腺病毒介导MDA-7/IL-24选择性杀伤肝癌 细胞HepG2的研究

目的 ：观察MDA-7/IL-24基因对肝癌的选择性杀伤作用，为肝癌的基因治疗提供理论基础。 方法 ：将携带人MDA-7/IL-24基因的腺病毒Ad.mda-7感染人正常肝细胞L02和肝癌细胞HepG2;用RT-PCR法观察MDA-7/IL-24基因的表达;ELISA方法检测细胞培养上清液中MDA-7/IL-24蛋白的浓度;4甲基偶氮唑蓝染色法（MTT）及Hoechst染色观察MDA-7/IL-24对肝癌细胞的生长抑制和杀伤作用;Annexin-V和PI双染后流式细胞仪检测2种细胞的凋亡;用流式细胞仪检测细胞周期。 结果 ：复制缺陷型腺病毒能介导外源基因MDA-7/IL-24在肝癌细胞株HepG2和正常细胞L02中的高效表达;细胞培养上清液中有MDA-7/IL-24蛋白的表达; MDA-7/IL-24能明显抑制肝癌细胞生长并可促进肝癌细胞的凋亡;MDA-7/IL-24阻滞肝癌细胞于G2/M期，能选择性杀伤肝癌细胞而对正常的肝细胞无阻滞作用和毒性作用。结论 ：复制缺陷型重组腺病毒载体Ad.mda-7能介导MDA-7/IL-24基因在人肝癌细胞中高效表达，促使细胞增殖阻滞及诱导肿瘤细胞凋亡，选择性地杀伤肝癌细胞HepG2，而对正常肝细胞L02无任何毒性作用。     

重组腺病毒介导mda-7/IL-24基因与阿霉素联合治疗裸鼠肝癌

目的 将重组腺病毒介导的mda-7/IL-24(melanoma differentiation-associated gene-7)与阿霉素(adriamycin,ADM)联合治疗裸鼠肝癌,探索基因治疗和化疗相结合治疗肿瘤的新方法.方法 构建携带人mda-7/IL-24的重组腺病毒载体(Ad-mda-7),单独使用该载体或ADM以及两者联合使用对实验性肝癌裸鼠进行治疗,观察抗肿瘤效果.结果 成功构建重组腺病毒并实现体内表达,Ad-mda-7+ADM联合治疗组裸鼠平均生存时间为(83.8±4.82)d,与其它3组相比生存期明显延长(P＜0.01);Ad-mda-7+ADM组裸鼠肝癌生长大小与单独使用ADM或Ad-mda-7相比明显缩小(P＜0.01).结论 重组腺病毒介导mda-7/IL-24联合阿霉素对裸鼠人肝癌转移模型有明显的抗肿瘤作用及协同效应,可望用于肝癌基因治疗的研究.     

凋亡抑制因子livin在肝癌组织中的表达及其意义

本实验通过免疫组化SP法研究凋亡抑制因子livin在肝癌组织中的表达情况，探讨其与原发性肝细胞癌（PLC）TNM分期、复发之间的关系。     

分化型甲状腺癌复发因素分析

目的了解有关影响分化型甲状腺癌复发的因素。方法通过对140例复发的分化型甲状腺癌患者的回顾性分析,比较各种发病因素,采用统计学方法对比可能影响复发的因素。结果性别、年龄对甲状腺癌的复发无明显影响(P>0.05)。肿瘤大小、病理分型、淋巴转移、手术方式及术后服药等因素对复发均有影响(P>0.05),其中是否行颈部淋巴结清扫对复发无影响。结论对于可能复发的分化型甲状腺癌,应采取相应措施尽量减少复发,同时也不应盲目扩大手术范围。     

甲状旁腺组织中细胞周期素D1过度表达与Rb肿瘤抑制基因的表达和临床意义

目的探讨甲状旁腺组织中细胞周期素D1(cyclin-D1)及视网膜母细胞瘤易感基因(Rb)的表达及临床意义。方法应用免疫组化技术对36例甲状旁腺腺瘤,10例正常甲状旁腺组织及10例甲状旁腺增生中cyclin-D1及Rb肿瘤抑制基因的表达进行检测。结果腺瘤组cyclin-D1的表达明显高于正常组及增生组(P<0.05),正常组同增生组比较差异无显著性(P>0.05)。Rb的表达正常组、增生组和腺瘤组三者之间比较差异均无显著性(P>0.05)。cyclin-D1过度表达和Rb表达与肿瘤大小、血清钙水平及甲状旁腺素(PTH)水平无关。结论cyclin-D1的过度表达在甲状旁腺腺瘤发生中起重要作用。cyclin-D1过度表达导致Rb磷酸化或表达下调而失去细胞抑制效应可能为甲状旁腺腺瘤发生的机制之一。     

