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K_(562)和L_(210)耐高三尖杉酯碱细胞系的建立及其耐药机制的初步研究 总被引:1,自引:0,他引:1
通过逐渐递增高三尖杉酯碱(HHT)剂量的方法,分别克隆筛选出两株耐HHT16.7和13.4倍的K562和L1210白血病细胞系。各命名为K562HHT和L1210HHT。二者对阿霉素、长春新碱、柔红霉索和马法兰等抗肿瘸药物均呈不同程度的交叉耐药。斑点杂交的结果表明二者的多药耐药基因(MDR-1)表达明显增强,且用MDR-1基因表达产物P170糖蛋白特异性的JSB-1单克隆抗体检测K562HHT细胞,结果呈强阳件反应,而敏感株为阴性。此外,二者的谷胱甘肽-S-转移酶(GST)α和π基因mRNA水平均有提高,而GSTμ无明显改变。 相似文献
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人类白血病耐药细胞系K562/VCRmdrl及GST表达的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
建立了一种高度敏感、特异性强并能定量的逆转录/多聚酶链反应(RT/PCR)检测mdrlmRNA的方法,用该法研究K562/S及K562/VCR细胞系mdrl基因表达。结果显示K562/VCR有较高水平mdrl基因表达(0.86),而K562/S未检测到表达。此外,利用酶学方法和点杂交方法在蛋白质和mRNA水平上检测了K562/S和K562/VCR中谷胱甘肽S转移酶(GST)活性及其基因表达,发现K562/VCR中GST活性明显高于K562/S(P<0.005),且该种活性的增高是由GSTπ、GSTμ过度表达引起。 相似文献
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一株耐阿霉素小鼠白血病L1210细胞系的建立及耐药机制的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
肿瘤细胞耐药是肿瘤病人治疗失败的主要原因。通过连续递增阿霉素浓度的方法,筛选出一株对阿霉素的耐药性增高91.2倍的小鼠白血病L1210细胞系(L1210/DOX)。该细胞与L1210敏感细胞的增殖速度相似,倍增时间分别为15和15.5h。电子显微镜结果显示L1210/DOX细胞的形状和大小仍保持典型的白血病细胞态,与敏感株相似。该耐药细胞系与高三尖杉酯碱和长春新碱有交叉耐药,其半数抑制浓度(IC_(50))分别为敏感株的31.4和33.4倍,但对烷化剂马法兰无交叉耐药,呈多药耐药性。细胞内药物浓度检测的结果为阿霉素在L1210/DOX细胞内蓄积浓度仅为敏感细胞的9%。斑点杂交的结果显示L1210/DOX的多药耐药基因(MDR-1)mRNA水平显著高于敏感株。然而,二者的谷胱甘肽S-转移酶活性无显著差异。以上结果提示MDR-1基因的过度表达在L1210/DOX细胞耐药中起着重要作用;L1210/DOX细胞可经DBA/2小鼠传代,将成为体内耐药的小鼠模型。 相似文献
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顾孔书 《国际输血及血液学杂志》1985,(4)
1976年血液学国际标准化委员会(以下简称ICSH)成立了一个染色和染色方法专家小组。该小组负责提出血和骨髓片罗曼诺夫斯基染色法的标准化方法。小组成员几次会晤,同时开展各实验室之间的协作研究。自1979年以来,他们分别发表了不少文章,证实了天青E和曙红Y两种染料能充分显示罗曼诺夫斯基染色的特征及影响染色的各种因素。本文叙述的“ICSH”标准化建议是根据专家小组和其他同行专家们(包括欧洲经济委员会参比局专家组)所做工作。罗曼诺夫斯基染色对造血细胞和其他种类细胞的形态学鉴定非常重要。 相似文献
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阿霉素诱导的人白血病细胞系K562/A02多药抗药性(英文) 总被引:20,自引:0,他引:20
目的:研究白血病细胞多药耐药发生的机制. 方法:用逐步增加培养基中阿霉素(Dox)浓度的方法,诱导出一株耐Dox的人白血病细胞系K562/A02.用[~3H]TdR参入法测定IC_(50),HPLC法测定细胞内药物浓度,免疫组织化学法检测P-糖蛋白的表达,RT-PCR法测定mdr1基因表达,点杂交测定基因组中mdr1DNA和拓扑异构酶Ⅱ(TopⅡ)基因表达,CDNB法测定谷胱甘肽-S-转移酶(GST)活性. 结果:K562/A02对Dox、HHT、Dau、VCR、m-AMSA、VP-16具有较强的交叉耐药性,而对Ara-C耐药较弱,对5-FU、Cis和MTX不交叉耐药,表现出典型的多药耐药表型.K562/A02细胞内药物浓度明显低于K562细胞,P-170阳性表达.K562/A02细胞中MDR1基因拷贝数与K562的无差异,但mdr1mRNA高表达.TopⅡ的mRNA水平低于K562,GST的活性增高. 结论:白血病细胞多药耐药的机制与mdr1基因表达密切相关,也与TopⅡ和GST有关. 相似文献
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