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目的:建立小鼠胰岛微血管内皮细胞来源的外泌体的提取和鉴定方法,为糖尿病胰岛微血管内皮受损的发病机制研究及重建胰岛微循环完整性的应用提供必要材料。方法选取小鼠胰岛微血管内皮细胞株(MS-1)细胞作为研究对象,取其培养上清液,经多步离心结合蔗糖/D2O垫超速离心方法获取提取物,然后采用透射电镜和Western blotting 法对提取物进行形态和蛋白成分分析,以确定其是否为外泌体。结果提取物呈形态均一的类圆形囊泡,有完整双层膜包绕,内部含有低电子密度物质。囊泡大小约为40~100 nm,可散在分布,也可聚集成团,提取物均阳性表达CD63、CD9和TSG101分子。结论经过形态和蛋白成分分析证实所提取到的物质正是MS-1细胞来源的外泌体,便于后续临床和基础研究工作的开展。 相似文献
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高氟对人体胰岛B细胞功能影响的研究 总被引:4,自引:2,他引:2
目的 研究长期摄取过量的氟对人体胰岛B细胞功能的影响。方法 对暴露组和对照组人群进行X线检查、尿氟测定、口服葡萄糖耐量试验(OGTT)、血清胰岛素及C肽释放试验,对其饮用水进行水质分析。结果 ①暴露组饮水含氟量、尿氟总体几何均数明显高于对照组;②暴露组空腹血糖及服糖后峰值均明显高于对照组,峰值出现时间明显延迟;③暴露组糖尿病、糖耐量减低(IGT)的检出率显著高于对照组,暴露组中氟骨症者显著高于非氟 相似文献
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内皮细胞类表皮生长因子域7对血管平滑肌细胞凋亡的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 探讨人脐静脉内皮细胞株(HUVEC)中类表皮生长因子功能域7(EGFL7)对共培养的人主动脉平滑肌细胞(AoSMC)凋亡的影响以及可能的信号转导通路。方法 利用细胞共培养池行HUVEC与AoSMC共培养,将EGFL7的特异siRNA转染HUVEC细胞,利用MTS法检测HUVEC中EGFL7基因的有效沉默对共培养的AoSMC细胞存活率的影响;并合成无关siRNA作为阴性对照组(neg组),以未转染siRNA的细胞为空白对照组(con组)。同时利用分光光度法检测其对AoSMC细胞乳酸脱氢酶(LDH)、三磷酸腺苷(ATP)以及细胞凋亡蛋白酶(Caspase-3 )表达的影响;应用RT-PCR检测共培养AoSMC 的bcl-2及bax mRNA表达水平的改变。结果 与neg组及con组相比,干扰HUVEC细胞EGFL7表达12h后,AoSMC存活率无明显变化(P>0.05),而干扰24、36、48h后,存活率显著降低(P<0.05);干扰12、24、36、48h后,AoSMC细胞线粒体ATP释放量减少、培养基中LDH含量及Caspase-3表达量均增加(P<0.05)。RT-PCR检测结果显示,与neg组及con组相比,干扰siRNA转染HUVEC细胞24、36、48h,共培养的AoSMC凋亡基因bcl 2表达水平轻度降低(P<0.05);但Bax表达水平在相应干预时间点均无明显改变(P>0.05)。结论 内皮细胞株EGFL7基因沉默时,可导致平滑肌细胞凋亡;EGFL7通过bcl-2相关信号通路调节SMC凋亡,而与Bax基因表达无关。 相似文献
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高氟对人体血液生化及血脂代谢影响的临床观察 总被引:1,自引:0,他引:1
对暴露组和对照组各 62例进行了血 K 、Na 、Cl-、Ca2 、Mg2 、P3-、AL P、TC和 TG测定。结果显示 ,暴露组血 K 、P3-、ALP、TC和 TG显著高于对照组 ( P<0 .0 1) ,Mg2 显著低于对照组 ( P<0 .0 1)。暴露组中重度氟骨症与非氟骨症者上述指标也有显著性差异 ( P<0 .0 1)。表明长期摄取过量的氟对人体血液生化及血脂代谢有明显的影响 ,且与氟中毒程度呈正相关。 相似文献
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血清组织蛋白酶S、胱抑素C水平与冠状动脉粥样硬化病变严重程度相关性的研究——附107例报告 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:探讨冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)患者血清组织蛋白酶S(cathepsin S,CatS)及胱抑素C水平与冠状动脉病变程度的关系.方法:对155例疑诊心绞痛患者进行冠状动脉造影(coronary angiography,CAG),根据GAG结果分为冠心病组(107例)及对照组(48例),测定所有入选者的空腹血清CatS、胱抑素C水平,采用Gensini积分对冠状动脉病变程度进行评价并分析它们之间的关系.结果:冠心病组血清CatS、胱抑素C水平较对照组高(P<0.01),前者上升幅度更大,血清CatS水平与Gensini积分呈正相关(r=0.69,P<0.01),Logistic回归分析剔除年龄、性别、收缩压、血清总胆固醇等因素后,此相关性仍存在(r=0.71,P<0.01).结论:冠心痛患者的血清CatS、胱抑素C的水平增高,且CatS与冠状动脉粥样硬化病变程度密切相关,说明CatS及胱抑素C可能参与细胞外基质重塑的过程. 相似文献
