Sirt1在急性炎症状态下糖尿病小鼠肾损伤中的作用

目的 探究Sirt1在急性炎症状态下糖尿病小鼠肾损伤中的作用及分子机制。方法选择SPF级C57BL/6J雄性小鼠40只,8周龄,体重20～25 g。采用随机数字表法将小鼠分为五组：对照组(C组)、糖尿病组(D组)、脂多糖(LPS)+糖尿病组(L组)、LPS+糖尿病+Sirt1阻断剂EX527组(E组)和LPS+糖尿病+Sirt1激动剂银杏黄酮苷元组(G组),每组8只。糖尿病小鼠模型制备成功后,L组腹腔注射LPS 10 mg/kg; E组在糖尿病小鼠给予LPS处理前1 h腹腔注射EX527 5 mg/kg(溶于DMSO 0.2 ml);G组在糖尿病小鼠给予LPS处理前1 h腹腔注射银杏黄酮苷元200 mg/kg(溶于DMSO 0.2 ml);C组和D组在相同时点腹腔注射2%DMSO 0.15 ml。收集24 h尿液测定24h尿量和24 h尿蛋白浓度,眼球取血检测血清肌酐(Scr)和尿素氮(BUN)浓度。取肾组织后采用ELISA法检测IL-1β、IL-18浓度,硝酸还原酶法检测一氧化氮(NO)含量,铁离子抗氧化能力法检测总抗氧能力(T-AOC),qPCR和Western blot法检测Si...     

负荷剂量右美托咪定致心动过缓的危险因素分析

<正>右美托咪定因具有镇静催眠、镇痛、抑制交感活性、无呼吸抑制和减少其他麻醉药物用量等优势而广泛运用于临床~([1]),但常导致窦性心动过缓等不良反应,有研究显示使用右美托咪定患者心动过缓发生率为14.2%,明显高于咪达唑仑和丙泊酚~([2])。近年来也有推荐剂量右美托咪定引起心跳骤停的报道~([3]),因此右美托咪定引起的相关不良反应越来越受到临床关注~([4])。本研究探究给予负荷剂量右美托咪定1 μg/kg 后心动过缓的发生情况,探讨给药后发生心动过缓的相关因     

右美托咪定致家兔窦性心动过缓模型中心脏窦房结Cx45和Cx31.9基因表达的变化

目的观察右美托咪定致家兔窦性心动过缓模型中心脏窦房结中缝隙连接基因蛋白Cx45和Cx31.9表达量的变化,探讨右美托咪定致心脏传导减慢的作用是否与缝隙连接基因蛋白的表达量改变有关。方法成年健康新西兰家兔48只,随机均分为三组,通过耳源静脉注射右美托咪定制备家兔窦性心动过缓模型。戊巴比妥钠基础麻醉后,迅速完成心电图、血压监测的基本操作。C组持续泵注生理盐水,D1组泵入右美托咪定10μg/kg负荷量10min,持续泵注量5μg·kg~(-1)·h~(-1)输入50min,D2组泵入右美托咪定60μg/kg负荷量10min,持续泵注量30μg·kg~(-1)·h~(-1)输入50min,观察结束后迅速开胸取出心脏准确分离心脏窦房结组织,通过免疫组化法检测Cx45、Cx31.9蛋白平均光密度,通过实时荧光定量法检测Cx45、Cx31.9基因相对表达量变化。结果 Cx45基因相对表达量D2组明显多于C、D1组(P0.05);蛋白平均光密度的改变与之一致;Cx31.9基因相对表达量D1组比C组显著增加(P0.05),D2组与C组、D1组与D2组差异无统计学意义,蛋白平均光密度的改变与之一致。结论右美托咪定使家兔窦房结低导电性缝隙连接基因蛋白Cx45、Cx31.9的表达增加,缝隙连接基因蛋白表达的变化是导致窦房结区的传导速度减慢原因之一。     

