骨髓基质细胞促进永久性局灶性脑缺血大鼠脑室下区的神经发生

目的 探讨移植骨髓基质细胞(BMSCs)对永久性局灶性脑缺血大鼠脑室下区(SVZ)细胞增殖的影响及其增殖细胞类型分析. 方法制作永久性局灶性脑缺血大鼠模型,分为空白对照组(MCAO)、PBS对照组(MCAO PBS)和治疗组(MCAO BMSCs),每组动物再分为脑缺血后7d和14d亚组.空白对照组不予处理,PBS对照组在脑缺血后1d移植PBS,治疗组在脑缺血后1d移植BMSCs.用Zausinger六分法检测神经功能恢复情况;注射5-溴脱氧鸟嘧啶核苷(BrdU)标记SVZ的新增殖细胞,免疫荧光双重标记检测新增殖细胞的类型. 结果在脑缺血后7d和14d,与两个对照组相比,治疗组的神经功能评分较高,有显著性差异(P<0.05);脑缺血后14d,治疗组的大鼠患侧SVZ的BrdU阳性细胞较其余两组高,存在显著差异(P<0.05);免疫荧光双重标记显示,新增殖细胞表达神经元和星形胶质细胞的标志物,提示新增殖细胞为神经元和神经胶质细胞的混合体. 结论 BMSCs可以改善永久性局灶性脑缺血大鼠的神经功能,其机制可能与促进SVZ的神经细胞增殖有关.     

昆明种小鼠胚胎干细胞的培养及鉴定

目的 从昆明种小鼠的早期胚胎中获取并培养胚胎干细胞.方法 收集小鼠3.5 d的囊胚培养,用小鼠胚胎成纤维细胞作为饲养层,形成的ES细胞样集落,72 h后分离隆起生长的内细胞团并继续培养,观察集落的生长状态,并通过碱性磷酸酶染色进行鉴定.结果 ES细胞有其典型的形态学特征:集落呈鸟巢状,边缘清楚,表面平滑,结构致密,隆起生长,细胞之间界限不清楚;单个细胞体积小、核大;对ES 细胞碱性磷酸酶进行检测,在AKP底物作用下,未分化的ES 细胞显微镜下为棕褐色,分化的不着色.结论 昆明种小鼠囊胚在小鼠胚胎饲养层细胞上可以发育为胚胎干细胞.     

西藏藏族人群白细胞介素6启动子-597和-572位点多态性的分布

背景存在启动子区的多态性可以改变基因的表达水平,可能关系人类对疾病的易感性.白细胞介素6启动子基因多态性和民族以及很多疾病有关,不同民族其基因多态性表现特点也常常不同.目的观察白细胞介素6启动子-597和-572位点在西藏藏族人群的分布,为藏族群体遗传学和高原人群免疫背景提供基础资料.设计随机抽查.单位锦州医学院人类学研究所.对象于2003-10和2004-07分别对西藏自治区拉萨市和那曲牧区进行样本采集.选择108名藏族青少年为研究对象,其中男60名,女48名,年龄14～21 岁.纳入标准父母均为藏族并经过严格体格检查确定健康.纳入对象均对检测项目知情同意并签署知情同意书.方法抽取108名藏族青少年的外周静脉血5 mL,采用盐析法提取人的白细胞DNA.应用聚合酶链式反应扩增IL-6启动子包含-597和-572片断,对扩增片断进行限制酶切后取不同条带进行克隆后测序.主要观察指标西藏自治区藏族人启动子多态性分布情况,以及和中国汉族和其他民族比较结果.结果纳入的108名藏族青少年数据全部进入结果分析.①不同性别人群IL-6启动子-572C/G位点多态性分布-597位点108个样本中都没有发现GA和AA基因型,仅发现GG基因型.-572位点存在CC,CG,GG3种基因型,频率依次为0.63,0.35,0.02;基因型分布符合Hardy-Weinberg平衡,具有群体代表性;等位基因频率分别为0.81,0.19;基因型和等位基因频率均无性别差异(P＞0.05).②不同种族间IL-6基因-597G/A与-572C/G多态性分布英法白种人群中-597位点存在GG,GA,AA3种基因型,G,A等位基因频率分别为0.60和0.40,明显不同于本实验中西藏藏族人群位点多态性分布;而日本人群中-597位点也不存在多态性,与我国汉族人群接近(P＞0.05).③不同条带基因分型,DNA序列测定结果-597位点仅发现有GG基因型(不含酶切位点,酶切后为1条片段,长度仍为PCR扩增产物),未见GA和AA基因型.-572位点存在CC,CG,GG3种基因型,频率依次为0.64,0.35,0.01;基因型分布符合Hardy-Weinberg平衡(P＞0.05),具有群体代表性;C,G等位基因频率分布为0.81,0.19;基因型和等位基因分布频率均无性别差异.不同种族人群间IL-6基因频率及等位基因携带频率分布的比较,西藏藏族和我国汉族人接近,而与欧美西方白种人比较,差异明显.结论IL-6基因-597和-572多态性存在种族差异,西藏藏族人群可能不存在-597多态性;其-572位点有着自己的民族特点,存在CC、CG、GG3种基因型,G等位基因为少见基因,与欧美白种人相比-572位点基因型等位基因频率分布存在显著差异,而与我国汉族和日本人接近,这种差异可能是与高原人特有的遗传基因有关.     