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目的 研究类表皮生长因子域7( Egfl7)在动脉粥样硬化斑块内的表达水平和小分子干扰RNA(siRNA)对内皮细胞株血管生长因子表达的影响. 方法 利用免疫组化和免疫荧光染色检测人髂动脉和小鼠无名动脉粥样硬化斑块内Egfl7的表达水平;并利用以Egfl7为靶标的siRNA,通过脂质体将siRNA转入人脐静脉内皮细胞株(HUVEC),以未转染siRNA细胞和转染无关siRNA细胞为对照,在干扰后0h,12 h,24 h,48 h,反转录聚合酶链反应(PT-PCR)检测Egfl7、血管内皮生长因子(VEGF)、血小板衍生生长因子A、B(PDGF-A、PDGF-B) mRNA水平的改变,免疫印迹法检测Egfl7、VEGF、PDGF、血管细胞黏附分子(VCAM)及细胞间黏附分子(ICAM)蛋白表达水平的变化.结果 人髂动脉和小鼠无名动脉粥样硬化斑块内Egfl7表达水平上调;HUVEC内Egfl7在siRNA干扰后0h、12 h、24 h、48 h时mRNA表达分别为(0.31±0.05)、(0.14±0.02)、(0.09±0.01)、(0.02±0.01),蛋白表达为(0.93±0.08)、(0.71±0.11)、(0.39±0.09)、(0.07±0.01).Egfl7、VEGF、PDGF-A、PDGF-B mRNA及其蛋白表达水平随干扰时间延长均下降或抑制,与siRNA干扰0h比较差异有统计学意义(均P<0.05). 结论 动脉粥样硬化斑块内Egfl7表达水平提高;siRNA抑制HUVEC Egfl7表达水平的同时,其他血管生长因子和黏附分子表达水平亦下降. 相似文献
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目的探讨葛根素对动脉球囊损伤后细胞外基质重塑过程中组织蛋白酶S(CatS)及其抑制剂胱蛋白C(CysC)表达的影响及其意义。方法建立兔髂腹主动脉球囊损伤后再狭窄模型。观察应用葛根素治疗前后再狭窄形成的范围。检测再狭窄局部CatS及其抑制剂CysC和内皮下胶原的表达水平。结果葛根素组与球囊损伤组比较,再狭窄范围明显减小,CatS表达水平降低,内皮下胶原含量减少,(P〈0.05)CysC表达水平无显著差异(P〉0.05)。结论葛根素可降低球囊损伤部位再狭窄形成过程中CatS表达、减少斑块内胶原的聚集,抑制再狭窄的形成。 相似文献
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检测心脏型脂肪酸结合蛋白对判断慢性充血性心力衰竭严重程度的价值--附76例报告 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:评价定量检测血清心脏型脂肪酸结合蛋白(heart type-fatty acid binding protein,H-FABP)对判断慢性充血性心力衰竭严重程度的临床价值.方法:采用酶联免疫吸附试验一步夹心法检测18名健康体检者、76例慢性心力衰竭患者(纽约心脏病学会心功能分级Ⅱ级24例、Ⅲ级29例、Ⅳ级23例)的血清H-FABP,同时测定心肌肌钙蛋白I(cardiac troponin I,cTnI)、肌酸激酶同工酶-MB(crea-tine kinase isoenzyme MB,CK-MB),并作比较.结果:随着心力衰竭程度的加重,慢性心力衰竭患者H-FABP、cTnI、CK-MB的血清浓度逐渐升高,心功能Ⅱ级、Ⅲ级、Ⅳ级患者的H-FABP值分别为(3.2±1.6)μg/L,(6.7±1.7)μg/L,(9.5±2.0)μg/L;cTnI值分别为(0.23±0.07)μg/L,(0.45±0.11)μg/L,(0.76±0.19)μg/L;CK-MB值分别为(13.6±3.1)U/L,(14.5±4.4)U/L,(16.3±3.9)U/L,均为P<0.05;治疗后,随病情好转,H-FABP、cTnI的血清浓度明显下降[治疗后心功能Ⅱ级、Ⅲ级、Ⅳ级患者的H-FABP值分别为(2.8±1.5)μg/L,(3.1±1.3)μg/L,(5.6±1.3)μg/L;cTnI值分别为(0.16±0.08)μg/L,(0.36±0.07)μg/L,(0.57±0.10)μg/L],P<0.05;CK-MB值在治疗前、后差异无统计学意义.结论:血清H-FABP可作为判断慢性充血性心力衰竭严重程度的可靠指标. 相似文献