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目的探讨普鲁卡因(procaine,PCA)对人鼻咽癌细胞CNE-2Zp16蛋白表达的影响。方法应用MTT法检测不同浓度PCA对人鼻咽癌细胞CNE-2Z增殖的影响,应用免疫组化法测定鼻咽癌细胞p16蛋白的表达。结果PCA能显著抑制CNE-2Z细胞增殖,该作用呈剂量-效应和时间依赖关系。PCA组CNE-2Z细胞p16蛋白表达明显高于对照组。结论PCA对CNE-2Z细胞增殖有抑制作用,它能上调CNE-2Z细胞p16蛋白的表达,推测这可能是PCA抑制CNE-2Z细胞增殖的重要分子机制之一。 相似文献
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目的研究氯通道ClC-3和Cyclin D1在鼻咽癌细胞周期调控中的相互关系,探讨ClC-3参与细胞周期调控的可能机制。方法MTT法检测ClC-3反义寡核苷酸对鼻咽癌细胞增殖能力的影响,流式细胞仪测定细胞周期分布。用反义技术分别抑制细胞内ClC-3和Cyclin D1的表达,用RT-PCR检测目的基因的表达情况。结果40μg/ml ClC-3反义寡核苷酸能明显抑制鼻咽癌细胞的增殖.胞内ClC-3的表达下调对Cyclin D1表达没有影响,而Cyclin D1的表达下调则抑制鼻咽癌细胞ClC-3的表达。结论氯通道ClC-3参与了鼻咽癌细胞的周期调控,Cyclin D1可能位于该调控通路的上游。 相似文献
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目的探讨白藜芦醇(Res)对小鼠胰岛样细胞团(ICCs)的抗移植排斥作用及相关细胞因子表达的影响。方法采用BALB/c小鼠胚胎干细胞系B/c-ES在体外定向诱导形成ICCs,DIPA标记后移植至近交系昆明小鼠皮下。将小鼠随机分为环孢素A(CsA)组(阳性对照)、Res组、CsA+Res组和PBS组(阴性对照),每组6只,移植前3d开始给药(CsA及Res剂量均为50mg/kg),每天1次直至取材日。分别于ICCs移植后第5天和第10天取移植物常规病理切片,观察免疫排斥情况,部分切片行免疫组化染色,检测IL-2、IL-10表达情况。结果移植后第5天各组均出现不同程度的移植排斥反应,除不用免疫抑制剂的PBS组外,其余各组均有移植细胞存活;Res组和CsA+Res组IL-2表达率分别为17.5%及14.5%,明显低于CsA组(59.5%,P<0.05),而Res组与CsA+Res组比较差异无统计学意义(P>0.05);Res组和CsA+Res组IL-10阳性表达率(分别为23%和48%)明显高于CsA组(12.5%,P<0.05),且CsA+Res组明显高于Res组(P<0.05)。移植后第10天,仅CsA+Res组有少量移植细胞存活,其余各组未见移植细胞;CsA组IL-2和IL-10表达明显减弱,其余各组几乎不表达IL-2和IL-10。结论 Res可抑制小鼠ICCs移植后的急性排斥反应,其机制可能与下调IL-2表达及上调IL-10表达有关。 相似文献
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目的 研究ClC-3氯通道对鼻咽癌细胞CNE-2Z周期的影响.方法 利用反义技术抑制细胞内ClC-3的表达,用台盼蓝拒染法检测细胞存活率, MTT法检测细胞增值能力,流式细胞仪测定细胞周期分布.结果 ClC-3反义寡核苷酸剂量依赖性抑制鼻咽癌细胞的增值,胞内ClC-3的表达下调使细胞周期进程明显受到影响,细胞停滞于Gl期,而ClC-3反义寡核苷酸对细胞存活率没有影响.结论 CNE-2Z细胞内ClC-3的表达下调可阻滞细胞于Gl期而使细胞增值受到抑制.提示氯通道ClC-3参与了鼻咽癌细胞CNE-2Z的细胞周期调控. 相似文献
