表没食子儿茶素没食子酸酯通过上调LDLr和LRP1表达促进Aβ淀粉样蛋白清除作用

【立论依据】 人体自身清除Aβ主要是通过中枢清除和外周清除两种方式,中枢清除Aβ的方式主要是通过一些受体或者转运蛋白等介导Aβ进入小胶质细胞、星形胶质细胞或者神经元进行降解,或通过脑血管中的受体介导Aβ由脑内泵到外周血液循环进行清除等。外周清除Aβ主要通过外周血循环中一些蛋白对中枢的Aβ起到“漏槽效应”。体内Aβ的清除与低密度脂蛋白受体(LDLR)和低密度脂蛋白受体相关蛋白1(LRP1)有关,人为改变其表达可能是潜在的治疗阿尔茨海默病(Alzheimer's Disease,AD)的新途径。 【设计思路】 在外周血中Aβ与可溶性LRP1结合形成的复合物随血循环到达肝脏清除, 促进Aβ从中枢到外周的转运并有效地防止了游离的Aβ再次进入中枢,故肝脏中的LRP1介导着Aβ的全身系统性清除。LDLR在Aβ清除的过程中也发挥了重要的作用,在LDLR缺陷的APP转基因小鼠大脑Aβ的沉积显著性增加;而在LDLR高表达的APP转基因小鼠大脑Aβ的沉积显著减少;另外转基因小鼠中LDLR表达升高两倍足以使脑内Aβ减少50%以上。这些证据提示调控Aβ清除相关受体或蛋白的表达可能对AD起到疾病修饰的作用。表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)属于茶多酚,是绿茶中的主要活性成分之一。我们假设EGCG等多酚类物质对外周Aβ清除有效,并探究LDLR和LRP1的表达是否受多酚物质的影响,同时探究外周清除途径中多酚类物质对肝细胞摄取Aβ的影响。若多酚类物质能够提高LDLR或LRP1的表达水平,诱导Aβ自身清除,则提示多酚类物质在AD治疗中存在潜在的应用前景,LDLR或LRP1也将是有效的促进Aβ清除的人为干预途径。 【实验内容】 (1)EGCG对肝细胞LDLR和LRP1的mRNA和蛋白质表达水平的影响;(2)EGCG对肝细胞Aβ摄取和清除的影响:①高内涵定量检测对Aβ摄取的影响;②ELISA检测对Aβ清除的影响。 【材料】 98%EGCG,Chang liver细胞,胎牛血清等。 【可行性】 通过观察经EGCG处理的细胞对Aβ的摄取从细胞水平来探究其作用,再从分子观察LDLR和LRP1的表达变化来探究EGCG对LDLR和LRP1自身清除途径的影响。理论上具有较好的可行性。 【创新性】 (1)选用中国历史悠久的绿茶当中的提取物EGCG,廉价易得,在中国具有广泛的应用前景。(2)选用多组织来源细胞,机制探究全面。     

超声引导经皮经肝胆囊穿刺置管引流技术的临床应用

超声引导经皮经肝胆囊穿刺置管引流（PT-GCD）是简单而有效的胆道持续减压引流方法。我们于1997年7月至2006年7月间共对34例患者应用PTGCD，适应证涉及老年人重症胆囊炎、晚期壶腹部恶性肿瘤致胆道梗阻、胆源性胰腺炎及非胆道大手术后并发重症胆囊炎等，取得较好的效果，现报道如下。     

五种生长因子mRNA在兔角膜中的表达

目的 了解ＥＧＦ、ＴＧＦ－α、ｂＦＧＦ、ＴＧＦ－β１和ＰＤＧＦ在兔角膜上皮和基质中的表达情况,探讨其在角膜伤口愈合中的作用。方法 应用原位核酸分子杂交方法检测兔角膜上皮和基质中ＥＧＦ、ＴＧＦ－α、ｂＦＧＦ、ＴＧＦ－β１和ＰＤＧＦ ｍＲＮＡＲ的表达。结果 ＥＧＦ、ＴＧＦ－α和ＰＤＧＦ ｍＲＮＡ仅在正常角膜上此细胞层表达,基质中未见表达;ｂＦＧＦ和ＴＧＦ－β１ ｍＲＮＡ在正常角膜伤口和基质中均有表达。     

四川省50岁及以上妇女骨矿含量的影响因素分析

[目的]探讨影响四川省50岁及以上妇女骨矿含量(BMC)的因素,为建立以BMC为指标的骨质疏松筛检和诊断工具提供依据. [方法]利用"九五"攻关四川省数据和我国"骨密度参考数据库"中50岁及以上妇女的数据,通过多元线性回归逐步筛选影响BMC的主要因素. [结果]影响BMC的主要因素包括体重、年龄,其次为身高、绝经年龄与是否脆性骨折. [结论]可以利用影响四川省妇女BMC的主要因素建立相应的筛检或诊断工具,从而对四川省妇女进行骨质疏松的筛检或诊断.     

