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【摘要】 目的 探讨全氟化碳(PFC)对脂多糖(LPS)诱导人肺泡上皮A549细胞炎性反应及单免疫球蛋白白介素 1受体相关蛋白(SIGIRR)表达的影响。方法 实验分为正常细胞组、全氟化碳+脂多糖(PFC+LPS)组、全氟化碳(PFC)组及脂多糖(LPS)组。各组细胞经相应处理24 h后,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测培养上清中的TNF α、IL 6和IL 10含量,用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测核转录因子 κB (NF κB)和SIGIRR的表达。结果 ELISA结果显示,LPS组TNF α、IL 6水平较正常细胞组升高(P<005);PFC+LPS组TNF α、IL 6水平较LPS组下降(P<005);与正常细胞组相比,PFC组IL 10水平升高(P<005),PFC+LPS组IL 10水平较LPS组升高(P<005)。Western blot 结果显示,与正常细胞组相比,LPS组核内磷酸化NF κB p65表达上调(P<005),PFC+LPS组核内磷酸化NF κB p65表达水平较LPS组降低(P<005);与正常细胞组相比,LPS组SIGIRR表达水平下调(P<005),PFC+LPS组SIGIRR表达水平较LPS组上调(P<005)。PFC本身对TNF α、IL 6含量及NF κB p65表达无影响,但PFC可促进A549细胞释放IL 10及上调SIGIRR表达(P<005)。结论 PFC可减轻A549细胞对LPS诱导的炎性反应,促进抗炎因子IL 10分泌及上调负调控分子SIGIRR表达是可能的分子机制。 相似文献
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目的 构建大鼠血红素加氧酶1 (HO-1)基因重组慢病毒载体lenti EGFP-HO-1,并检测其在骨髓间充质干细胞(BMSC)中的表达效率.方法 利用聚合酶链反应技术(PCR)扩增rat-HO-1基因,并克隆到pGV287 EGFP载体中,行PCR及测序鉴定所构建的重组质粒pGV287-EGFP-HO-1;将重组质粒pGV287-EGFP-HO-1及辅助包装质粒pHelper 1.0、pHelper 1.0共转染293细胞进行重组慢病毒lenti-EGFP HO-1的包装,并采用荧光标记法检测病毒滴度,再进一步感染BMSC,荧光显微镜下观察感染效果、Western blot检测BMSC内HO-1表达情况.结果 大鼠HO-1基因扩增产物大小为911 bp,与目的基因相关片段中HO1 cDNA大小一致.阳性克隆行PCR后形成498 bp,其大小与目的片段大鼠HO-1 cDNA相当,进一步测序鉴定提示与GenBank信息库中rat-HO-1基因mRNA一致.重组慢病毒lenti-GV287-EGFP-HO1滴度为2×108 TU/ml,感染BMSC后可观察到报告基因EGFP表达,慢病毒lenti-GV287-EGFP-HO-1感染组中可检测到HO-1蛋白表达.结论 本研究成功构建了重组慢病毒载体lenti-GV287-EGFP-HO-1,并能够在BMSC中高效表达,为进一步探索HO-1基因修饰间充质干细胞在肺损伤中的作用奠定了基础. 相似文献
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急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征发病机制的研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
急性肺损伤(acutelunginjury,ALI)和急性呼吸窘迫综合征(acuterespiratorydistresssyndrome,ARDS)是指由心源性以外的各种肺内外致病因素所导致的急性、进行性缺氧性呼吸衰竭。虽然目前ALI/ARDS发病机制以及相应的治疗手段已经取得了一些进展.但是发病率和病死率仍较高.其病死率高达30%~40%。ALI/ARDS的发病机制十分复杂.涉及的环节多.受损的靶细胞多。 相似文献
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姜黄素对人肺腺癌A549/DDP细胞增殖活性的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
目的探讨姜黄素对人肺腺癌A549/DDP细胞增殖活性的影响.方法采用细胞计数法绘制亲代A549和A549/DDP细胞生长曲线,MTY法测定A549/DDP对顺铂的耐药指数以及姜黄素对A549/DDP细胞抑制率.将不同浓度姜黄素作用于A549/DDP细胞24h 后,Hoechst33258染色荧光显微镜下观察细胞核形态,流式细胞仪检测细胞凋亡率.以20μmol/L的姜黄素作用细胞24h 后,流式细胞仪分析细胞周期.结果亲代A549细胞和A549/DDP细胞的生长曲线相似,倍增时间分别为(33.24±0.24)h和(32.88±0.11)h(P>0.05);顺铂处理A549和A549/DDP细胞72h 后,半数抑制浓度(IC50)分别为13.57 μmol/L 和146.79 μmol/L,A549/DDP细胞对顺铂的耐药指数为10.82.姜黄素对A549/DDP细胞增殖有抑制作用,并且呈时间浓度依赖性(P<0.05).姜黄素作用后,Hoechst染色显示A549/DDP细胞核缩小变形,致密浓染荧光成团块分布.流式细胞仪分析结果示细胞凋亡率呈明显剂量依赖关系(P<0.05).20 μmol/L的姜黄素作用细胞24h,引发G2期阻滞.结论姜黄素对人肺腺癌A549/DDP细胞增殖具有抑制作用,并呈时间、浓度依赖.其作用可能是通过阻滞细胞周期进程和诱导细胞凋亡来实现的. 相似文献
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目的 肺活量体重指数是反映身体机能状况的指标之一,于2014年9~10月对北京市海淀区1 806名小学生肺活量体重指数进行计算及分析,为提高儿童青少年的健康水平提供参考。 方法 整群随机抽样法抽取北京海淀区1 806名小学生进行身高、体重及肺活量测量,按公式[肺活量/体重(ml/kg)]计算肺活量体重指数,采用t检验比较不同年龄组别,男、女生肺活量、肺活量体重指数,采用χ2检验比较不同年龄组别,男、女生肺活量体重指数不及格率及优秀率;按公式[体重/身高2(kg/m2)]计算体重指数(body mass index,BMI),依据相应标准,判别轻体重、正常体重、超重与肥胖,比较不同体重组别间肺活量体重指数差异。 结果 共随机抽样1 806名小学生,其中男生923名,女生883名,总体上随着年龄增长,男、女生的肺活量绝对值均呈增长趋势,在同年龄组别中,除10岁年龄组外,男生肺活量均大于女生肺活量,差异有统计学意义(P<0.05);在6、7、9岁年龄组别中,男生的肺活量体重指数大于女生肺活量体重指数,差异有统计学意义(P<0.05),而在8、10、11岁年龄组别中,男、女生间的肺活量体重指数差异无统计学意义(P>0.05);女生的不及格比率要高于男生(8.4% vs.5.1%,P<0.05),而男、女生的优秀检出率比较(11.5% vs.13.4%),差异无统计学意义(P>0.05);肺活量体重指数与BMI指数呈负相关,随BMI指数的增大肺活量指数显著降低。 结论 轻体重组和正体重组身体机能优于超重和肥胖组,提示超重及肥胖一定程度影响了体质健康发展,肺活量体重指数呈现随体重增长而下降的趋势。 相似文献