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1.
目的:探讨分选卵巢癌细胞株SKOV3中的侧群(side population,SP)细胞的荧光染料Hoechst33342的最佳染色浓度及SKOV3的最适细胞密度.方法:制备SKOV3细胞悬液,以荧光染料Hoechst33342和7-AAD染色,维拉帕米拮抗对照,选择不同浓度的Hoechst33342(2.5,3,4,5,6 mg/L)孵育1×106个/mL SKOV3细胞90 min,流式细胞仪检测SP细胞比例及活细胞比例;选取不同细胞密度的SKOV3细胞悬液(6×105,7×105,8×105,9×105,1×106个/mL),3 mg/L的Hoechst33342孵育90 min,流式细胞仪检测SP细胞比例及活细胞比例.结果:通过Hoechst33342蓝光和红光双参数图,SP细胞位于左下角两种荧光均很弱的区域.Hoechst33342浓度不变时,SP细胞比例随细胞密度的增加而升高;SKOV3细胞密度不变时,SP细胞比例及细胞活性随hoechst33342浓度升高而降低.卵巢癌SKOV3细胞株在细胞密度为8×105个/mL,加入终浓度为3 mg/L的Hoechst33342,37℃水浴90 min,为最佳染色条件,此时SP细胞比例为(1.12±0.104)%,且细胞保持良好的活性.结论:人卵巢癌细胞株SKOV3中存在SP细胞,Hoechst33342浓度及SKOV3细胞密度是影响SP细胞比例及细胞活性的重要因素. 相似文献
2.
目的在长期护理保险制度下构建失能老人多平台综合延续护理模式,并探究该模式对失能老人自理能力和心理健康水平的影响。方法选取该院出院的失能老人168例,建立延续性护理技术服务档案数据库。根据信封法随机分为对照组(87例)和干预组(81例)。对照组仅接受常规出院健康知识宣教,干预组在此基础上增加基于多平台协作的综合延续护理。比较失能老人的自理能力和心理水平。结果干预组干预后各时间点的自理能力得分和心理评分均有明显提高,且得分均高于同期对照组,差异有统计学意义(均P<0.05)。结论长期护理保险制度下构建的失能老人多平台综合延续护理模式能够改善失能老人的自理能力和心理健康水平。 相似文献
3.
4.
垂体腺瘤中CD147、LN-R基因蛋白的表达与侵袭性的关系 总被引:1,自引:0,他引:1
目的探讨CD147、LN-R的表达与侵袭性垂体腺瘤的关系。方法用免疫组织化学方法对60例垂体瘤患者组织标本CD147、LN-R的表达进行检测。免疫组化结果用半定量的方法进行分析。结果60例垂体瘤患者中,32例女性,28例男性。其中,30例为侵袭性垂体腺瘤,30例为非侵袭性垂体腺瘤。免疫组化显示侵袭性垂体腺瘤的CD147、LN-R的表达明显高于非侵袭性垂体腺瘤(P〈0.01)。结论CD147、LN-R的高表达与垂体腺瘤的侵袭性密切相关。CD147、LN-R可以作为判定垂体腺瘤侵袭性的有效指标。 相似文献
5.
乳腺癌c-erbB-2、bel-2和nm23蛋白的表达及其意义 总被引:1,自引:0,他引:1
乳腺癌是女性常见的恶性肿瘤,其发病率有逐年上升的趋势^[1]。我们应用免疫组化方法研究了c-erbB-2、bcl-2和nm23蛋白在乳腺癌中的表达,对其临床应用价值进行探讨。 相似文献
6.
人宫颈癌组织中CK17和P63蛋白的表达及意义 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:研究宫颈储备细胞标记物CK17及P63蛋白在人宫颈癌组织中的表达情况,判定其成为宫颈癌干细胞标记物的可能性。方法:采用免疫组织化学染色法检测55例人宫颈鳞状细胞癌组织及20例正常人宫颈组织中CK17及P63蛋白的表达情况。结果:① CK17蛋白表达于正常宫颈组织鳞柱交接的储备细胞胞浆;在宫颈癌组织中,CK17蛋白表达于部分宫颈癌细胞胞浆,表达部位主要位于瘤栓中、肿瘤浸润的前沿及边缘部位;在恶性度较高的宫颈癌中,CK17蛋白表达率明显高于恶性度较低的宫颈癌组(P<0.05);在化疗后的标本组织中,CK17蛋白的表达率也较化疗前明显升高(P<0.05)。②P63蛋白表达于正常宫颈组织鳞柱交接的储备细胞的胞核中;在宫颈癌组织中,几乎所有的宫颈癌细胞均表达P63蛋白。结论:CK17蛋白在伴有转移、浸润、低分化及化疗后的病例中表达的阳性率明显升高,且趋于表达在瘤栓中、肿瘤浸润的前沿及边缘部位,可能是宫颈癌干细胞的标记物;P63蛋白几乎表达于所有宫颈癌细胞中,表达无规律性,可能不是宫颈癌干细胞的标记物。 相似文献
7.
