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1.
利用离心、盐析及DEAE-纤维素、羟基磷灰石、葡聚糖-G100多步层析法将牛睾丸AR分离纯化,醛糖还原酶(aldosereductase,AR),并利用体外酶动力学方法测定其底物特异性,为寻找有效的醛糖还原酶抑制剂提供线索。结果:纯化的酶经SDS-pAGE电泳鉴定示一单一蛋白条带,牛睾丸ARMr约为(40000±1000)u,AR底物特异性,按1/km大小依次排列为:P-硝基苯醛,DL-甘油醛,D-葡萄糖醛酸,D-木糖,D-半乳糖,D-葡萄糖。 相似文献
2.
构建过表达整合蛋白α5β1的SMMC7721细胞株。方法应用分子克隆技术和基因转染建立过表达整合蛋白α5β1的SMMC7721细胞株,应用RT-PCR及流式细胞术鉴定SMMC7721细胞表面整合蛋白α5β1的表达。结果获得过表达整合蛋白α5/β1的SMMC7721细胞株α5.3-7721,β1.6-7721,α5β1.6-7721细胞。结论整合蛋白α5β1基因转染后,SMMC7721细胞整合蛋白α5β1的RNA及蛋白质表达明显提高。过表达整合蛋白α5β1的SMMC7721细胞株的建立有助于研究整合蛋白α5β1在肝癌中的作用 相似文献
3.
日本血吸虫感染小鼠肝肉芽肿与Th1/Th2细胞因子水平的动态变化 总被引:13,自引:0,他引:13
目的 观察小鼠感染日本血吸虫后急、慢性期肝肉芽肿病变与Th1/Th2细胞因子的动态变化,探讨Th1/Th2在肉芽肿形成及调节中的作用。方法 采用石蜡切片,HE染色后观察感染小鼠肉芽肿病变,用ELISA双抗夹心法测定小鼠感染后0、4、6、8和12周血清及脾淋巴细胞IL-2、IFNr和IL-4水平的动态变化。结果 小鼠感染后6周出现明显肉芽肿病变,8周肉芽肿反应达高峰;12周则明显缩小;感染小鼠血清及脾淋巴细胞的Th1细胞因子IL-2和IFNr在感染后4~6周开始上升,8周达高峰,随后下降;而Th2细胞因子IL-4在感染后8周时迅速上升且随感染时间延长而明显升高。结论 Th1细胞因子IL-2和IFNr与血吸虫卵肉芽肿的诱导和形成密切相关。而Th2细胞因子ILL-4可抑制Th1细胞因子在血吸虫病慢性期虫卵肉芽肿自发性免疫调节中起重要作用。 相似文献
4.
FAK和整合蛋白α5、β1亚基在胃癌中表达的比较及其临床意义 总被引:1,自引:1,他引:1
目的 比较粘着斑激酶(FAK)和整合蛋白(integrin)α5、β1亚基在胃癌及癌旁组织中的表达与肿瘤细胞分化、浸润、转移等生物学行为的关系及相互关系。方法 用免疫组织化学亲合素生物素法(ABC)检测75例胃癌及癌旁组织石蜡标本FAK和整合蛋白α5、β1亚基蛋白的表达水平。结果 FAK、整合蛋白α5和亚基和整合蛋白β1亚基的表达 为 或 分别是胃癌组织57%、29%和25%,癌旁组织4%、76%和84%;低分化胃癌组织68%、18%和16%,高中分化组织42%、45%和39%;有淋巴结转移的组织77%、31%和31%,无转移的组织36%、28%和19%;浸润程度较深的组织68%、29%和25%,浸润程度较深的组织19%、31%和25%。结论 FAK较整合蛋白α5、β1亚基可以更有效地衡量胃癌的发生与发展,FAK的表达量可作为胃癌发生、发展过程中一种较有价值的病理指标。FAK可能既是一种转化相关酶又是一种演变相关酶。 相似文献
5.
目的 探讨胆道肿瘤特异性的标志物,为胆道肿瘤的早期诊断、判断预后、监测复发以及治疗等提供帮助,同时为进一步研究胆道肿瘤的发病机制提供线索。方法 收集经病理结果证实的胆道癌和胆囊癌患者的组织、胆汁标本以及良件胆道和胆囊疾病患者的组织、胆汁标本,应用双向电泳和MALDI-TOF-MS质谱技术检测出恶性和良性组织、恶性和良性病变患者胆汁之间差异表达的蛋白。对同时高表达于胆道癌、胆囊癌及恶性病变胆汁的蛋白Mrp14进行Western blot、免疫组化验证,RT-PCR监测基因表达水平。结果3组蛋白标本双向电泳后质谱成功鉴定出30个差异表达的蛋白,其中Mrp14同时在胆道癌、胆囊癌及恶性病变胆汁中高表达。Western blot、免疫组化及RT-PCR验证其在蛋白和基因水平于恶性组织中高表达。结论 Mrp14在胆道系统恶变后表达增高,可能为胆道肿瘤发生、发展的候选肿瘤标志物。 相似文献
6.
