6285例遗传咨询儿童外周血染色体核型分析

目的 对本地区6285例小儿遗传咨询者外周血染色体核型进行分析,探讨染色体异常与临床效应的关系。方法 收集整理本地区2007年1月至2020年12月期间来本院遗传咨询的6285例小儿的外周血染色体G显带核型结果及临床表现,进行回顾性分析。结果 6285例儿童中,有1562例出现染色体核型异常,异常检出率为24.85%。其中有1261例为染色体数目异常,临床表现为智力低下及特殊面容者1107例,占87.79%(1107/1261),其中21-三体占比最高,占86.12%(1086/1261);染色体结构异常共有301例,占19.27%(301/1562),其中多态性174例,占11.14%(174/1562)。性染色体数目及结构异常合计194例,占12.42%(194/1562)。结论 染色体核型数目异常明显多于结构异常,常染色体数目异常仍是儿童最常见的染色体畸变类型,其次是性染色体数目及结构异常,这是主要导致儿童智力低下、身材矮小及性发育异常等临床表型的重要原因。     

染色体异常核型一家系

先证者男,1岁半,系第2胎第2产.足月顺产,体重3.2kg.面容特殊,小头,宽眼距,眼睑下垂,鼻梁扁平,牙齿异常.发育较同龄儿迟缓,智力低下,语言能力差,常有呼吸系统并发症,CT检查结果未见明显异常.     

结核分枝杆菌Rv0867c基因的克隆表达及其纯化

目的构建结核分枝杆菌Rv0867c基因的原核表达质粒，获得结核分枝杆菌Rv0867c基因的表达蛋白。方法制备结核分枝杆菌基因组DNA，采用聚合酶链反应（PCR）技术扩增目的基因片段；通过克隆载体pUC19构建质粒载体pUC19-Rv0867c，经序列测定证实正确，双酶切后连接于表达载体pPRO-EXHT，转化入大肠杆菌DH5α中，再经IPTG诱导表达带His标签的Rv0867c融合蛋白；用聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）分析重组蛋白的相对分子质量大小及表达形式。结果成功扩增出了结核分枝杆菌Rv0867c基因，构建了具有正确基因序列的表达载体pPRO-EXHT-Rv0867c，转化入大肠杆菌DH5α中，经诱导产生高水平的表达产物。经SDS分析，在80kD处出现新生蛋白带，凝胶薄层扫描检测表达量约占菌体蛋白的23．7％。该融合蛋白以包涵体的形式存在，用Ni^2＋-NTA纯化柱在变性条件下进行纯化。结论成功克隆了结核分枝杆菌Rv0867c基因并得到了其大肠杆菌表达产物，为进一步研究Rv0867c基因蛋白的活性及其功能，以及结核分枝杆菌快速促生长作用奠定了基础。     

原发性腹膜后肿瘤的外科治疗101例临床分析

目的：探讨原发性腹膜后肿瘤的外科治疗。方法：回顾性分析1992年以来原发性腹膜后肿瘤手术切除101例，总结提高手术治疗效果的策略。结果：101例患者中良性肿瘤38例，恶性肿瘤63例，均经术后病理证实。肿瘤完整切除率71．29％。良性肿瘤的手术完整切除率高于恶性肿瘤，术中失血少，需要合并切除的脏器少，术后复发率相对低。全部病人无一例术中死亡。术中复发33例，再次手术19例。结论：手术完整切除是腹膜后肿瘤治疗首选的方法，术前准备非常重要，对复发的肿瘤应该争取再次手术。     

