高浓度葡萄糖对小鼠表皮干细胞增殖的影响

目的 探讨高浓度葡萄糖对小鼠表皮干细胞增殖的影响.方法 利用Ⅳ型胶原的快速黏附法分离培养小鼠表皮干细胞,观察其形态学;通过免疫荧光法检测表皮干细胞标志物β1整合素和K19来鉴定表皮干细胞;将小鼠表皮干细胞分别放在葡萄糖浓度为5.6、15和30mmol/L的培养基里培养;MTT法检测细胞增殖情况,免疫印迹法检测细胞凋亡蛋白Bax和抗凋亡蛋白Bcl-2的蛋白表达水平.结果 体外培养的小鼠表皮干细胞呈克隆样生长,增殖速度较快,细胞形态呈铺路石样,边缘细胞呈梭形,细胞核质比较大;免疫荧光法检测到培养的小鼠表皮干细胞β1整合素和K19呈阳性表达且阳性表达率均为100％;MTT法检测到与对照组（5.6mmol/L浓度葡萄糖）相比,15mmol/L浓度葡萄糖刺激72h后检测到细胞增殖速度无明显改变,而30mmol/L浓度葡萄糖刺激24、48和72h后检测到细胞增殖速度降低,差异有统计学意义（P＜0.05）.Western blot法检测到与对照组相比,30mmol/L浓度葡萄糖刺激48h后凋亡蛋白Bax的蛋白表达量明显增加而抗凋亡蛋白Bcl-2蛋白表达水平明显降低（P＜0.05）.结论 本研究结果表明较高浓度（30mmol/L）葡萄糖可以明显抑制小鼠表皮干细胞的增殖,从干细胞角度进一步为糖尿病创面难愈的原因提供了实验室依据.     

HLA-A2限制性CTL表位HPV18E7_(7-15)分子修饰的实验研究

目的对人类白细胞抗原A2分子(HLA-A2)限制性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)表位HPV18E77-15进行氨基酸置换修饰,并探讨修饰后多肽的免疫原性。方法根据量化模体方案,比较置换后的多肽与HLA-A2分子的结合系数,采用标准Fmoc方案合成并纯化多肽、细胞毒实验(51Cr释放法),观察多肽是否能够诱导特异性CTLs。结果修饰肽TLQDIVLHV符合HLA-A2分子限制性细胞毒性T细胞的表位要求,具有特异性细胞毒性T细胞诱导活性。结论修饰肽TLQDIVLHV具有更好的结合力和较强的抗原性,可以作为高危型人乳头瘤病毒(HPV)感染治疗性肽疫苗分子设计的候选表位。     

尖锐湿疣防治的免疫学研究进展

关于尖锐湿疣预防和治疗的免疫学研究,近年来多集中在患者的免疫学变化及其与发病和复发的关系、局部治疗与免疫调节剂的使用以及在预防方面着重研制有效疫苗等方面.     

盐酸非索非那定和卡介菌多糖核酸治疗慢性荨麻疹疗效观察

目的评价盐酸非索非那定片和卡介菌多糖核酸注射液治疗慢性荨麻疹的疗效。方法对照组40例单独使用盐酸非索非那定片口服,60mg/次,2次/d,试验组40例在此基础上加用卡介菌多糖核酸注射液1.0 mg,隔日1次肌内注射,2周1个疗程,共3个疗程。结果共完成病例74例,试验组38例,对照组36例。试验组有效率89.5%,对照组有效率69.4%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论盐酸非索非那定片治疗慢性特发性荨麻疹有效,联合应用卡介菌多糖核酸注射液治疗可提高慢性特发性荨麻疹的疗效,减少复发率。     