右美托咪定通过腺苷A1受体调节大鼠压力反射敏感性

目的观察腺苷A1受体在右美托咪定调节压力反射敏感性(baroreflex sensitivity,BRS)中的作用。方法健康成年雄性SD大鼠32只,体重240~280g,按随机数字表随机分为四组:对照组(C组)、选择性腺苷A1受体阻断剂组(P组)、右美托咪定组(D组)、选择性腺苷A1受体阻断剂+右美托咪定组(PD组),每组8只。C组泵注生理盐水40 ml·kg~(-1)·h~(-1)负荷量15 min,维持泵注10 ml·kg~(-1)·h~(-1);P组腹腔注射选择性腺苷A1受体阻断剂8-环戊基-1,3-二丙基黄嘌呤(DPCPX)1mg/kg,泵注同C组方案的生理盐水;D组右美托咪定负荷量100μg/kg,维持量100μg·kg~(-1)·h~(-1)持续泵注;PD组腹腔注射DPCPX 1mg/kg并泵注右美托咪定,泵注剂量同D组。采用苯肾上腺素升压法于泵注前(T_0)、泵注后60min(T_1)和泵注后120min(T_2)测定BRS。结果与T_0时比较,T_1和T_2时D组和PD组BRS明显升高(P0.05)。与C组和P组比较,T_1和T_2时D组和PD组BRS均明显升高(P0.05)。与D组比较,T_1和T_2时PD组BRS明显降低(P0.05)。结论右美托咪定可能通过腺苷A1受体增加大鼠BRS。     

骨形态发生蛋白-2信号通路在右美托咪定所致大鼠房室结缝隙连接蛋白表达中的作用

目的探讨骨形态发生蛋白-2(BMP-2)信号通路在右美托咪定所致窦性心动过缓大鼠心脏房室结中缝隙连接蛋白Cx30.2、Cx40和Cx45表达中的作用。方法成年健康雄性SD大鼠30只,按随机数字表法分为三组,每组10只。对照组(C组)通过股静脉持续泵注与实验组等体积的生理盐水;右美托咪定组(D组)给予右美托咪定负荷量120μg/kg于10 min内泵注完毕,持续泵注60μg·kg~(-1)·h~(-1)共120 min;右美托咪定+Noggin组(DN组)先通过腹腔注射BMP-2信号通路特异性抑制剂Noggin 75 ng/kg,余同D组。记录大鼠心动过缓发生情况(HR下降幅度基础值的30%、稳定30 min为模型制作成功)。观察结束后迅速开胸取出心脏准确分离房室结组织,采用Western blot法检测Cx30.2、Cx40、Cx45及BMP-2蛋白含量。结果 D组Cx30.2、Cx45、BMP-2蛋白含量明显高于C组(P0.05)。DN组Cx30.2、Cx45、BMP-2蛋白含量明显低于D组(P0.05)。D组Cx40蛋白含量明显低于C组(P0.05)。DN组Cx40蛋白含量明显高于D组(P0.05)。结论 BMP-2信号通路可能参与了右美托咪定所致窦性心动过缓模型大鼠房室结中缝隙连接蛋白表达的改变。     

右美托咪定对家兔压力反射敏感性的影响

目的 研究右美托咪定(dexmedetomidine,Dex)对家兔压力反射敏感性(baroreflex sensitivity,BRS)的影响,评估药物对迷走神经的张力影响.方法 健康新西兰大白兔24只按随机数字表法分为3组(每组8只):对照组(C组)、低剂量Dex组(D1组)和高剂量Dex组(D2组).C组持续泵注生理盐水;D1组Dex负荷量10 μg/kg,持续泵注量5μg·kg-1·h-1;D2组Dex负荷量60 μg/kg,持续泵注量30 μg·kg-1·h-1.于Dex给药前(T0)、给药后30 min(T1)和给药后60 min(T2)用血管活性药物法测定BRS值. 结果 D1组和D2组BRS值在T1、T2时高于T0时(P＜0.05),D1组BRS值T2时较T1时明显降低(P＜0.05).T1、T2时D1组和D2组BRS值较C组增高(P＜0.05),D2组BRS值较D1组增高(P＜0.05). 结论 Dex增加家兔的BRS,BRS的增高随药物剂量的增加而更显著及持久,说明Dex剂量依赖性地增加迷走神经张力.     