目的:检测高转移潜能肝癌HCCLM3细胞株中侧群(side population,SP)细胞比例,分选SP细胞并探讨其生物学特性。方法:4种肝癌细胞株的转移潜能大小依次为HCCLM3>MHCC97H>MHCC97L>Huh7,分别予以荧光染料Hoechst33342染色,以加入维拉帕米的拮抗组为对照,流式细胞术检测SP细胞比例;从HCCLM3细胞中分选SP细胞和主群(main population,MP)细胞,采用悬浮球培养、Transwell侵袭实验及裸鼠成瘤实验判断HCCLM3 SP细胞是否具备肿瘤干细胞生物学特性;RT-PCR检测SP及MP细胞中干细胞相关基因的表达。结果:HCCLM3细胞中SP细胞比例为(16.9±1.8)%,显著多于MHCC97H、MHCC97L、Huh7中SP细胞比例[(8.4±0.7)%、(4.6±0.5)%、(1.0±0.2)%,均P<0.05]。HCCLM3细胞中,SP细胞悬浮球形成明显高于MP细胞[(25.3±5.1)%vs(11.2±2.6)%,P<0.05],SP细胞的侵袭能力显著高于MP细胞(P<0.05),SP细胞的裸鼠皮下成瘤能力也明显高于MP细胞。HCCLM3细胞的SP细胞中干细胞相关基因ABCG2、CD13、CD44、Nanog、Sox2及Klf4 mRNA平均表达水平分别是MP细胞的5.64、2.26、2.10、3.78、2.37、2.92倍(均P<0.05)。结论:肝癌HCCLM3细胞的SP细胞中富集了肝癌干细胞,这可能与其较高的转移潜能有关。 相似文献
8.
目的:研究二代测序技术(NGS)检测深圳地区随机健康无关汉族人群HLA-DRB1、DQB1、DQA1、DRB3、DRB4、DRB5、DPA1、DPB1等位基因多态性的精确性,探讨HLA-DRB1等位基因丢失的原因及室内关键质控体系建立策略。方法:采用Mi Seq DxTM NGS平台对1 012例样本完成HLA-II类等位基因分型。对质控体系软件提示的疑难样本和HLA-DRB1纯合子样本采用PCR-SSOP法或PCR-SBT法进行确认。结果:检出HLA-DRB1、DRB3、DRB4、DRB5、DQA1、DQB1、DPA1、DPB1等位基因分别有45、7、5、7、17、21、10、27种。常见等位基因(频率>10%)有HLA-DRB1*09:01(17.09%)、15:01(10.72%);DRB3*02:02(25.99%)、03:01(10.18%);DRB4*01:03(36.46%);DRB5*01:01(15.42%);DQA1*01:02(20.01%)、03:02(17.19%);DQB1*03:01(19.47%)、03:03(17.98%)、05:02(11.66... 相似文献
9.
10.
目的:分析卵巢癌细胞株(SKOV3)与卵巢癌淋巴结定向高转移细胞株(SKOV3-PM4)分泌蛋白的差异,寻找与卵巢癌淋巴定向转移密切相关的潜在诊断分子标志。方法:分别收集SKOV3与SKOV3-PM4培养上清,利用双向凝胶电泳(2-DE)及基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI_T0F-MS/MS)技术筛选及鉴定差异表达的蛋白点,对其进行生物学分析后采用蛋白质印迹法验证挑选目标蛋白在细胞分泌蛋白中的表达情况。结果:二维凝胶电泳显示,SK-OV3细胞分泌蛋白质点数约为569±156,SKOV3-PM4细胞分泌蛋白质点数约为598±175。选取差异较大的7个差异蛋白点进行MS+MS/MS质谱鉴定,分别为乙二醛酶1(GLO1)、翻译后调节肿瘤蛋白(TPTC)、二磷酸核苷激酶B(ND-PK-B)、膜联蛋白(ANXA1)、热休克蛋白27(HSP)、过氧化物氧化还原(PRDX1)和磷脂酰乙醇胺结合蛋白Ⅰ(PEBP-Ⅰ)。挑选NDPK-B、ANXA1和HSP蛋白经蛋白质印迹法验证发现,SKOV3-PM4细胞中ANXA1和HSP27表达高于SKOV3细胞,而NDPK-B表达低于SKOV3细胞。与质谱分析的结果基本一致。结论:在卵巢癌细胞与卵巢癌淋巴结定向高转移细胞之间分泌蛋白存在很大的差异,其中已被鉴定的ANXA1和HSP27与卵巢癌淋巴结转移密切相关,有望成为诊断或预测卵巢癌淋巴结转移患者血清检测的标志。 相似文献