应用反向线性杂交技术快速检测结核分枝杆菌利福平耐药性研究

探讨反向线性杂交技术(reverse line blot assay,RLB)在结核分枝杆菌利福平(RFP)耐药性快速检测中的应用价值.采用RLB将包含rpoB基因核心区的扩增产物与标记特异性探针的膜进行杂交,共对121株结核分枝杆菌进行RFP耐药性检测,并将结果与常规药敏实验进行比较.结果发现,121株中有71株对RFP耐药,56株为多重耐药株;采用RLB共检测到65株RFP耐药株rpoB基因核心区存在突变,其灵敏度为91.5%(65/71);50株RFP敏感株中均未检测到突变,则特异性为100%(51/51);56株多耐药菌株中,92.9%(52/56)存在rpoB基因核心区突变.因此,用RLB检测结核分枝杆菌RFP耐药株具有快速,高效,特异性和灵敏度高的优点,且可用于多耐药菌株的筛选,具有推广和潜在的临床应用价值.     

愈口宁中土茯苓对大鼠复发性阿弗他溃疡的治疗作用

目的:研究愈口宁(YKN)中土茯苓对于大鼠复发性阿弗他溃疡(RAU)抗炎作用。方法:随机将50只大鼠分为5组：左旋咪唑、模型对照、YKN、YKN-T(YKN去土茯苓)及土茯苓组,每组10只;化学灼烧法建立RAU模型,连续给药7 d。模型对照组给予等体积生理盐水,观察造模后用药1、3、7 d大鼠口腔溃疡状况。麻醉下脱颈处死大鼠,HE染色观察病理变化。蛋白免疫印记法(Western blot, WB)检查溃疡组织中TLR4、PI3K、p-PI3K、AKT、NF-κB、mTOR的蛋白表达量,ELISA法检测IL-6、IL-1β、TNF-α水平。结果:模型对照组大鼠血清中IL-1β、IL-6、TNF-α含量明显升高(P<0.01),土茯苓组血清中IL-1β、IL-6、TNF-α含量显著下调(P<0.01)。WB示模型对照组TLR4、AKT、NF-κB、mTOR蛋白表达量显著上调,p-PI3K/PI3K显著下降,土茯苓组TLR4、AKT、NF-κB、mTOR表达量显著下降,p-PI3K/PI3K显著上升。结论:土茯苓对于RAU大鼠体内炎性因子可以起到调和作用,可能通过抑制相关通路以降...     

乙型肝炎病毒感染者特异性T淋巴细胞应答与临床转归

乙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV）感染呈世界性流行,是影响全球的严重公共卫生问题.全球约20亿人曾感染过HBV,其中3.5亿人为慢性感染者,每年约100万人死于HBV感染所致的肝衰竭、肝硬化和肝细胞肝癌[1].我国现有慢性HBV感染者约9300万人,其中慢性乙型肝炎患者约2000万例.     

MMP-9、COX-2、NF-κB在口腔鳞状细胞癌组织中的表达及意义

目的:探讨基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、环氧化物酶-2(COX-2)、细胞核因子KB(NF-κB)在口腔鳞状细胞癌(OSCC)组织中的表达及意义.方法:分别采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)、蛋白免疫印迹法(West-ern blot)、免疫组化法检测80例OSCC组织中的表达水平;采用Pearson法...     

SARS并存基础病28例死亡患者的分析

目的 探讨SARS并存基础病与死亡的关系。方法 采用回顾性流行病学方法对28例并存基础病的SARS死亡病例进行分析。结果 28例患者中并存的基础疾病主要是冠心病、高血压、糖尿病、脑血管病等．合并单一基础疾病的患者10例(35．7％)，2种以上基础疾病的18例(64．3％)。死亡原因有呼吸衰竭15例，心源性死亡8例，消化道大出血2例．糖尿病酮症酸中毒2例，继发感染1例。结论 影响死亡因素是复杂的、多方面的．与年龄．基础疾病、并发症、激素的应用、病变程度等相关，这些因素加快了SARS病例死亡的进程。     

内括约肌切除术在低位直肠癌保肛中的应用

直肠癌是我国最常见的消化道恶性肿瘤之一,且以中低位多见,对于距肛门低于5 cm的低位直肠癌,过去常规行腹会阴联合切除术（APR）,不仅手术创伤大,而且永久性造口也为患者生理和心理带来极大的痛苦。近年来随着对直肠癌特点的深入认识、术前新辅助治疗的开展及手术器械和术者技术的发展,在肿瘤根治的前提下,吻合口的位置也不断地向更低的位置挑战,功能保护和改善术后生活质量已成为低位直肠癌治疗的重要目标。内括约肌切除术（ISR）为低位直肠癌患者带来了更多保肛的机会,并且其根治效果及肛门功能皆令人满意。本文将对ISR的研究现状及进展、肿瘤学和功能预后等作一综述。     