右美托咪定对健康自愿者窦房结功能的影响

目的:观察右美托咪定(Dex)对男性健康自愿者窦房结功能的影响,监测给药过程中心率变异性的变化,探讨自主神经均衡性改变在右美托咪定致心动过缓中的作用。方法:本研究采用交叉对照设计。健康男性志愿者11例,受试者先进入右美托咪定1.0μg/kg负荷量,持续泵注量0.5μg/(kg·h)(Ⅰ组)进行试验观察,在Ⅰ组发生最低心率<40次/min不进入下一剂量组的试验观察,8例受试者进入1.5μg/kg负荷量,持续泵注量0.75μg/(kg·h)(Ⅱ组)进行试验观察。于Dex静脉泵注前、Dex静脉泵注后(30±5)min经食管左心房调搏测定窦房结恢复时间(SNRT)、校正窦房结恢复时间(CSNRT)、窦房结总恢复时间(TRT);于Dex静脉泵注前(T0)、Dex静脉泵注后15~20 min(T1)、Dex静脉泵注后45~50 min(T2)通过数字化心电工作站监测给药过程中心率变异性时域指标(SDNN、RMSSD、PNN50)及频域指标(LFnorm、HFnorm、LF/HF)变化。结果 :(1)窦房结功能指标:泵注Dex前后比较两组R-R间期、SNRT、TRT均显著延长(P<0.01),Ⅱ组CSNRT也显著延长(P<0.01);Ⅱ组泵药后(30±5)min SNRT、CSNRT、TRT较Ⅰ组显著延长(P<0.01);(2)心率变异性指标:与T0比较,两组T1时点SDNN增加(P<0.05);两组T1、T2时点RMSSD、PNN50均显著增加(P<0.01);Ⅰ组T1、T2时点和Ⅱ组T1时点LFnorm降低,HFnorm升高,LF/HF均降低(P<0.05)。结论:临床推荐剂量的右美托咪定抑制窦房结的功能,随着药物浓度的增加对窦房结抑制作用更显著,自主神经失衡在右美托咪定致心动过缓中具有重要作用。     

右美托咪定对脓毒症小鼠急性肾损伤的影响

目的 探讨右美托咪定对脓毒症小鼠急性肾损伤的影响及与肾脏细胞焦亡的关系。
方法 健康清洁级ICR小鼠32只,雌雄各半,8~12周龄,体重20~25 g。采用随机数字表法将小鼠分为四组：对照组（C组）、脂多糖（LPS）组（L组）、LPS+右美托咪定组（LD组）和LPS+右美托咪定+阿替美唑组（LT组）,每组8只。L组、LD组和LT组腹腔注射LPS 400 μg/kg,8 h后腹腔注射LPS 10 mg/kg建立脓毒症急性肾损伤模型。L组于建模即刻、建模后0.5、2、2.5、4、4.5 h腹腔注射生理盐水0.5 ml;LD组于建模即刻、建模后2、4 h腹腔注射生理盐水0.5 ml,于建模后0.5、2.5、4.5 h分别腹腔注射右美托咪定40 μg/kg;LT组于建模即刻、建模后2、4 h腹腔注射阿替美唑750 μg/kg,于建模后0.5、2.5、4.5 h分别腹腔注射右美托咪定40 μg/kg;C组在各时点腹腔注射等量生理盐水。所有小鼠于建模后24 h麻醉处死。采用全自动生化分析仪检测血清肌酐（Scr）和尿素氮（BUN）浓度,化学发光法测量肾皮质细胞三磷酸腺苷(ATP)和血清ATP浓度,ELISA法检测肾组织IL-1β和IL-18浓度,qRT-PCR法检测肾组织caspase-11、泛连接蛋白1（pannexin-1）、P2X7 mRNA表达量,Western blot法检测肾组织caspase-11、pannexin-1、P2X7蛋白含量,HE染色法观察肾组织病理结构,TUNEL染色记录肾小管上皮细胞凋亡细胞数并计算细胞凋亡率。
结果 与C组比较,L组、LD组和LT组血清BUN、Scr、ATP浓度均明显升高（P<0.05）,肾皮质细胞ATP浓度明显降低（P<0.05）,肾组织IL-1β和IL-18浓度、肾组织caspase-11、pannexin-1、P2X7 mRNA表达量及蛋白含量均明显升高（P<0.05）,肾小管上皮细胞凋亡率明显升高（P<0.05）。与L组比较,LD组血清Scr、BUN、ATP浓度均明显降低（P<0.05）,肾皮质细胞ATP浓度明显升高（P<0.05）,肾组织IL-1β浓度、肾组织caspase-11、pannexin-1 mRNA表达量均明显降低（P<0.05）,肾小管上皮细胞凋亡率明显降低（P<0.05）;LD组和LT组肾组织IL-18浓度、肾组织caspase-11、pannexin-1蛋白含量、肾组织P2X7 mRNA表达量及蛋白含量均明显降低（P<0.05）。与LD组比较,LT组血清BUN、Scr、ATP浓度均明显升高（P<0.05）,肾皮质细胞ATP浓度明显降低（P<0.05）,肾组织IL-1β和IL-18浓度、肾组织caspase-11、pannexin-1、P2X7 mRNA表达量及蛋白含量均明显升高（P<0.05）,肾小管上皮细胞凋亡率明显升高（P<0.05）。
结论 右美托咪定减轻了LPS导致的脓毒症小鼠肾脏病理学损伤,降低肾组织IL-1β和IL-18浓度,降低肾小管上皮细胞凋亡率,可能通过非经典途径减轻了肾脏细胞焦亡。     

