人分泌早期子宫内膜共培养体系对早期鼠胚凋亡的影响

目的研究人分泌早期子宫内膜共培养体系对早期鼠胚凋亡的影响。方法将2一细胞期鼠胚与子宫内膜(A冻融、B传代)共培养以及单一培养液培养(C组)。72h后对桑椹期鼠胚用TUNNEL法进行凋亡检测。结果共培养组鼠胚的凋亡率明显低于单一培养组，且不受内膜细胞传代及冻融的影响；共培养组优质胚胎数均高于对照组，而共培养组之间无明显差异。结论共培养人分泌早期子宫内膜能减少早期鼠胚的凋亡，提高胚胎体外发育的质量，延长体外培养时间。     

滋肾清肝降糖方对2型糖尿病大鼠蛋白酪氨酸磷酸酶1B及氧化应激的影响

目的:研究滋肾清肝降糖方(ZQJC)对2型糖尿病(T2DM)大鼠糖代谢、蛋白酪氨酸磷酸1B(PTP1B)表达及超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和游离脂肪酸(FFA)的影响。方法:70只雄性SD大鼠随机抽取10只大鼠为正常组,其余大鼠采用高脂饲料喂养联合ip 30 mg·kg-1链脲佐菌素(STZ)的方法造T2DM模型,分为模型组、二甲双胍组(Met,0.14 g·kg-1·d-1,ig)、滋肾清肝降糖方低剂量组(0.9 g·kg-1·d-1,ig)、滋肾清肝降糖方中剂量组(1.8 g·kg-1·d-1,ig)及滋肾清肝降糖方高剂量组(3.6 g·kg-1·d-1,ig)。检测药物干预2,4周后各组大鼠空腹血糖(FBG)以及4周后各组大鼠血清中SOD,MDA,FFA的水平及肝细胞匀浆中PTP1B蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组的FBG均升高(P0.01),PTP1B在肝中的表达增加(P0.01);与模型组比较,ZQJC各剂量组可显著降低大鼠血清FBG,FFA和MDA的含量(P0.01,P0.05),升高血清SOD的活性(P0.05),ZQJC可降低PTP1B在肝中的表达。结论:滋肾清肝降糖方对2型糖尿病大鼠有调节糖代谢的作用,抑制PTP1B表达及氧化应激反应可能为其作用机制之一。     

无精子症患者减数分裂遗传重组的研究

目的 探讨无精子症患者精母细胞减数分裂过程中染色体联会与遗传重组的情况.方法 对7名汉族正常人(对照组)和7例汉族无精子症患者,包括2例梗阻性无精子症(obstructive azoospermia,OA)和5例非梗阻性无精子症(non-obstructive azoospermia,NOA)进行睾丸组织精母细胞免疫荧光染色.联会复合体蛋白3(synaptonemal complex protein 3,SCP3)抗体标记联会复合体,DNA修复蛋白(human mutL homologl,MLHl)抗体定位遗传重组位点.结果 OA组和NOA组偶线期细胞比例较对照组均显著增加,差异具有统计学意义(P＜0.05).详细分析粗线期精母细胞MLH1位点数目及分布情况,发现NOA组患者中每个细胞MLH1位点数较对照组显著减少(P＜0.05),常染色体上无MLH1位点的染色体数目较对照组显著增加(P＜0.01),含有至少1条染色体臂上无MLH1位点的细胞比例较对照组增高.分析粗线期精母细胞中SCP3形态时发现,NOA患者中SCP3不完全联会的粗线期精母细胞比例显著高于对照组(P＜0.01).结论 无精子症患者减数分裂过程有延迟现象;NOA患者精母细胞遗传重组MLH1位点的数目和分布出现异常,染色体联会不完全现象增加,这些异常事件可能与NOA患者精子发生障碍有关.     

不同冷冻载体对小鼠MⅡ期卵母细胞玻璃化冻、融技术影响

目的比较不同冷冻方法对小鼠成熟卵母细胞的冻存率和冻后发育潜能的影响,试图建立玻璃化冷冻技术平台,为人类卵母细胞玻璃化冷冻提供理论与技术参考。方法以昆明品系小鼠为实验材料、以玻璃化冷冻技术为基本方法冻存小鼠成熟卵母细胞。实验分为新鲜周期对照组和玻璃化冷冻组,玻璃化冷冻组又再分为开放式拉长麦管(OPS)组、自制麦管组和冷冻叶片(cryoleaf)组,比较其存活率、受精率、卵裂率和囊胚形成率。结果新鲜周期对照组和玻璃化冷冻组之间受精率差异无显著性,卵裂率差异亦无显著性(P>0.05),但是囊胚形成率之间差异有显著性(P<0.05);OPS组与自制麦管组之间存活率、受精率、卵裂率、囊胚形成率之间差异均无显著性(P>0.05);OPS组与cryoleaf组比较存活率之间差异有显著性(P<0.05),受精率、卵裂率、囊胚形成率之间差异均无显著性(P>0.05);自制麦管组与cryoleaf组之间存活率之间差异有显著性(P<0.05),而受精率、卵裂率、囊胚形成率之间差异无显著性(P>0.05)。结论OPS法和cryoleaf法均可以用于冷冻昆明小鼠卵母细胞,但cryoleaf法更安全可靠。     

