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乙型肝炎病毒X基因转基因小鼠的初步建立 总被引:1,自引:0,他引:1
HBx基因为HBV基因组上的一个开放读框,可编码具有转录反式激活作用的蛋白(HBxAg).已证实在体外HBxAg可使哺乳细胞株发生恶性转化[1].为了探索在体内HBxAg转化细胞的作用,国外数个实验室已相继建立了HBx转基因鼠模型[2,3].为研究HBx基因在肝细胞癌变过程中的确切作用提供有效的动物模型,我们初步建立了携带乙型肝炎病毒X基因的转基因小鼠,现报道如下. 相似文献
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本研究以pESnx穿梭质粒为载体,选用恶臭假单孢杆菌TOL质粒上的xylE基因作为突变靶基因组构建的重组构件,经微注射导入ICR小鼠549枚受精卵雄原核,将存活的352枚卵移入24只假孕鼠输卵管内,7只妊娠,共产仔41只,其中7只死胎,出生后死亡4只,30只存活。注射卵存活率为64%(352/549),出生率为11.6%(41/352)。存活鼠经PCR-Southern检测,整合率为57%(17/30)。在整合阳性鼠中选择了杂交信号较强的2只当代公鼠,通过回收载体和转化试验,结果表明整合基因完整,具有转化的功能,由此,建立了突变靶基因xylE转基因小鼠模型。 相似文献
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携带xylE的转基因小鼠的制备 总被引:2,自引:0,他引:2
建立了一种新的转基因小鼠致突变检测模型.选用xylE基因作为诱变的靶基因,以pESnx穿梭质粒作为载体,通过显微注射法将线状pESnx导入ICR小鼠制备G0小鼠.将显微注射后存活的352/549枚受精卵分别移入24只受体雌鼠的输卵管中,共产生41只仔鼠,存活30只(G0),经过整合检测,检测出转基因小鼠17只,阳性率为57%.从中筛选出2只完整整合了pESnx的转基因小鼠作为首建鼠(foundermouse)进行繁育,目前已繁殖到第三代(G3).经过逐代整合检测,证明转入的基因可稳定地遗传.上述结果表明已成功地制备了在基因组中整合了pESnx质粒携带xylE的转基因小鼠. 相似文献
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xy1E-ICR转基因小鼠突变检测模型不仅可用于体内基因突变研究,还可以在同一动物体内同时进行多个遗传学终点的比较分析工作。本研究将遗传毒性致癌物乙基亚硝基脲(ENU)作用于雄性转基因小鼠,研究其对精子形态的影响。选用6-8周龄F1代xy1E-ICR转基因雄性小鼠,按给药方式的不同,分两组将ENU腹腔内注射染毒xy1E-ICR转基因小鼠,第一组小鼠给予1/10LD50(49mg/kg.bw)的ENU,连续5天,最后一次给药后,分别于24小时,48小时,72小时,1周,2周,3周处死小鼠。第二组为… 相似文献
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为研究HBV诱发肝病的分子机制,建立了含2个HBV全基因组DNA的复制型转基因小鼠模型。经反复鉴定筛选,最后保留了3个品系(17、21、25)以供分析研究。在传代过程中(G_0代到G_4代),外源基因是按孟德尔规律稳定遗传的,并在G_2代时获得了外源基因纯合子的个体。同时在传代过程中,HBV DNA在血清中一直都稳定地出现。整合阳性小鼠的血清中能测出HBV DNA的比例高达94%(102/108),因此先测血清中HBV DNA的存在,反过来可对转基因小鼠作出可靠的筛选。收集92只G_2、G_3代整合阳性小鼠(12~20周龄)血清45ml,免疫负染处理 相似文献
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结合农业开发控制血吸虫病流行效果观察 总被引:1,自引:1,他引:0
我们选择潜江市高场原种场甘家塔(包括保安、联丰2个村)作为试区.采用结合农业综合开发的水利化、田园化、电气化和初步机械化(以下简称“四化”建设)以及改造低产田、改种水旱轮作、改建自来水、改建沼气池(以下简称“四改”建设),开展了消灭钉螺和控制传染源的防制措施.经过3年(1991—1993年)的实施,取得了较好的效果. 相似文献
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xylE 转基因小鼠突变检测系统的建立 总被引:3,自引:0,他引:3
为了验证xylE转基因小鼠能否用于体内基因突变检测,首先对从小鼠体内回收目的质粒的影响因素(电压,基因组DNA浓度和T4连接酶浓度)进行了研究,结果发现用HindⅢ酶切后的0.5μg组织DNA在400μL反应体系中以0.3UT4连接酶连接后,以16kV,200Ω,25μF的参数用电穿孔法转化大肠杆菌DH10B菌株是回收目的质粒效率最高的方法.在此基础上观察了致突变剂n-甲基-n′-硝基-n-亚硝基胍(MNNG)对转基因小鼠(ip10mgkg-1d-1,连续4d)外周血正染红细胞(NCE)的微核率和肝组织中xylE基因的自发和诱发突变率,并对突变的xylE基因进行序列分析,结果MNNG使外周血NCE的微核率从(2.20±1.48)‰上升为(6.80±2.28)‰(P<0.01),xylE基因的突变率从小于1/22843增至4/18641,表明MNNG可诱发转基因小鼠NCE微核率和肝组织中xylE基因突变率显著升高.序列分析显示MNNG诱发的xylE基因突变主要是单碱基缺失.上述结果表明xylE转基因小鼠是检测体内基因突变的有效模型. 相似文献
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乙基亚硝基脲诱导转基因小鼠基因突变的研究 总被引:2,自引:2,他引:0
[目的 ]用乙基亚硝基脲 (ENU)进一步验证携带xylE基因的转基因小鼠在体内基因突变研究中的应用价值。 [方法 ]用ENU对转基因小鼠进行诱变处理 (i.p .5 0mg/(kg·d) ,连续 5d)后 ,从脾脏组织DNA中回收带有靶基因xylE的pESnx质粒 ,通过电穿孔法转化大肠杆菌 ,筛选突变体 ,检测突变率 ,并对突变靶基因进行测序分析以确定突变类型。 [结果 ] (1)ENU诱发转基因小鼠脾脏组织xylE基因的突变率为 1 2 48× 10 -4 ,显著高于自发突变率 ;(2 )ENU诱发基因突变的类型包括碱基的颠换、转换以及由于碱基的缺失或插入所引起的移码突变。 [结论 ]该转基因小鼠是检测体内基因突变的一种有效的动物模型。 相似文献
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