股骨干骨折合并同侧股骨颈骨折的诊断与手术治疗

目的探讨同侧股骨干、股骨颈骨折的临床特点、漏诊原因及治疗方法和疗效。方法回顾性分析2000年3月至2007年9月岳阳市二人民医院11例股骨干骨折合并同侧股骨颈骨折的临床资料,男8例,女3例;年龄25~57岁,平均32岁。受伤原因:交通伤7例,高处坠落伤4例。术前诊断5例,术中诊断3例,术后诊断3例。其中2例采用股骨重建髓内钉同时固定股骨干和股骨颈;2例采用动力髋(DHS)固定;1例采用空心钉固定股骨颈骨折,再行闭合复位逆行带锁髓内钉固定股骨干骨折;2例采用顺行带锁髓内钉(UFN)结合空心钉或克氏针固定;1例合并髁上骨折,采用股骨髁解剖板固定股骨干和股骨髁上骨折,空心钉固定股骨颈;3例采用动力加压钢板(LC-DCP)固定3~35d后发现股骨颈骨折,再行空心钉或克氏针固定。结果同侧股骨干、股骨颈骨折常难以做出正确诊断,股骨颈骨折漏诊率较高,本组患者漏诊率27.3%,股骨干骨折多为粉碎性骨折,股骨颈骨折多为无移位骨折,术后随访2~5年,平均3.3年,内固定治疗效果满意,骨折均达骨性愈合,无股骨头坏死,关节功能恢复好,Harris评分平均92分。结论对高能量损伤引起的股骨干骨折,要分析其受伤机制,仔细进行体格检查,常规拍摄髋关节X线平片,必要时行CT或MRI检查,骨折均应早期内固定手术治疗。     

右美托咪定致家兔窦性心动过缓模型中窦房结去甲肾上腺素、乙酰胆碱、毒蕈碱受体2及腺苷受体1的变化

目的 研究右美托咪定(dexmedetomidine,Dex)致家兔窦性心动过缓模型心脏窦房结中去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)、乙酰胆碱(acetylcholine,Ach)、毒蕈碱受体2(muscarinic receptors 2,M2)及腺苷受体1(adenosine receptors 1,A1)的变化,探讨其致心动过缓的机制. 方法 健康新西兰大白兔24只按随机数字表法分为3组(每组8只):对照组(C组)、低剂量Dex组(D1组)和高剂量Dex组(D2组).C组通过耳缘静脉持续泵注生理盐水;D1组Dex负荷量10 μg/kg泵注10min,持续泵注量5μg·kg-1h-1泵注50 min;D2组Dex负荷量60 μg/kg泵注10 min,持续泵注量30μg·kg-1·h-1泵注50 min.戊巴比妥钠基础麻醉后,迅速建立BP和ECG监测,3组实验过程中均于Dex注射前(T0)及Dex注射后15 min(T1)、30 min(T2)、60 min(T3)监测HR和MAP,Dex泵注结束后迅速开胸取出心脏,准确分离家窦房结组织,采用实时荧光定量法、免疫组化法、双抗体夹心法检测组织中NE、Ach、M2、A1. 结果 T0时点3组MAP、HR的基础值比较,差异无统计学意义(P＞0.05),T1、T2、T3时点D1组、D2组的MAP、HR均较C组低(P＜0.05),T1、T2、T3时点D2组的HR均较D1组低(P＜0.05).M2基因相对表达量3组间比较,差异无统计学意义(P＞0.05),A1基因相对表达量D2组比C组[(13±5)比(5±3)]、D1组[(13±5)比(6±4)]显著增加(P＜0.05);M2、A1蛋白平均光密度变化均为D2组比C组[(0.240±0.040)比(0.193±0.022),(0.290±0.043)比(0.185±0.017)]、D1组[(0.240±0.040)比(0.194±0.031),(0.290±0.043)比(0.202±0.022)]显著增加(P＜0.05).D1组、D2组NE比C组显著降低(P＜0.05),D1组与D2组NE比较,差异无统计学意义(P＞0.05);D2组的Ach比C组、D1组显著增高(P＜0.05). 结论 Dex使交感神经递质NE降低,迷走神经递质Ach仅在大剂量组显著增加,大剂量Dex直接兴奋迷走神经,M2、A1的变化在大剂量组呈显著上调趋势.