生殖道局部黏膜免疫应答。蛋白体佐剂鼠疫疫苗对100 LD_(50)的鼠疫141强毒株腹腔攻毒具有一定的免疫保护作用,这为鼠疫黏膜疫苗的研制提供候选材料,也为鼠疫黏膜疫苗深入研究奠定了基础。     

2012-2018年乐山市输入性疟疾病例分析

目的　分析乐山市疟疾报告病例的流行特征,为疟疾防治工作提供参考。方法　通过国家传染病报告信息管理系统和寄生虫病防治信息管理系统,收集2012–2018年乐山市疟疾病例信息、流行病学个案信息等相关资料,并进行流行病学描述性分析。结果　2012–2018 年乐山市共报告34 例疟疾病例,均为经省级疟疾诊断参比实验室确诊的输入性病例,其中间日疟14例、恶性疟18 例、三日疟1 例、卵形疟1例。感染来源地主要为非洲地区（占58.82%）和东南亚地区（占29.41%）,报告病例较多的月份为1、2、6月和7月,占病例总数的65.63%;男、女性病例分别为33例和1例;职业主要以赴境外劳务的农民、技术工人和经商者居多,年龄在21～59岁。患者从发病到就诊间隔时间最短0 d、最长31 d;初次就诊确诊率为85.29%。结论　乐山市已无本地感染疟疾病例,但存在输入性疟疾病例。应继续加强对境外归国人员的监测管理和健康教育工作,并加强培训、提高专业人员诊治能力,以巩固疟疾防治成果。     

乐山市2009年流感监测结果分析

目的了解乐山市2009年流行性感冒(流感)及其亚型甲型H1N1流行情况。方法每周监测哨点医院的流感样病例和暴发疫情的咽拭子标本,采用荧光定量PCR进行流感病毒型别鉴定。结果共采集384例标本,检测国家级哨点医院标本272例,检出H1N1阳性43例,阳性检出率为15.81%;A型季节性流感67例,B型季节性流感3例。检测人疑似感染流感暴发疫情标本112例。检出H1N1阳性55例,阳性检出率为49.11%。A型季节性流感73例。结论乐山市由于防控得力,未造成大面积流感传播。     

炭疽中性蛋白酶部分片段的重组表达、纯化及免疫效果研究

构建表达炭疽杆菌中性蛋白酶基因部分片段N蛋白(位于248~532氨基酸),并对其免疫效果进行研究;设计引物采用PCR法自炭疽杆菌扩增中性蛋白酶部分片段N,T-A克隆后构建原核表达质粒pET28a(+)-N,通过Western blot检测重组蛋白的免疫原性。以Al(OH)3为佐剂皮下注射免疫BALB/c小鼠,用ELISA方法测血清总IgG水平,MTT比色法测定脾T淋巴细胞增殖,采用流式分选法对脾T淋巴细胞亚群分类;Western blot显示重组蛋白具有免疫原性,rN免疫BALB/c小鼠后,ELISA检测到免疫鼠体内有特异性抗体产生;T淋巴细胞亚群试验表明,重组N蛋白以诱发Th2型免疫反应为主;MTT试验表明,rN蛋白对小鼠脾细胞在体外有促进生长和增殖能力,说明该重组蛋白具有生物学活性。纯化的rN可诱导高水平的抗体反应,为进一步的功能研究奠定了基础。     

乐山市手足口病病原学检测结果及影响因素分析

目的 探讨和分析乐山市手足口病病原学检测结果及其影响因素.方法 利用Real-time RT-PCR方法检测手足口病肠道病毒核酸,并对检测结果可能的影响因素进行分析.结果 390份咽拭子标本中,手足口病肠道病毒核酸检测总阳性率为26.2％;核酸检测的阳性率与检测试剂的种类无关,但与采样日期与发病日期、送样日期与采样日期以及检测日期与送样日期之间的时间间隔有关,还与是否在高峰季节采样有关.结论 该市手足口病病原以CVA16和EV71为主,在高峰季节采样以及病例发病后及时采样、及时送样并及时检测,可以提高手足口病肠道病毒核酸检测的阳性率.     

乐山市无症状HIV感染者与正常人CD3、CD4、CD45及CD3/CD45、CD4/CD45的对比分析

[目的]了解无症状HIV感染者与正常人的CD3、CD、CD45淋巴细胞绝对数及CD3/CD45、CD4/CD45情况. [方法]采用BD FACSCalibur流式细胞仪分别检测117例健康成人血液标本和87名无症状HIV感染者中的CD3、CD4、CD45淋巴细胞绝对数及CD3/CD45、CD4/CD45的比值,进行统计学分析. [结果]无症状HIV感染者男性与女性相比除CD3/CD45有统计学差异外(t=3.23,P＜0.05),其余几项指标均无统计学差异.但与正常人相比较比较CD3、CD4、CD3/CD45、CD4/CD45、CD45均存在统计学差异. [结论]当HIV感染者CD4细胞减少的还不是十分明显(未小于200个/μl),但发现感染者CD4/CD45的比值开始持续明显变小时,应开始考虑对感染者进行治疗.     

乐山地区健康成人CD4淋巴细胞计数参考值调查

[目的]建立乐山地区健康成年人CD3、CD4、CD45淋巴细胞绝对数及CD3/CD45、CD4/CD45正常值参考范围,及性别、年龄分布情况。[方法]采用BD FACSCalibur流式细胞仪检测117例健康成人血液标本中CD3、CD4、CD3/CD45、CD4/CD45、CD45,按不同性别、不同年龄分组进行统计学分析。[结果]乐山地区健康成人CD3参考平均值为:1416.37±356.25个/μl;CD4为:783.14±182.79个/μl;CD45为:2093.03±533.29个/lμ;CD3/CD45(%)参考平均值为:67.81±7.11;CD4/CD45(%):37.74±5.19,仅CD3/CD45在年龄组比较中差异有统计学意义,CD3、CD4、CD3/CD45、CD4/CD45、CD45在性别和年龄上差异均无统计学意义。[结论]首次建立乐山地区健康成年人CD3、CD4、CD45淋巴细胞绝对数及CD3/CD45、CD4/CD45参考值范围,为本地区艾滋病的分期和抗病毒治疗提供重要依据。     

乐山市美沙酮门诊吸毒人群HIV、HCV、梅毒和HSV-2感染状况调查分析

[目的]了解乐山市美沙酮门诊吸毒人群HIV、HCV、梅毒和HSV-2感染状况。[方法]采集乐山市3个区市(县)的美沙酮门诊618名吸毒人员的静脉血进行HIV、HCV、梅毒以及HSV-2血清抗体检测,并对检测结果进行分析。[结果]618名吸毒人员HIV抗体阳性率为10.84%,HCV抗体阳性率为71.84%,梅毒抗体阳性率为4.85%;3个美沙酮门诊吸毒人员HIV抗体阳性率以及HCV抗体阳性率差异有统计学意义(χ2=9.43,P=0.01;χ2=29.75,P=0.00);各年龄段间HCV抗体阳性率差异有统计学意义(χ2=5.23,P=0.00);HIV/HCV合并感染率为5.18%、HIV/HCV/梅毒合并感染率为0.16%、HCV/梅毒合并感染率为3.56%。67例艾滋病感染者HSV-2抗体阳性率为61.19%,HIV/HCV/梅毒/HSV-2疱疹合并感染率为1.49%,HIV/HCV/HSV-2疱疹合并感染率为52.24%。[结论]乐山市美沙酮门诊吸毒人群中HIV、HCV、梅毒以及HSV-2感染率较高,合并感染现象严重,应积极开展健康教育并采取针对性的干预措施。