新型三聚β肽对人肝癌细胞系迁移和侵袭能力的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
在肿瘤侵袭转移过程中,肿瘤细胞首先脱离原位,与基底膜和细胞外基质中的大分子蛋白成分黏附,并激活与基质蛋白溶解相关的蛋白水解酶类如基质金属蛋白酶(MMPs),降解基底膜和细胞外基质,从而细胞移动并穿过基底膜和血管壁进入血液循环。在肿瘤细胞与细胞外基质的黏附过程中,整合蛋白起了非常重要的作用。Liu等根据整合蛋白β亚基和部分α亚基的保守序列设计的抗黏附β肽能阻断肿瘤细胞与基质的相互作用,对高转移的人肝癌裸鼠模型LCID20肝癌切除术后肝内转移和肺转移也具有强大抑制作用。 相似文献
7.
醛糖还原酶ELISA测定及意义 总被引:1,自引:0,他引:1
从牛睾丸分离纯化醛糖还原酶(AR),皮下注射免疫新西兰兔制备抗血清,血清纯化后用辣根过氧化物酶(HRP)标记制备抗体-HRP交联物,利用夹心ELISA(抗体-抗原-酶标抗体)测定了22例糖尿病人及10例正常对照的红细胞AR水平.结果①糖尿病AR水平显著高于正常人;②AR水平病人约有5倍、正常人约有3倍的变异;③病人AR水平与空腹血糖水平明显相关,正常人无相关;④AR水平与性别、年龄、糖尿病病程无关.结论ELISA测定红细胞AR水平方法简便、特异,为研究AR提供了一个有用的方法. 相似文献
8.
目的:探讨表皮生长因子受体突变体Ⅲ(epidermal growth factor receptor mutation typeⅢ,EGFRvⅢ)促进入胶质瘤细胞迁移运动的可能机制。方法:利用反转录病毒感染技术建立EGFRvⅢ过表达的人胶质瘤细胞U87 EGFRvⅢ,琼脂滴细胞迁移实验和Transwell细胞迁移实验观察EGFRvⅢ对细胞迁移运动的影响;Western印迹法检测黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)磷酸化的变化。将FAK突变体FAK(Y397F)导入U87 EGFRvⅢ细胞,观察细胞侵袭运动变化。结果:EGFRvⅢ促进入胶质瘤细胞U87的迁移运动,同时使FAK397位点磷酸化水平上调。将FAK突变体Y397F转入U87 EGFRvⅢ细胞,FAK磷酸化水平下调同时细胞迁移能力下降。结论:EGFRvⅢ通过上调FAK397位点磷酸化水平来促进胶质瘤细胞的迁移。 相似文献
9.
作者8年来选用全反式继甲酸(RA)为主要分化诱导剂,用体外细胞培养的方法,并用一系列形态学、生物学、生物化学的分子生物学的新技术和指标来研究RA对人肝癌细胞对SMMC-7721的逆转(分化诱导)作用,获得令人振奋的可喜成果。体外实验有利于药物直接作用于细胞,便于观察指 相似文献
10.
目的 探讨骨桥蛋白在人胆固醇结石形成中的作用.方法 36例胆固醇结石患者为结石组,19例肝移植供体为正常组,分别测定骨桥蛋白、钙离子及脂质成分在胆囊胆汁中的含量,用成核时间法研究骨桥蛋白在胆汁中的成核作用.结果 骨桥蛋白呈剂量依赖性地抑制胆固醇自发成核.50 μg/ml的骨桥蛋白可分别使结石组和正常组胆汁的成核时间延缓48.90%和17.07%,100 μg/ml的骨桥蛋白可使成核时间延缓91.51%和32.93%;并可抑制钙离子诱导的促成核作用.50μg/ml骨桥蛋白+钙离子可分别使结石组和正常组胆汁成核时间延缓75.78%和33.96%,而100μg/ml骨桥蛋白+钙离子则使成核时间分别延缓125.90%和62.26%.结石组胆汁中胆固醇、磷脂、胆汁酸及胆固醇饱和指数均显著高于正常组胆汁(P<0.05),而骨桥蛋白和钙离子含量则明显低于正常组胆汁中的含量(P<0.05).结论 骨桥蛋白可抑制胆固醇成核,并参与胆结石的发生发展. 相似文献