细胞信号转导信使磷脂酰肌醇3—激酶和卵巢癌的关系

磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)是一种与细胞信号转导有关的脂类第二信使。在人类肿瘤中，已发现PI3K级联信号途径的各成员具有基因结构，蛋白质表达和激酶活性等的异常改变。PI3K在卵巢癌中有异常表达，为肿瘤早期诊断、开发新的抗肿瘤药物和寻找新的基因治疗靶点提供了新的思路。     

宫颈癌细胞株Hela中CSN6对E6-AP及p53的调节及其分子机制

目的:探讨宫颈癌细胞株Hela中组成型光形态发生因子9信号复合体6(CSN6)对E6-AP及其目标蛋白p53的调节及其分子机制。方法:重组慢病毒干扰载体质粒转染Hela细胞,降调CSN6表达。Western blot法检测E6-AP表达,实时荧光定量PCR检测p53下游基因表达变化。分别将蛋白酶抑制剂MG132、真核生物蛋白合成抑制剂放线菌酮(CHX)和高表达CSN6的Flag-CSN6质粒分别作用于Hela细胞,Western blot法检测E6-AP蛋白表达。将重组慢病毒质粒shRAN CSN6转染Hela细胞48h后,泛素化检测分析CSN6调节E6-AP蛋白表达的分子机制。试验组裸鼠皮下接种shRNA-CSN6细胞株,对照组接种shRNA-vector细胞株,观察肿瘤体积变化。结果:放线菌酮(CHX)可下调E6AP表达,抑制CSN6表达后E6-AP下调更显著;MG132可使E6AP表达增加,CSN6可加强该作用;抑制CSN6表达后,Hela细胞和裸鼠肿瘤组织中p53下游相关基因表达增加,裸鼠肿瘤生长缓慢。泛素化检测提示,CSN6可抑制E6-AP蛋白的泛素化水解,并呈剂量依赖性。结论:宫颈癌细胞株Hela中CSN6上调E6AP是通过抑制E6-AP蛋白的泛素化水解,稳定其在细胞中的表达,实现对p53的持续降解。     

miR-483-5p在上皮性卵巢癌中的表达及其对顺铂敏感性的影响

背景与目的：顺铂是目前临床上治疗上皮性卵巢癌的一线化疗药物之一,但许多患者对铂类药物耐药。miR-483-5p在肺癌中过表达,然而目前尚未见miR-483-5p在上皮性卵巢癌中的研究。该研究检测miR-483-5p在上皮性卵巢癌组织和上皮性卵巢癌细胞系中的表达并探讨其对上皮性卵巢癌细胞对顺铂敏感性的影响。方法：采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)检测43例上皮性卵巢癌患者的肿瘤组织、8例正常卵巢组织和5种上皮性卵巢癌细胞系中miR-483-5p的表达情况;通过慢病毒上调或敲低卵巢癌细胞miR-483-5p表达,应用CCK-8实验检测miR-483-5p对上皮性卵巢癌细胞系顺铂敏感性的影响。结果：上皮性卵巢癌组织中miR-483-5p表达明显高于正常卵巢组织(P<0.01)。此外,miR-483-5p在晚期上皮性卵巢癌组织中的表达水平显著高于早期肿瘤组织(P<0.05)。5种上皮性卵巢癌细胞系中SKOV3细胞表达miR-483-5p的量最低;miR-483-5p在上皮性卵巢癌顺铂耐药A2780/CP细胞中表达量最高。上调SKOV3细胞中miR-483-5p的表达能够降低上皮性卵巢癌细胞对顺铂的敏感性,并下调p21及Bcl-2的表达;下调A2780/CP细胞miR-483-5p的表达能够增加细胞对顺铂的敏感性,并上调p21及Bcl-2的表达。结论：miR-483-5p在上皮性卵巢癌组织中高表达并对顺铂耐药,可以作为临床预测上皮性卵巢癌对顺铂敏感性的生物标志物之一。     

抗IGF-ⅠR抗体联合顺铂对卵巢癌细胞及其移植瘤的抑制作用

目的：察抗胰岛素样生长因子Ⅰ型受体（insulin-like growth factor-Ⅰ receptor,IGF-ⅠR）单克隆抗体4F2联合顺铂对卵巢癌细胞及其移植瘤的生长抑制作用。方法：Western blotting检测4种卵巢癌细胞（CAOV3、ES2、SKOV3和Hey细胞）中IGF-ⅠR的表达;流式细胞术检测抗IGF-ⅠR单抗4F2与各卵巢癌细胞系的结合特异性;Western blotting检测4F2对SKOV3和 CAOV3细胞内IGF-ⅠR磷酸化水平的影响,CCK-8检测4F2、顺铂单用或联用对卵巢癌细胞的生长抑制作用;建立卵巢癌SKOV3、CAOV3细胞裸鼠移植瘤模型,观察4F2、顺铂单用或联合治疗对裸鼠移植瘤生长的抑制作用。结果：IGF-ⅠR在4种卵巢癌细胞中的表达水平由高到低为SKOV3、CAOV3、ES2,Hey细胞不表达, 4F2与SKOV3、CAOV3、ES2细胞均能特异性结合,并且4F2能够抑制IGF-ⅠR的酪氨酸磷酸化。联合组顺铂为0.2 μg/ml时细胞生长抑制率即显著高于4F2单抗组[SKOV3：（47.4±3.1）% vs (5.3±0.6）%;t=3.126,P=0.007。CAOV3：（51.6±2.3）% vs (8.2±1.8）%;t=3.516,P=0.009]及顺铂组[SKOV3：（47.4±3.1）% vs (30.5±4.1）%;t=2.933, P=0.027。CAOV3：（51.6±2.3）% vs (28.9±2.3）%;t=3.226,P=0.034];在体内,联合组对卵巢癌种植瘤小鼠肿瘤的抑制率亦显著高于4F2单抗组[SKOV3：（87.3±3.1）% vs (41.6±4.9）%;t=2.29, P=0.004 3。CAOV3：（86.6±3.5）% vs (42.1±7.7）%;t=3.02,P=0.009 1]及顺铂组[SKOV3：(87.3±3.1)% vs (28.9±5.5)%; t=2.56, P=0.008 7。CAOV3：（86.6±3.5）% vs (32.7±4.1）%;t=2.91,P=0.007 3]。结论：4F2单抗特异性结合IGF-ⅠR阳性卵巢癌细胞,联合顺铂能够协同抑制卵巢癌细胞及其移植瘤的生长。     