辽宁汉族成人头面部形态指数特征研究

目的探讨辽宁汉族成人的头面部形态特征,进而了解辽宁汉族成人头面部相互之间存在的差异,为法医学、解剖学提供帮助。方法采取随机调查的方法,在辽宁省内选取,城市调查点及农村调查点进行测量,体质测量方法按《人体测量手册》中的有关规定进行,共分析头面部指数5项。结果辽宁成人汉族以高头型,超狭面型为主,女性以狭鼻型为主。结论辽宁汉族成人具有中鼻型,高头型,特圆头型,超狭面型,狭头型特征。     

骨髓基质细胞移植促进脑缺血大鼠海马巢蛋白的表达

目的:探讨移植骨髓基质细胞(BMSCs)对永久性局灶性脑缺血大鼠海马巢蛋白表达的影响。方法:制备永久性局灶性脑缺血大鼠模型,分为PBS对照组和治疗组,再将每组动物随机均分为脑缺血后7d和14d亚组。PBS对照组在脑缺血后1d注射PBS,治疗组在脑缺血后第1日移植BMSCs。Zausinger六分法检测神经功能恢复情况;免疫组织化学方法检测大鼠海马的巢蛋白表达。结果:在脑缺血后第7日和第14日两个时相点,治疗组的神经功能评分均较高,与PBS对照组之间存在显著性差异;齿状回的颗粒细胞下层、颗粒细胞层和海马锥体细胞层均有巢蛋白表达,在脑缺血后第14日,治疗组的大鼠患侧海马的巢蛋白阳性细胞较对照组表达高,存在显著性差异。结论:BMSCs可以改善脑缺血大鼠的神经功能;促进海马内神经干细胞或反应性星形胶质细胞增殖可能为其修复缺血脑损伤的机制之一。     

RWT法评价拉萨藏族儿童青少年膝部骨龄

目的：探讨拉萨藏族儿童青少年膝部骨发育规律。方法：随机选取世居拉萨、父母为藏族的7～21岁儿童青少年1 496名为研究对象,拍摄膝部X线片,以RWT法评价膝部骨龄。结果：骨龄与日历年龄高度相关;各年龄组骨龄显著小于日历年龄;骨龄存在性别差异。结论：RWT法可以预测骨龄;托萨藏族儿童青少年膝部骨龄小于日历年龄,提示该地区骨发育存在延缓的特点。     