重组原核表达载体pGEX-4T-1-eIF5A的构建及表达

目的构建人eIF5A基因的融合表达载体并在大肠杆菌中诱导表达pGEX-4T-1-eIF5A融合蛋白。方法以pCMV6-XL4-eIF5A作为模板,经PCR技术扩增目的片段,将获得的目的片段重组到原核表达载体pGEX-4T-1上,经酶切鉴定、DNA测序检测插入序列的正确性。将测序正确的重组表达质粒pGEX-4T-1-eIF5A转化到E.coliBL21内,经IPTG诱导后,GSTpull-down后SDS-PAGE电泳分析以及Western blot检测人eIF5A的表达。结果成功构建重组表达质粒pGEX-4T-1-eIF5A,经DNA测序证实插入序列与设计完全一致,GSTpull-down后电泳分析以及Westernblot结果说明大肠杆菌BL21诱导后表达出人eIF5A的glutathioneS-transferase(GST)融合蛋白。功能研究初步证明重组eIF5A在细胞增殖过程中发挥重要作用。结论构建成功的重组原核表达载体能在E.coliBL21内表达eIF5A的GST融合蛋白,为进一步研究人eIF5A蛋白的结构和生理功能如促进创伤修复提供帮助。     

药疹发病机制研究概述

药疹(drug eruption)是皮肤科的常见病、多发病。近年来,随着新药的不断开发和应用,药疹的发病率有逐年增加的趋势。因此,掌握药疹的发病机制,对临床诊断、治疗及预防药疹的发生至关重要。1病毒感染与药疹近几年,病毒感染与药疹成为药疹发病机制研究的一个热点。资料显示,多种病毒,如EB病毒(EBV)、人疱疹病毒6     

妇产科临床技能模拟训练实验室化的研究与思考

由于受到医疗环境、教学设施和方法、学习积极性等诸多因素的影响,如何提高实习医生的临床操作技能,一直是一临床带教工作的难点。必须有效避免妇产科临床带教中的高风险和潜在的医疗隐患、紧张的医患关系和相关法律的限制因素。本研究在见习和实习过程中,采用常见操作培训实验室化的途径,探索一套较为完善的、强化实习医生操作技能的教学手段,有望给临床带教中解决相关问题提供较为合理的可行性。     

HPV18E7抗原B细胞表位的鉴定

目的：鉴定人乳头瘤病毒18型早期蛋白E7的B细胞优势表位的免疫原性。方法：根据亲水性方案、柔韧性方案、抗原指数方案及表面可能性方案预测分析抗原可能的B细胞优势表位肽,并探讨合成肽的免疫效果。结果：HPV18E715-22（LEPQNEIP）,E729-44（EQLSDSEEENDEIDGV）,E751-59（ARRAEPQRH）是可能的B细胞优势表位,其中,E729-44和E751-59可明显诱导小鼠血清抗体滴度升高。结论：HPV18E729-44具有较强的免疫原性,为E7抗原B细胞优势表位。     

氟芬那酸丁酯软膏治疗儿童特应性皮炎的临床疗效观察

目的评价氟芬那酸丁酯软膏联合肤舒止痒膏外用治疗儿童特应性皮炎的临床疗效和安全性。方法将皮肤科门诊自2010年7月q012年6月的儿童特应性皮炎患者122例,皮疹无明显糜烂、渗出和结痂。符合Williams所制定的AD诊断标准。随机分为治疗组和对照组,每组61例。治疗组患者联合应用氟芬那酸丁酯软膏和肤舒止痒膏,对照组外采用糠酸莫米松软膏涂抹皮损处,临床观察疗程为2周。所有病例在治疗结束后均进行SCORAD评分和有效率的评价。结果男性患者74例,女性患者48例,年龄2～7周岁,病程1月～7年;治疗前,治疗组及对照组皮疹积分无显著性差异,分别为12．44±2．31和11．98±3．12;治疗后,治疗组皮疹积分（5．13±3．47）显著低于对照组（7．72±4．08）,两者相比差异有统计学意义（P〈0．01）。治疗组患者症状的SCO—RAD评分总积分为8．10±3．35,显著低于对照组患者的11．20±3．97,（P〈0．01）;治疗前,治疗组及对照组瘙痒积分无显著性差异,分别为6．59±1．74和6．26±1．86;治疗后,治疗组瘙痒积分（2．97±1．01）略低于对照组（3．48±1．27）,但两者相比差异无统计学意义（P〉0．05）;治疗组患者的有效率为49．18％,明显高于对照组患者的24．59％,（P〈0．01）。2组患者均未出现各种药物相关的临床不良反应。结论运用氟芬那酸丁酯软膏联合肤舒止痒膏治疗儿童特应性皮炎,安全性较高,治疗效果较为明确,适合在临床上广泛运用。