大鼠肝细胞Ⅰ，Ⅲ型前胶原基因表达及PDGF的影响

目的观察大鼠肝细胞Ⅰ，Ⅲ型前胶原基因的表达及ＰＤＧＦ对其表达的影响．方法应用原位杂交技术检测分离培养的ＳＤ大鼠肝细胞（ｎ＝３０）内Ⅰ，Ⅲ型前胶原基因的表达．同时观察１０μｇ／Ｌ（ｎ＝３０）和３０μｇ／Ｌ（ｎ＝３０）ＰＤＧＦ促进前胶原基因表达的作用．测定基因表达颗粒总面积占细胞总面积的百分比，并作比较分析．结果无论正常肝细胞或是在两种浓度的ＰＤＧＦ存在时，肝细胞内均可见到Ⅰ，Ⅲ型前胶原基因的表达．正常肝细胞Ⅰ，Ⅲ型前胶原基因表达面积的百分比（％）为７７±１９和７５±２１；加１０μｇ／ＬＰＤＧＦ后为１１５±１９和１１２±１０，而加３０μｇ／Ｌ后为１５２±３４及１８１±２８，且在后者中表达明显增强（Ｐ＜００５及Ｐ＜００１）．结论ＰＤＧＦ在转录水平上促进肝细胞胶原的合成．     

人原发胃癌、裸鼠人胃癌移植瘤及人胃癌细胞株中β-葡萄糖醛酸酶及神经氨酸苷酸活力比较

β-葡萄糖醛酸酶(β-G)主要存在于溶酶体,细胞癌变时溶酶体增生肥大,β-G合成增加,水解蛋白多糖破坏间质,促进癌细胞浸润生长和转移。神经氨酸苷酶(NANase)是糖蛋白、糖脂代谢的重要酶,细胞癌变时,细胞膜糖蛋白、糖脂所结合的寡糖链结构和成份发生改变,NANase活力亦相应发生变化。胃癌患者体液和红细胞膜上β-G及NANase活力变化情况已有报道结果表明上述酶活力与胃癌癌变关系密切,本文对人胃癌组织、人胃癌移植瘤及人胃癌细胞株中酶活力的变化进行探讨。     

地高辛标记寡核苷酸探针原位杂交检测大鼠移植静脉TGF－βmRNA表达

平滑肌细胞过度增殖是导致移植血管再狭窄的关键，其发病机理迄今尚未完全明确。分于生物学的迅猛发展为深入研究其分子机理创造了条件。组织切片原位杂交即是重要手段之一。传统的放射性标记探针由于半衰期短，实验周期长，且具辐射损伤等，限制了其应用。本实验利用地高辛标记寡核苷酸探针原位杂交检测大白鼠自体移植静脉ＴＧＦ－βｍＲＮＡ表达，取得满意效果。     

Influence of hemodialysis membrane on gene expression and plasma levels of interleukin-1β,tumor necrosis factor-α and interleukin-6

ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏａｓｅｓｓｔｈｅｄｉｆｅｒｅｎｔｍｅｍｂｒａｎｅｂｉｏｃｏｍｐａｔｉｂｉｌｉｔｙｏｎｈｅｍｏｄｉａｌｙｓｉｓ．ＭｅｔｈｏｄｓＲＴＰＣＲ，ｃｅｌｉｎｓｉｔｕｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎａｎｄＥＬＩＳＡｗｅｒｅｕｓｅｄｔｏｍｅａｓ...     

双能量CT检查术前预测甲状腺乳头状癌BRAFV600E基因突变的研究

目的探讨双能量CT检查在术前预测甲状腺乳头状癌（PTC）患者BRAFV600E突变的应用价值。方法回顾2017年5月至2021年10月丽水市中心医院经手术病理检查证实的213例PTC患者,术前均接受双能量CT增强检查。对所有患者的手术病理标本进行了BRAFV600E突变分析,并根据结果将患者分为BRAFV600E突变型和BRAFV600E野生型。使用多因素lo-gistic回归分析筛选出BRAFV600E突变的独立预测因子并构建联合模型。采用ROC曲线评估不同定量参数及联合模型的诊断效能,计算AUC、灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值和准确度。结果BRAFV600E突变型病灶最大径小于BRAFV600E野生型（P＜0.05）,而动脉期碘浓度（IC）、标准化碘浓度（NIC）、标准化有效原子序数（nZeff）和能谱曲线斜率（λHu）及静脉期NIC和λHu均高于BRAFV600E野生型（均P＜0.05）。多因素logistic回归分析显示,最大径、静脉期NIC及动脉期NIC、nZeff和λHu是BRAFV600E突变的独立预测因子,其中动脉期NIC诊断效能最高。联合上述参数构建的预测模型AUC、灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值和准确度分别为0.877、0.865、0.800、0.901、0.738、0.844。结论双能量CT检查对识别PTC患者术前BRAFV600E突变具有潜在的应用价值,可以在一定程度上指导个体化治疗。     

In situ localization of procollagen gene expression on cryosections of undecalcified fracture callus

Objective:To analyze the expression of procollagen gene in fracture callus,and to search for the technique of in situ hybridization for undecalcified skeletal tissue.Methods:In situ hybridization of procollagen gene expression was performed on the undecalcified cryosections of rat fracture callus at 7,14,and 28d.Results:The hybridization signals achieved were clear and easy to be localized with high specificity.On the 7th day,the expressions of pro α1(Ⅲ) in fibroblasts and some chondrocyte-like cells were dominant;and at the end of second week high expression of type-Ⅱ procollagen mRNA was observed in chondrocytes.At the end of fourth week,the cartilaginous callus was almost all replaced by woven bone tissue,and some type-I procollagen mRNA positive osteoblasts and hypertrophic chondrocytes were found scattering in the woven bone and remnants of cartilaginous callus.Conclusions:The modified method employed in this study is easier,quicker,and more sensitive with high specificity than the conventional technique for a situ hybridization of procollagen gene expression of decalcified rat fracture callus.The phenomenon of shared phenotype expression,which was demonstrated among cells engaged in fracture healing,indicates an important approach to reveal the mechanism of the origin,differentiation,and orientation of cells.