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1.
YRRM1基因检测在无精症病因分析中的应用 总被引:2,自引:0,他引:2
YRRM为无精子因子的重要候选成分,已证明YRRM的丢失可导致无精子或严重少精。应用PCR方法检测核型正常的65例无精症男子和25例严重少精男子基因组DNA中的YRRM,发现6例无精症病人中有YRRM的丢失,严重少精病人中1例有YRRM的丢失。结果表明,应用该方法检测YRRM基因片段是切实可行的,对无精症和严重少精的病因诊断具有一定的应用价值。 相似文献
2.
3.
4.
表达人泛素样修饰子基因细胞株的构建及其鉴定 总被引:1,自引:1,他引:1
目的:构建人泛素样修饰子(hUBL)基因的逆转录病毒载体并转染293T细胞,以探讨其生物学功能。方法:将hUBL克隆到原核表达质粒PET28a中,构建重组质粒PET28a-hUBL,转化BL2l菌,以异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达。用其纯化蛋白免疫小鼠,获得多克隆抗体。重组蛋白用Westernblot鉴定。将hUBL基因克隆到逆转录病毒质粒中并转染293T细胞,用免疫组化染色法鉴定hUBL基因的表达。结果:hUBL在大肠杆菌中获得高效表达,并纯化了hUBL—PET28a的融合蛋白,以此为抗原制备了高效价的抗hUBL蛋白的小鼠多克隆抗体。免疫组化染色表明,hUBL重组逆转录质粒可在293T细胞中高效表达hUBL蛋白。结论:成功地构建了hUBL重组逆转录病毒载体,使得其在293T细胞中表达,获得稳定表达的细胞株。 相似文献
5.
人精子基因克隆HSG_3插入片段的鉴定南京医学院林敏,王黎熔,姜传仓,冯笑川,胡志刚,周作民,沙家豪关键词精子,基因,技术方法在鉴定HSG3插入片段时,我们将常规方法进行改良,并取得较好结果。现将方法介绍如下。1方法(1)扩增重组λgtll:采用本室?.. 相似文献
6.
建立了用精子可溶性抗原包被的ELISA法,检测了100例处女血清,均为阴性,17例有生育能力者和1000例不育患者血清的阳性率分别为5.9%和22%,抗体检出率符合国外多数学者的结果。重复性试验定性符合率达97%。表明用该法检测抗精子抗体具有敏感、特异、稳定等特点,可获较为满意的结果。 相似文献
7.
8.
男性特发性不育症与DAZ基因关系的探讨 总被引:3,自引:2,他引:1
目的探讨特发性无精子症和严重少精子症与DAZ基因的关系及意义.方法应用PCR技术对50例无精子症和严重少精子症患者(其中无精子症38例,严重少精子症12例)的外周血细胞进行DAZ基因检测.结果 50例中发现6例(12%)有DAZ基因微缺失(其中无精子症4例,占8%;严重少精子症2例,占4%);SRY基因PCR扩增均为阳性.50例已有生育的正常男性均无DAZ及SRY的微缺失.结论 DAZ为无精子因子(AZF)的重要候选成分,DAZ微缺失可能是引起无精子和严重少精子并造成男性不育的重要原因之一. 相似文献
9.
胚胎干细胞是一种具有在体外不分化的无限增殖能力,而在一定条件下又能分化为体内多种细胞类型的原始细胞,自1998年美国Thomson等建立人胚胎干细胞系以来,对人胚胎干细胞的建系及开发利用引起了国内外的高度重视,而人胚胎干细胞系的建立以及定向分化的成功与否必须通过鉴定来确定,现就胚胎干细胞和成体干细胞的鉴定如下综述。 相似文献
10.
二维电泳及质谱法分离和鉴定胰腺癌差异表达蛋白质 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 通过分离并鉴定胰腺癌组织、癌旁组织和正常胰腺组织的差异表达蛋白质,发现可能用于早期诊断的胰腺癌肿瘤标志物.方法 用双向电泳分离胰腺癌、癌旁和人正常胰腺组织的总蛋白质.对胰腺癌组织中明显差异表达的蛋白点,行质谱鉴定和生物信息学分析.并对鉴定出的部分蛋白质行免疫印迹验证.结果 建立了稳定、重复性好的凝胶蛋白图谱.对分离出的在胰腺癌组织中明显差异表达的20个蛋白点,成功鉴定出11个蛋白点,其中高表达的有6个,包括:galectin-1、SLP-2、sorcin、3BP-2、BB1和NCC27.Galectin-1和SLP-2在胰腺癌组织中的高表达通过免疫印迹得到验证.结论 胰腺癌组织相对于癌旁、正常胰腺组织蛋白存在明显的表达差异.胰腺癌差异表达蛋白质可能成为用于早期诊断和评价预后的胰腺癌标志物. 相似文献