肿瘤外科术后药物性肝炎的临床分析

目的:分析肿瘤外科术后药物性肝炎的病因及临床特点,以便为临床诊治提供依据。方法:将我科2011年11月~2013年10月接诊的肿瘤术后药物性肝炎患者51例作为研究对象,回顾性分析他们的临床资料,总结分析病因及临床特点。结果:51例患者中男性对于女性,大部分在术后一周发生,年龄在70岁以上者占了50%以上,为56.86%(29/51);引起本次研究病症的药物主要包括抗生素类、抗肿瘤药、中草药及解热镇痛药等;对相关因素分析可知,术前长期饮酒或者HBsAg阳性患者极易引发肝功能损害,而术前新辅助化疗引发肝损害则最为严重。结论:肿瘤外科术后药物性肝炎病因主要与用药类型、术前长期HBsAg阳性、长期饮酒、年老、术前新辅助化疗等有关,临床诊治必须对这些因素加强重视。     

结核分枝杆菌Rv0867c基因的克隆表达及其纯化

目的构建结核分枝杆菌Rv0867c基因的原核表达质粒,获得结核分枝杆菌Rv0867c基因的表达蛋白。方法制备结核分枝杆菌基因组DNA,采用聚合酶链反应(PCR)技术扩增目的基因片段;通过克隆载体pUC19构建质粒载体pUC19-Rv0867c,经序列测定证实正确,双酶切后连接于表达载体pPRO-EXHT,转化入大肠杆菌DH5α中,再经IPTG诱导表达带His标签的Rv0867c融合蛋白;用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析重组蛋白的相对分子质量大小及表达形式。结果成功扩增出了结核分枝杆菌Rv0867c基因,构建了具有正确基因序列的表达载体pPRO-EXHT-Rv0867c,转化入大肠杆菌DH5α中,经诱导产生高水平的表达产物。经SDS分析,在80 kD处出现新生蛋白带,凝胶薄层扫描检测表达量约占菌体蛋白的23.7%。该融合蛋白以包涵体的形式存在,用Ni²⁺-NTA纯化柱在变性条件下进行纯化。结论成功克隆了结核分枝杆菌Rv0867c基因并得到了其大肠杆菌表达产物,为进一步研究Rv0867c基因蛋白的活性及其功能,以及结核分枝杆菌快速促生长作用奠定了基础。     

传染性单核细胞增多症患儿调节性T细胞与EB病毒DNA浓度的相关性研究

目的探讨传染性单核细胞增多症(IM)患儿调节性T细胞水平的变化及其与EB病毒DNA(EBV-DNA)浓度的相关性。方法选取42例IM患儿作为观察组,30例健康儿童作为对照组。采集2组儿童的空腹静脉血,使用流式细胞术测定CD3~+、CD4~+、CD8~+、CD4~+CD25~+、CD4~+CD25~+CD127~-表达值,使用聚合酶链反应(PCR)法测定EBV-DNA浓度。对比2组的检测结果,分析调节性T细胞水平与EBV-DNA浓度的相关性。结果观察组患儿的CD3~+、CD8~+水平均高于对照组,CD4~+、CD4~+/CD8~+、CD4~+CD25~+、CD4~+CD25~+CD127~-水平均低于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。观察组患儿的EBV-DNA阳性检出率为85.71%,高于对照组的3.33%,差异有统计学意义(P0.05)。观察组患儿急性期的EBV-DNA含量为(76.62±5.10)×10~3 copies/mL,高于恢复期的(0.68±2.30)×10~3 copies/mL,差异有统计学意义(P0.05)。IM患儿急性期的EBV-DNA浓度与CD3~+、CD8~+水平均呈正相关,与CD4~+、CD4~+/CD8~+、CD4~+CD25~+、CD4~+CD25~+CD127~-水平均呈负相关。结论 IM患儿的调节性T细胞水平与EBV-DNA浓度呈负相关,提示IM患儿在急性期普遍存在免疫调节功能紊乱,且免疫功能紊乱程度与EB病毒感染量密切相关。     

