利用蛋白质组学技术研究Z24对大鼠给药血浆蛋白质表达的改变

目的利用2-DE-MAIDI-TOFMS/MS技术研究Z24对Wistar大鼠连续5d灌胃给药血浆蛋白质表达的变化,进一步分析Z24对大鼠肝毒性的作用机制。方法雌性Wistar大鼠,每组6只,每天以不同剂量的Z24(0、50、100和200mg/kg),麻醉动物后取血,分离血浆,一部分用于生化指标检测,一部分用于血浆蛋白质组分析,处死动物后取肝组织做病理检查。2-DE分离血浆蛋白,考马斯亮蓝R-250染色,利用ImageMaster2DPlatinum5.0软件进行图像分析,确定发生表达变化的差异蛋白点(P<0.05),选取分离好且呈一定剂量关系的蛋白点进行质谱鉴定,MS/MS-MS方法获取差异蛋白的肽质量指纹图谱和序列信息,在IPI-RATv3.23数据库中进行搜索,以C.I.%>95%作为判断依据鉴定差异蛋白,检索差异蛋白的生物学功能,进一步分析Z24对大鼠肝毒性的作用机制。结果血浆生化检测结果显示,与对照组相比,50mg/kg组ALP、Tch含量升高(P<0.05),100mg/kg组ALP、TG、Tch含量升高(P<0.05),200mg/kg组ALT、AST、ALP、AL、TBI、TG和Tch含量升高(P<0.05);AST、ALP、TBI和Tch含量变化呈剂量-效应关系。肝组织病理结果显示,各给药组动物肝脏均发生了不同程度的肝细胞空泡变性及纤维组织增生,且病变程度随剂量增加而加重。以上结果表明本实验剂量下Z24已引起了大鼠肝损伤。2-DE结果显示,与对照组相比,50、100和200mg/kg组分别有90、111和160个蛋白点发生明显的表达改变(P<0.05),其中100和200mg/kg组同时改变的蛋白点有34个,50、100和200mg/kg组同时改变的蛋白点有38个;对其中的29个差异蛋白点进行了质谱分析,有16个蛋白点经数据库检索后鉴定出相应蛋白,去冗余后包括11种蛋白,包括表达上调的载脂蛋白E、精氨琥珀酸合成酶、血浆视黄醇结合蛋白前体、丛生蛋白前体、触珠蛋白、肌动蛋白前体以及表达下调的胎球蛋白等。结论载脂蛋白E表达上调提示脂类代谢出现紊乱,丛生蛋白与细胞凋亡有关,精氨琥珀酸合成酶与鸟氨酸循环有关,血浆视黄醇结合蛋白的功能是输送肝内储存的视黄醇(VitA)到周围组织,这些蛋白质表达的改变提示Z24的肝脏毒性作用与脂类代谢紊乱及细胞凋亡有关,进而引起了肝脏功能的改变。     

PCR技术检测DMD/BMD的策略和方法

假肥大性肌营养不良 (ＤＭＤ/ＢＭＤ)是由营养不良性基因突变引起的Ｘ 连锁性疾病。应用分子遗传学分析方法检测突变 ,在常规诊断实验中很难实现 ,主要是由于基因的大小和结构所决定的。这段基因长度为 2 4Ｍｂ ,包括 79个外显子 ,这些外显子由 14ｋｂ的ｍＲＮＡ编码。每个外显子均 <2 0 0ｂｐ ,而内含子却在 10 9ｂｐ到 2 0 0ｋｂ以上变化不等。由于发生新突变 (约占ＤＭＤ的 1/ 3) ,基因重组率高于正常水平 (约 10 % ) [1 ] 以及种系镶嵌现象 ,进一步阻碍了其研究[2 ] 。1　策　略建立一套固定的基因诊断程序来分析所有的ＤＭＤ/ＢＭＤ是…     

咪唑安定复合芬太尼在人工流产术中的应用

传统的异丙酚无痛人流方法，术中患者处于全麻状态，存在呕吐、误吸的危险，术中躁动影响手术操作的情况有一定发生率。再因其价格高，临床难以推广。近年来，我院采用咪唑安定复合芬太尼用了人工流产术，收到了良好效果。     

应用MDP程序计算茶碱药代动力学参数实例报告

本文以一呼吸暂停的早产儿应用茶碱为例,研究了多剂量给药过程中,在每次用药后分散采集血样,应用MDP程序求得药代动力学参数的方法。结果表明,方法可行,所得数据与文献报道的一致。该方法灵活方便,尤其适合于临床治疗情况下的药代动力学研究。     

小儿胃癌一例

患儿．女，9岁．入院前14天开始呕吐，口吐2～3次，晚间为甚．经对症治疗无效伴有黑邑稀便，贫血貌，坐位时上腹部可触及鸡蛋大小包块，质中等．无明显压痛．大便和呕吐物隐血试验均阳性，全身淋巴结无肿大．     

131例儿童肱骨髁上骨折手术疗效分析

非手术治疗对大多数儿童肱骨髁上骨折有较好的疗效 ,但仍有一部分病例需要手术治疗。为探讨影响手术疗效的因素及合理的手术途径 ,本文将我院 1 987年 1月至 1 999年 1 2月间用手术治疗并获得半年以上随访的 1 31例儿童肱骨髁上骨折报告如下。1　临床资料1 .1　一般资料本组 1 31例 ,男 6 7例 ,女 6 4例 ;年龄 3-1 2岁 ,平均 6 .2岁 ;坠落伤 82例 ,交通事故伤3ｌ例 ,生活伤 1 8例。骨折类型 :本组全部为闭合性骨折 ,伸直型 1 2 6例 (其中尺偏型 2 4例 ,桡偏型 5 2例 ) ,屈曲型 5例 (全部为尺偏型 )。按Ｇａｖｌａｏｄ分类 ,Ⅱ型 (有移位 ,但…     

投照中使用监视器有严重负作用

<正> 现代X线投照中借用监视器透视定位摄取点片的作法已相当普遍,但是有关患者的辐射问题却很少有人问津,为此,笔者进行了剂量监测,并探讨了有关问题,提出了一些可行性建议。 1.材料与方法 1·1 监测对象与材料:中等体型的投照病人7例,《热释光个人剂量计》8只。 1·2 方法:监测分七组实施。第一组为胸部正位点