结缔组织生长因子在血吸虫病肝纤维化鼠肝窦内皮细胞中的表达及意义

目的:动态观察结缔组织生长因子(CTGF)蛋白在血吸虫病肝纤维化鼠肝窦内皮细胞表达水平的时相变化,探讨其与肝窦内皮细胞下基底膜形成的关系。方法:采用腹部敷贴法建立血吸虫病肝纤维化模型,HE、Masson染色和透射电镜观察其病理变化;免疫组化技术检测CTGF、Ⅳ型胶原(ColⅣ)和层粘连蛋白(LN)在小鼠肝脏组织中的表达和分布;并应用彩色图像分析仪进行定量分析。结果:与正常对照组比较,模型组鼠肝窦内皮细胞表达CTGF蛋白阳性或强阳性,肝窦壁LN、ColⅣ表达水平增高,且随着肝纤维化的发展,CTGF和LN、ColⅣ表达逐渐增强,肝窦内皮下基底膜逐渐增厚。图像定量分析两组平均吸光度值、平均灰度值和阳性面积比具有统计学差异;CTGF蛋白与LN、ColⅣ水平呈正相关。结论:血吸虫病肝纤维化时小鼠肝窦内皮细胞通过CTGF蛋白表达上调,调控细胞外基质产生,导致ColⅣ、LN分泌增加,参与肝窦内皮下基底膜形成,从而引起肝内微循环障碍。     

围手术期同种异体输血对外科手术的影响

输血是一种医疗行为,是临床常用的治疗措施,也是外科手术保障的重要手段之一,但它在治疗的同时,也会对受血者的免疫功能产生影响。Opelz等在1973年对肾移植者的一项回顾性分析发现,肾移植患者在移植前多次接受输血,可以提高移植肾的存活率。这一现象使人们开始关注输血所诱发的免疫调节作用,并在相关领域积累了大量的临床资料。     

血清CA153、CA125及CA19-9检测对乳腺癌的诊断价值

目的探讨血清CA153、CA125和CA19-9检测对乳腺癌早期诊断的价值。方法采用化学发光免疫法分别检测乳腺癌、乳腺良性疾病患者及正常健康体检者血清CA153、CA125和CA19-9的水平。结果乳腺癌患者血清的CA153、CA125和CA19-9的表达水平及表达阳性率均明显高于正常对照者和乳腺良性疾病患者(P<0.01);乳腺癌患者术后CA153、CA125及CA19-9表达水平较术前明显下降(P<0.01),与正常对照者比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论肿瘤标志物CA153、CA125及CA19-9对乳腺癌有一定的诊断价值,且可作为监测乳腺癌病情进展、评估治疗疗效及预后的指标。     

腹部外伤伴会阴部严重损伤的临床救治

目的 探讨腹部外伤伴会阴部严重损伤的救治.方法 收集同济大学附属东方医院急诊创伤外科2010年1月至2011年5月收治的腹部外伤伴会阴部严重损伤病人10例,其中合并骨盆骨折9例,年龄17～56岁,平均37岁.通过运用损伤控制,在救治腹部外伤的同时积极抗休克治疗,合理、及时地清创,加强生命支持等,预防阻断多器官功能不全综...     

缺氧诱导因子对肝癌细胞生长和侵袭能力的影响

目的检测在缺氧条件下缺氧诱导因子2α对肝癌SMMC-7721细胞生长和侵袭能力的影响。方法缺氧培养条件下脂质体Lipofectamine介导缺氧诱导因子（HIF-20α）脱氧寡核苷酸转染SMMC-7721肝癌细胞，测转染前后HIF-2α mRNA量和蛋白量检验转染效果；MTY法测定细胞生长和黏附能力变化；Transwell小室测定细胞的体外侵袭能力。结果HIF-2αmRNA和蛋白表达在反义转染组显著低于正义组、随机组与对照组（P〈0．01）。HIF-2仪表达阻断对细胞生长和活力无显著性影响（P〉0．05），但显著抑制体外粘附能力（抑制率16．99％～31．07％）和侵袭能力（抑制率17．9％）（P〈0．01）。结论HIF-2α表达阻断可抑制SMMC-7721肝癌细胞的黏附和侵袭活性。对其生长无显著影响。