结核分枝杆菌Rv1884c和Rv0867c基因的克隆表达及其促生长作用的研究

目的 构建结核分枝杆菌Rv1884c和Rv0867c基因的原核表达质粒,获得结核分枝杆菌Rvl884c和Rv0867c基因的表达蛋白,并初步研究其促生长作用.方法 制备结核分枝杆菌基因组DNA,采用PCR技术扩增目的 基因片段;将2个片段分别克隆入克隆载体pGEx-4T-1和pUC19,再分别克隆入原核表达载体pGEX-4T-1和pPRO-EXHT,经序列测定证实正确后,再经异丙基硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导表达GST标记的Rv1884c融合蛋白和His标记的Rv0867c融合蛋白;用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析重组蛋白的相对分子质量大小及表达形式.结果 成功扩增出了结核分枝杆菌Rv1884c和Rv0867c基因,构建了具有正确基因序列的质粒载体pGEX-4T-1-Rv1884c和pPRO-EXHT-Rv0867c,转化人大肠杆菌DH5α中经诱导产生高水平的表达产物.经SDS分析,在相对分子质量为45 000和80 000处出现新生蛋白带,凝胶薄层扫描检测表达量分别约占菌体蛋白的18.3%和23.7%.用GSTrap FF亲和层析柱和Ni2+-NTA纯化柱进行蛋白纯化,并研究这两种蛋白对藤黄微球菌、BCG和结核分枝杆菌H37Rv的促生长作用.结论 成功克隆了结核分枝杆菌Rv1884c和Rv0867c基因并得到了其大肠杆菌表达产物,为进一步研究Rv1884c和Rv0867c基因蛋白的活性及其功能,以及研究结核分枝杆菌快速促生长作用奠定了基础.     

银杏叶提取物对缺氧复氧诱导心肌细胞损伤的影响

目的：通过培养SD大鼠乳鼠心室肌细胞建立缺氧／复氧（H／R）模型,观察银杏叶提取物（EGB）对心肌细胞缺氧／复氧所致心肌细胞损伤的影响,为心脏缺血／再灌注损伤的防治提供理论依据。方法：采用胶原酶消化法原代培养乳鼠心肌细胞。分正常对照组、H／R组、H／R＋银杏叶提取物组,用MTT法观察心肌细胞存活率、用Western blotting测定Bcl-2、Bax蛋白的表达。结果：与空白对照组相比,H／R组心肌细胞存活率显著降低,Bcl-2蛋白表达水平下降,Bax表达水平上调;银杏叶提取物预处理后进行H／R较大程度地逆转了上述指标变化,与H／R组相比差异均有显著性（P〈0．05）。结论：H／R可以诱导心肌细胞损伤;银杏叶提取物可以通过上调Bcl-2,下调Bax而减轻心肌细胞凋亡,对心肌细胞有保护作用。     

独活寄生汤改善佐剂性关节炎大鼠氧化应激机制探讨

【目的】探讨独活寄生汤对佐剂性关节炎(AIA)大鼠抗氧化能力及对核转录因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶1(HO-1)信号通路的影响。【方法】采用弗式完全佐剂成功诱导大鼠佐剂性关节炎模型。将90只大鼠随机分为正常组,模型组,甲氨喋呤组(剂量为0.5 g·kg~(-1),日2次),独活寄生汤低、中、高剂量组(剂量分别为0.75、1.5、3.0 g·kg-1,日2次),每组15只,连续给药24 d。采用荧光定量聚合酶链反应(q PCR)法检测各组大鼠滑膜组织超氧化物歧化酶(SOD)mRNA、丙二醛(MDA)mRNA、HO-1 mRNA表达变化,采用分光光度法检测各组大鼠滑膜组织SOD、MDA含量,采用蛋白免疫印迹(Western blot)法检测各组大鼠滑膜组织胞核、胞质Nrf2和全细胞HO-1蛋白表达。【结果】独活寄生汤高、中剂量可上调模型大鼠滑膜组织SOD表达,降低MDA的表达,降低胞质Nrf2含量,升高胞核Nrf2含量,提高Nrf2核转位率,增强滑膜组织HO-1的表达,与模型组比较,差异均有统计学意义(P0.05或P0.01)。【结论】独活寄生汤具有增强抗氧化应激的能力,其作用机制可能与激活Nrf2/HO-1信号途径,促进Nrf2核转位,进而促进下游抗氧化因子HO-1的表达有关。