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目的 探讨人胰腺干细胞体外扩增及其向胰岛素分泌细胞分化的影响因素.方法 应用剪碎消化法从孕4~6月龄引产的人胎儿胰腺中获得胰岛组织,选用差速贴壁法从胰岛中分离胰腺干细胞,经扩增后定向诱导成具有胰岛素分泌功能和胰岛样结构的胰岛样细胞团,观察肝细胞生长因子和葡萄糖对胰腺干细胞向胰岛素分泌细胞诱导分化以及胰岛样细胞团胰岛素分泌功能的影响.采用流式细胞仪和免疫组织化学法检测扩增前后nestin阳性细胞和ABCG2阳性细胞.行葡萄糖刺激的胰岛素释放试验,以酶联免疫吸附法(ELISA)检测每1×105个扩增细胞经定向诱导后形成的胰岛样细胞团释放的胰岛素量,比较肝细胞生长因子和葡萄糖对定向分化的影响.采用单因素方差分析或多样本均数两两比较进行统计学分析.结果 经过15代连续扩增,nestin阳性细胞和ABCG2阳性细胞分别扩增了27.9倍和37.8倍.扩增后的细胞经15 d定向诱导后形成具有胰岛素分泌功能和胰岛样结构的细胞团.葡萄糖刺激的胰岛素分泌试验显示,当诱导培养基中肝细胞生长因子浓度为0、5、10、15μg/L时,5.6 mmol/L葡萄糖刺激后,胰岛素分泌量分别为5.00、12.93、14.91和11.23μU;25.0 mmol/L葡萄糖刺激后,胰岛素分泌量分别为19.91、35.53、47.43和23.33 μU.诱导培养基中的葡萄糖浓度为0、2.8、5.6和11.2 mmol/L时,5.6 mmol/L葡萄糖刺激后,胰岛素分泌量分别为9.07、14.21、6.91和3.53 μU;25.0 mmol/L葡萄糖刺激后,胰岛素分泌量分别为26.64、48.97、37.63和34.20 μU.结论 人胰腺中nestin和ABCG2阳性胰腺干细胞具有很强的体外扩增能力.扩增后的胰腺干细胞仍然具有形成胰岛素分泌细胞的功能,经体外诱导后能形成胰岛样细胞团.在胰腺干细胞向胰岛素分泌细胞分化诱导过程中,适当浓度的肝细胞生长因子和葡萄糖有利于胰岛样细胞团的形成和胰岛素分泌. 相似文献
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目的:巨噬细胞集落刺激因子诱导单核细胞活化的类过氧化物酶2(peroxiredoxin-like 2 activated in M-CSF stimulated monocytes, PAMM)是一种具有抗炎、抗氧化功能的蛋白,在脂肪组织中高表达,本文拟利用基因敲除小鼠,探究PAMM对白色和棕色脂肪组织形态及基因表达等的影响,以期为其功能研究提供新思路。方法:利用CRISPR-Cas9等技术构建PAMM基因敲除(knockout, KO)小鼠,用野生型(wild-type, WT)小鼠作为对照。收集腹股沟皮下白色脂肪组织(inguinal adipose tissue, IAT)和背部棕色脂肪组织(brown adipose tissue, BAT),通过HE染色观察组织形态,利用RNA-seq和RT-qPCR检测相关基因的表达。结果:通过基因组PCR及测序,证明基因敲除小鼠构建正确。敲除PAMM后IAT和BAT形态无明显变化,但E2F靶点、未折叠蛋白反应等基因集在IAT或BAT中富集。比较WT和KO小鼠组织,发现33个基因的变化趋势在IAT和BAT中保持一致;而仅在IAT中出现变化的... 相似文献
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医学网络教学资源投入大,产出多,然而广大学生群体对此却少人问津,如此造成巨大的资源浪费。通过对广东医学院的基础、临床、机能学三类课程的网络教学资源的使用情况进行问卷调查,了解学生使用网络教学资源的规律,为网络教学资源的建设提供具体的改进方法和策略。 相似文献
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目的:探寻EGFR对中枢神经元生长活性的影响及机制。方法:构建EGFR过表达(p LEGFP-EGFR)和RNAi干扰(vshRNA-EGFR)的慢病毒载体和质粒,作用于体外培养的神经元。Western-blot检测神经元不同EGFR表达水平下胞内微管蛋白(β-Tubulin)轴突蛋白(Tau)和神经丝蛋白(NF)的表达以及PI3K/Akt/m TOR的活化状态。利用m TOR体外抑制剂Rapamycin进一步观察EGFR的作用途径。结果:EGFR上调的同时观察到神经元中Tau、β-tubulin和NF蛋白表达水平和m TOR活性增加,同时PI3K/AKt通路活性在增强。用100μmol/L的Rapamycins处理24 h后,Tau、β-tubulin和NF表达水平明显下调,同时p-m TOR和p-Akt活性降低,神经元生长活性被抑制。结论:体外EGFR能通过PI3K/Akt信号通路激活,上调m TOR表达,从而促进神经元的生长活性。 相似文献