拉萨藏族青少年手腕部骨龄的Fels法评价

目的:探讨拉萨藏族青少年骨发育水平的变化趋势,为临床应用骨龄提供科学依据。方法:于2003-07/09采用分层整群抽样调查,从拉萨市6所大、中、小学随机选取父母为藏族,本人在拉萨生活,经体检证明健康的7～21岁青少年为调查对象。按性别分组,每岁为1组,共调查1496名,男743名,女753名。按Fels法进行手腕部骨龄评价,并进行骨龄与年龄的相关分析和骨龄性别差异分析。结果:共调查1496名,数据均进入结果分析。①Fels法评价手腕部骨龄结果:各年龄组骨龄均小于年龄,男性7～21岁各年龄组年龄与骨龄差值变化分别为:1.17±1.18,1.28±1.06,1.79±1.13,1.99±1.05,1.87±1.73,1.72±1.80,1.22±1.68,1.20±1.43,1.29±1.02,1.37±1.27,1.49±0.98,1.71±1.11,2.05±0.79,2.72±0.55;女性分别为:1.18±1.00,1.40±1.28,1.17±1.46,0.95±1.41,0.43±1.34,0.55±1.23,1.29±1.16,1.59±0.95,1.48±1.19,2.15±0.98,2.46±1.06,2.92±0.75,3.60±0.33,4.48±0.26。骨龄性别差异表现为:7～8岁年龄组骨龄男性大于女性,9～12岁年龄组骨龄男性小于女性,而后呈现男性又大于女性。②骨龄与年龄的相关分析:骨龄与年龄呈高度正相关(男性r=0.947,女性r=0.928,总体r=0.934)。结论:各年龄组骨龄均小于年龄,提示拉萨藏族青少年骨发育具有延缓的特点,这可能是西藏典型的高寒、缺氧等高原环境造成的。Fels法可以用于评价拉萨藏族青少年手腕部骨龄,但不完全适用,因此有必要制定西藏藏族儿童青少年的骨龄标准。     

蝶枕角与颅底诸结构至耳眼平面垂直距离的纵向比较

目的:为人颅底的生长发育研究提供正常的颅底结构测量数据和参照标准;初步分析颅底生长发育趋势和特点。方法:对人不同生长发育阶段颅底标本诸结构进行观察和测量,并对其进行相互比较和纵向分析。结果:颅底在不同发育阶段各有其趋势和特点,蝶枕角随着年龄的增长逐渐变小,但性别之间无差异,颅前窝诸结构变化幅度最大,颅中窝的变化相对最小,11项测量指标在不同生长发育阶段的变化各异。结论:观察测量数据可为人颅底生长发育进一步研究提供依据,蝶枕角、耳眼(FH)平面可作为颅底生长发育的观察测量指标和参照平面。     

碱性成纤维细胞生长因子经ERK信号通路抑制卵巢癌CAOV3细胞凋亡

目的:研究卵巢癌CAOV3细胞中碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)经MEK/ERK1/2信号转导通路对CREB、Bcl-2表达以及对细胞凋亡的影响作用。方法:无血清饥饿诱导细胞凋亡。分为对照组、bFGF组、bFGF PD98059组。Annexin-EGFP/PI荧光双染法检测细胞凋亡。Western印迹法检测ERK1/2、CREB以及Bcl-2蛋白表达。RT-PCR法检测Bcl-2的mRNA表达。结果:bFGF可抑制无血清饥饿诱导的细胞凋亡;时效依赖性地诱导ERK1/2活性增高、刺激CREB磷酸化、促进Bcl-2的mRNA及蛋白表达增加。bFGF作用CAOV3细胞15 min时ERK1/2活性达高峰;45 min时CREB磷酸化达峰值;Bcl-2的mREN表达高峰为6h,8h时蛋白表达最高。MEK1抑制剂PD98059可抑制bFGF的上述作用。结论:bFGF可能通过激活MEK/ERK1/2/CREB/Bcl-2信号转导途径抑制卵巢癌CAOV3细胞凋亡。