细胞信号转导信使磷脂酰肌醇3-激酶和卵巢癌的关系

磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)是一种与细胞信号转导有关的脂类第二信使.在人类肿瘤中,已发现PI3K级联信号途径的各成员具有基因结构,蛋白质表达和激酶活性等的异常改变.PI3K在卵巢癌中有异常表达,为肿瘤早期诊断、开发新的抗肿瘤药物和寻找新的基因治疗靶点提供了新的思路.     

腹腔镜下子宫腺肌病病灶切除术治疗子宫腺肌病的临床分析

目的:观察腹腔镜下子宫腺肌病病灶切除术治疗子宫腺肌病的临床疗效。方法:2008年1月至2010年6月对74例子宫腺肌病患者行腹腔镜下子宫腺肌病病灶切除术。术后定期随访患者,观察临床疗效,包括痛经程度、月经情况(周期、经期、经量)、贫血及子宫体积的变化。结果:术后1、3、6、12、24个月痛经消失和明显缓解的患者分别为64例(86.5%)、68例(91.9%)、60例(81.1%)、51例(68.9%)和31例(41.9%);术前53例月经过多患者中45例术后月经量明显减少(P0.05);术前45例贫血患者,术后血红蛋白明显升高(P0.05);术后患者子宫体积较术前明显缩小(P0.05);术后患者月经周期和经期无明显改变(P0.05)。结论:腹腔镜下行子宫腺肌病病灶切除术治疗子宫腺肌病的近期疗效明确,对年轻希望生育或要求保留子宫的子宫腺肌病患者可作为一种可选择的微创手术方式。     

半乳糖凝集素-3 (Gal-3)在上皮性卵巢癌中的表达及其对增殖、迁移和侵袭的影响

 目的  研究半乳糖凝集素-3(galectin-3,Gal-3)在上皮性卵巢癌中的表达及对人上皮性卵巢癌细胞株增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法  分别采用real-time PCR和Western blot法检测上皮性卵巢癌中Gal-3的mRNA及蛋白表达;在上皮性卵巢癌细胞中运用小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)和慢病毒感染方法,分别下调和过表达Gal-3后,采用CCK-8试剂盒检测细胞的增殖,Matrigel和Transwell小室检测细胞的迁移及侵袭能力,蛋白质印迹法检测细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和E-钙黏蛋白(E-cadherin)的蛋白表达水平。结果  与正常卵巢组织相比,Gal-3在上皮性卵巢癌组织中高表达,并与临床分期有关(P＜0.05)。在上皮性卵巢癌细胞中分别过表达和下调Gal-3后,癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力均相应地增强和下降,与对照组比较均有明显统计学意义(P＜0.001),Cyclin D1和MMP-9蛋白表达分别上调和下调,而E-钙黏蛋白表达分别出现下调和上调。结论  Gal-3在上皮性卵巢癌中高表达,并促进上皮性卵巢癌细胞的增殖、迁移及侵袭。     

血小板活化因子受体在不同病理类型卵巢上皮性癌中的表达及意义

卵巢上皮性癌(卵巢癌)是妇科常见的恶性肿瘤之一,病理类型复杂,包括卵巢浆液性腺癌、黏液性腺癌、子宫内膜样癌及透明细胞癌等.目前的治疗方式仍然是手术及术后辅以铂类和紫杉醇等药物为主的化疗,但效果不满意,5年生存率仍徘徊在40%左右[1].     

人乳头瘤状病毒载量发展与细胞内载量研究进展

高危型人乳头瘤状病毒(HPV)持续感染是发生宫颈病变的主要病因。HPV检测作为宫颈癌初筛方法在国际上已获得广泛认可，但据近5年宫颈癌流行病学数据，其发病率和死亡率并未出现下降趋势。对于仅表现为HPV DNA阳性的患者，缺乏精准、客观的生物学指标来评估发生HPV持续感染及癌前病变的风险。近年来，病毒载量在风险分层、宫颈病变预测等方面显示了不同的临床应用性能，并可以在大范围普查时，同时实现基于风险的二次分流，避免了频繁复查导致的身心焦虑和医疗资源的浪费。本文综述近十来年来HPV病毒细胞内载量检测方法及其临床应用现状，以期加深对病毒载量的认识、了解研究现状，为未来病毒载量的研究寻找方向。