人类成熟卵母细胞玻璃化冷冻研究

目的:研究人类成熟卵母细胞玻璃化的方法和冷冻液,探讨人类卵母细胞玻璃化冷冻保存的方法及临床应用价值.方法:运用cryoleaf进行人类成熟卵母细胞玻璃化冷冻保存,复苏后行胞浆内单精子注射一胚胎移植或培养至囊胚形成,观察复苏后卵母细胞受精及发育能力.根据冷冻方法分为程序化冷冻组和玻璃化冷冻组,又将玻璃化冷冻组分为自配液冷冻组和成品液冷冻组,比较各组存活率、受精率、卵裂率及囊胚形成率.结果:程序化冷冻组和玻璃化冷冻组间存活率、卵裂率、囊胚形成率均无显著性差异(P＞0.05),但是受精率存在显著性差异(P＜0.05);程序化组与自配液组、成品液组间存活率、卵裂率均无显著性差异(P＞0.05),但受精率存在显著性差异(P＜0.05).成品液组与自配液组、程序化组间囊胚形成率存在显著性差异(P＜0.05).程序化组移植4例,获得临床妊娠并分娩1例,玻璃化组移植7例.获得1例生化妊娠.结论:程序化冷冻与玻璃化冷冻法均可应用于人类成熟卵母细胞,冻融后卵母细胞具备正常受精能力及卵裂能力.玻璃化冻存人类卵母细胞具有更大发展趋势.     

经直肠输精管壶腹部、精囊腺、前列腺按摩取精术用于IVF-ET取卵日取精失败附4例报告

随着现代辅助生殖技术的发展,体外受精-胚胎移植(IVF-ET)及其相关技术成为治疗不孕不育症主要方法之一,对于精液中有精子者一般通过患者手淫取精用于体外受精.     

人卵母细胞第一极体活检对胚胎发育影响的研究

目的 建立第一极体(1PB)的活检方法 ,研究极体活检是否会对胚胎的发育造成不良影响.方法 利用激光打孔法对85枚成熟卵母细胞1PB进行活检,活检后行序贯培养至囊胚阶段.成功活检者和对照组186枚卵母细胞比较,分析受精率、卵裂率及囊胚形成率有无差异.将不同形态的极体分级,比较不同形态的极体活检对胚胎后续发育的影响.结果 成功活检81枚,成功率95.3%.活检组和对照组在两原核形成率、卵裂率及囊胚形成率上均无统计学差异(P>0.05).不同级别形态极体的活检和对照组相应级别相比较,囊胚形成率差异无统计学意义(P>0.05).结论激光打孔法活检极体安全有效.1PB活检不会对胚胎发育造成不良影响,对不同形态极体进行活检也不会影响胚胎后续的发育情况.     

IVF-ET治疗获双胎临床妊娠成功

我院妇产科自辅助生殖技术 (ＡＲＴ)开展以来 ,实施了宫腔内人工受精 (ＩＵＩ)包括丈夫精液人工受精 (ＡＩＨ)和供精人工受精 (ＡＩＤ)、体外受精和胚胎移植 (ＩＶＦ ＥＴ)即“试管婴儿”技术 ,其中ＩＶＦ ＥＴ获2例临床妊娠成功。今年 4月份 ,我院生殖中心对 1例“继发不孕症 ,盆腔广泛粘连 ,双侧输卵管阻塞”患者采用ＩＶＦ ＥＴ治疗 ,获双胎临床妊娠成功 ,现报道如下。1　临床资料患者 ,31岁 ,以“两次人流术后 ,继发不孕 7年”于 1999年 9月在我院行“腹腔镜检查” ,诊断为“盆腔广泛粘连 ,双侧输卵管阻塞” ,于 2 0 0 0年 4月在本中心…     

去颗粒方法对卵母细胞冻融的影响

目的:探讨去除卵母细胞周围部分颗粒细胞对冻融后卵母细胞发育潜能的影响。方法:将来源于行体外受精-胚胎移植(IVF-ET)患者捐赠的43枚多余成熟卵母细胞(MⅡ期)随机分为A、B两组,在不同条件下进行慢速冷冻法冻融。根据不同的去除卵母细胞周围部分颗粒细胞的方法将卵母细胞分为两组,A组:21枚,透明质酸酶消化法去颗粒;B组:22枚,机械法去颗粒。观察不同的去颗粒方法对冻融后的卵母细胞存活率、受精能力及胚胎早期发育力的影响。结果:A组存活率(52.38%vs 77.27%)、受精率(63.64%vs 70.59%)及卵裂率(57.14%vs 75.00%)均略低于B组,但无显著性差异;两组优质胚胎率(50.00%vs 55.56%)、桑葚胚率(25.00%vs 22.22%)及囊胚率(25.00%vs 11.11%)也均无显著性差异(P>0.05)。结论:不同的去颗粒方法不影响卵母细胞冻融后的发育潜能。