结核抗体检测联合结核感染T细胞斑点试验的临床诊断价值

目的 探讨结核抗体检测联合结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)在结核病诊断中的应用价值。方法 选择2016年1月1日至2017年4月12日就诊于北京老年医院的961例结核病患者[结核病组;包括364例菌阳肺结核患者(通过细菌学诊断确诊)和597例菌阴肺结核患者(通过临床进行诊断)]和非结核病的1046例患者(对照组)。所有患者同时使用上海奥普生物医药有限公司及新加坡MP生物医学亚太私人有限公司生产的结核抗体金标试剂(分别为TB-DOT、ASSURE TB试剂盒)检测血清中的结核抗体;961例结核病组中的574例及1046例对照组中的664例患者同时使用T-SPOT.TB试剂盒和2种结核抗体金标试剂进行检测。对两组患者采用3种实验室技术进行检测或联合检测(包括串联与并联),对检测结果的敏感度、特异度进行统计学分析。结果 TB-DOT和ASSURE TB检测结核病组和对照组患者的敏感度和特异度分别为52.86%(508/961)、74.95%(784/1046)和45.99%(442/961)、76.00%(795/1046)。TB-DOT 和ASSURE TB对菌阳和菌阴肺结核患者检测的敏感度分别为64.84%(236/364)、62.09%(226/364)和45.56%(272/597)、36.18%(216/597);菌阳肺结核患者TB-DOT和ASSURE TB检测的敏感度均高于菌阴肺结核患者,差异均有统计学意义(χ ²值分别为60.99、33.69,P值均<0.05)。结核病组和对照组患者在2种结核抗体金标试剂和T-SPOT.TB试剂盒的串联联合检测中,敏感度为24.04%(138/574),但特异度达到89.91%(597/664);并联联合检测中,特异度为21.23%(141/664),但敏感度达到89.55%(514/574)。结核病组和对照组在ASSURE TB、TB-DOT和T-SPOT.TB 3种检测方法中,均为阳性和均为阴性两种谱型的构成比分别为24.04%(138/574)、10.09%(67/664)和10.45%(60/574)、21.23%(141/664),差异均有统计学意义(χ ²值分别为43.37和26.32,P值均<0.05)。 结论 两种结核抗体与T-SPOT.TB行串联联合检测能够提高检测特异度,并联联合检测能够提高检测敏感度;串联联合检测时,3种检测方法结果均为阳性和均为阴性两种谱型在临床上对结核病血清学诊断具有辅助诊断价值。     

129株非结核分枝杆菌采用两种分子检测技术行菌种鉴定的结果分析

目的 分析北京地区3个单位非结核分枝杆菌 (NTM)临床分离株采用芯片杂交法(简称“芯片法”)和16S rRNA基因测序(简称“基因测序”)进行菌种鉴定的结果,为临床分枝杆菌病的快速准确诊断提供科学依据。方法 用芯片法和基因测序进行北京地区3个单位129株NTM临床分离株的菌种鉴定,实验操作者之间采用双盲法,对两种鉴定方法的结果进行比较和评价。结果 129株NTM菌株中,有107株进行分枝杆菌基因测序,其中59株为胞内分枝杆菌(55.1%);29株为堪萨斯分枝杆菌(27.1%);5株为龟分枝杆菌/脓肿分枝杆菌(4.7%);3株为鸟分枝杆菌(2.8%);2株为偶发分枝杆菌(1.9%);2株为戈登分枝杆菌(1.9%);1株为蟾蜍分枝杆菌(0.9%);1株为草分枝杆菌(0.9%);1株为瘰疬分枝杆菌(0.9%);4株为其他NTM(3.7%)。有116株进行芯片法分枝杆菌菌种鉴定,且有96株同时进行芯片法和基因测序法检测,两种方法进行菌种鉴定的符合率为88.5%(85/96)。基因测序发现有3株外来菌株,分别为明尼苏达分枝杆菌、熊本分枝杆菌、提门分枝杆菌(M.temen)。结论 北京3家机构NTM菌种以胞内分枝杆菌、堪萨斯分枝杆菌和龟分枝杆菌/脓肿分枝杆菌为主。用芯片法和基因测序对NTM临床分离株进行菌种鉴定的一致率较高。     

结核杆菌特异性细胞免疫反应检测试剂的临床试验

目的验证武汉海吉力生物科技有限公司新研制的"结核杆菌特异性细胞免疫反应检测试剂盒(酶联免疫法)"(简称海吉力试剂)的诊断性能,探讨γ-干扰素释放试验在结核病诊断中的价值。方法以北京万泰生物药业有限公司生产的"结核杆菌相关γ-干扰素检测试剂盒(体外酶联免疫法)"(简称万泰试剂)为对照,同时用海吉力试剂对武汉市医疗救治中心、北京老年医院、河北胸科医院1084例受试者的外周血进行检测,比较两种检测试剂盒的一致性、诊断性能。结果海吉力试剂与万泰试剂检测结果的总符合率为90.6%,Kappa值为0.812(P=0.000)。海吉力试剂的敏感性为80.7%,万泰试剂的敏感性为78.6%,两者差异无统计学意义(χ2=1.64,P=0.20),海吉力试剂的特异性为74.1%,万泰试剂的特异性为75.0%,两者差异无统计学意义(χ2=0.09,P=0.76)。对肺外结核、菌阴结核患者,两种试剂敏感性稍高,差异均无统计学意义(P0.05)。结论新研制的海吉力试剂与万泰试剂具有很好的一致性,两者对结核病的诊断效能相当,对肺外结核、菌阴结核患者的诊断价值较高。