MicroRNA及其与妇科肿瘤相关性研究进展

近些年来,一类新的非蛋白质编码MicroRNA(miRNA)的出现,为肿瘤研究提供了新的思路。研究发现,肿瘤细胞与正常组织来源细胞间miRNA表达谱具有明显差异,且多数miRNA基因位于与肿瘤形成的相关性脆弱基因位点,从而推测miRNA在肿瘤形成过程中可能扮演着重要的角色。而且,miRNA的异常表达与多种癌症的发生密切相     

miR-17~92基因簇在宫颈癌、子宫内膜癌与卵巢癌多种细胞系中的表达及意义

 目的检测宫颈癌、子宫内膜癌与卵巢癌多种细胞系中miR-17~92基因簇的表达,初步探讨miR-17~92基因簇与妇科肿瘤发生的关系。方法利用实时定量PCR方法配对检测Hela/Siha、Ishikawa/HEC-1A、HO-8910/HO-8910PM、SKOV3/SKOV3-TR30/SKOV3-DDP、COC1/COC1-DDP和CAOV3、OVCAR3中miR-17~92基因簇的表达水平;应用miRWalk数据库、miR2Subpath数据库和KEGGpathway功能聚类分析miR-17~92基因簇调控的靶基因及参与的与肿瘤相关的信号通路。结果与人脐静脉血管内皮细胞系ECV-304相比,miR-17~92基因簇在宫颈癌细胞系Hela与Siha中均呈下调表达（F=9.86,P<0.001）;在子宫内膜癌细胞系Ishikawa与HEC-1A中均呈上调表达（F=10.35,P<0.005）;与人正常卵巢细胞系IOSE386相比,miR-17~92基因簇在卵巢癌细胞系HO-8910、HO-8910PM、COC1、COC1/DDP、CAOV3、OVCAR3、SKOV3、SKOV3-TR30、SKOV3/DDP均呈上调表达（F=12.64,P<0.001）。预测得出miR-17~92基因簇的靶基因为ABCA1、ARHGAP21、BAP1、C10orf46、CCND1、CD4等共30个;通过miR2Subpath数据库富集分析得出miR-17~92基因簇参与的生物学过程共8个,KEGGpathway分析得出miR-17~92基因簇参与的信号通路共11条。结论miR-17~92基因簇在宫颈癌、子宫内膜癌与卵巢癌多种细胞系中表达,且在生物学行为不同的同一肿瘤细胞系中存在差异表达。miR-17~92基因簇可能通过相关的靶基因和信号通路参与宫颈癌、子宫内膜癌与卵巢癌的发生、发展并影响其生物学行为。     

人雌激素硫酸基转移酶基因在雌激素依赖型子宫内膜腺癌组织中的表达及临床意义

目的探讨人雌激素硫酸基转移酶(hEST)基因与雌激素依赖型子宫内膜腺癌发生、发展关系,为其病因学研究提供有意义的帮助。方法采用Western-Blot及RT-PCR方法分别检测中国医科大学附属盛京医院妇科2005年7月至2007年10月40例子宫内膜腺癌组织、20例正常子宫内膜组织、12例不典型增生子宫内膜组织中hEST蛋白及mRNA表达的相对含量。结果 hEST蛋白及mRNA在正常子宫内膜增殖期、分泌期和萎缩内膜组织中的表达差异显著(P<0.01)。hEST蛋白及mRNA在正常子宫内膜组织、不典型增生子宫内膜组织及子宫内膜腺癌组织中的表达含量逐渐降低,三者比较有差异(P<0.01)。hESTmRNA和蛋白含量与子宫内膜腺癌组织学分级、肌层浸润深度、手术病理分期及淋巴结转移等无关(P>0.05)。子宫内膜腺癌组织中,hESTmRNA和蛋白在ER阳性组织中的含量明显高于ER阴性组织,差异显著(P<0.01)。结论 hEST表达降低或缺失可能与雌激素依赖型子宫内膜腺癌的早期形成有一定的关系,但hEST不能作为子宫内膜腺癌病情程度和预后评价的指标。     

卵巢恶性肿瘤261例临床分析

卵巢恶性肿瘤是女性生殖系统常见的肿瘤之．可发生于任何年龄,组织学类型复杂,以上皮性癌多见。因缺乏特异性症状和有效的早期诊断手段,多数患者确诊时已届晚期,预后差,其病死率居妇科恶性肿瘤首位。现将我院1997年1月至2001年12月收治的卵巢恶性肿瘤患者261例报告如下。     

子宫内膜癌手术预后因素的多因素分析

目的：分析和评价子宫内膜癌常用临床病理因素 （绝经前后、 手术病理分期、 组织学分级、 淋巴结转移、 病理类型、 术后辅助治疗、 肌层浸润深度） 和生物学因素 （COX-2、 VEGF、 KDR及ER、 PR） 对子宫内膜癌手术预后的影响, 筛选出对子宫内膜癌手术预后最有显著的影响因素。方法： 将可能与子宫内膜癌预后有关的常用临床病理因素和生物学因素进行单因素分析。通过Cox模型对单因素分析筛选出的影响子宫内膜癌预后的因素进行多因素分析。结果： 137例子宫内膜癌患者中, 通过随访, 共获得确切随访者112例, 5年生存率为83.04%。Ⅰ~Ⅳ期5年生存率分别为89.66%, 80.00%, 53.85%, 0。子宫内膜癌组织中COX-2、VEGF及KDR蛋白的阳性率分别为47.32%、 66.07%及52.68%, 且三者表达具有协同性。COX-2、 VEGF、 KDR蛋白阳性患者5年累积生存率分别为75.47%、 78.38%、 72.88%。将这些临床病理因素及生物学因素进行单因素分析, 结果手术病理分期、 组织学分级、 肌层浸润深度、 有无淋巴结转移、 COX-2阳性表达、 KDR阳性表达、 ER阳性表达、 PR阳性表达8个因素与预后明显相关 （P均><0.05）, 绝经前后、 病理类型、 术后辅助治疗、 VEGF阳性表达与预后无关 （P均>0.05）。应用Cox模型对单因素分析筛选出的8个有显著意义的因素进行多因素分析表明： 肌层浸润深度、 手术病理分期、 组织学分级是影响子宫内膜癌手术预后最显著的3个因素。结论： 肌层浸润深度、 手术病理分期、 组织学分级是影响子宫内膜癌手术预后的因素, 但浸润肌层是影响子宫内膜癌手术预后的最重要的因素。     

耐药与敏感卵巢癌组织中microRNA表达差异谱检测及分析

目的探讨卵巢浆液性癌化疗耐药与敏感组织中microRNA(miRNA)表达差异及参与卵巢浆液性癌耐药形成的分子机制。方法 2008年8月至2011年8月在中国医科大学附属盛京医院选取化疗耐药与敏感卵巢浆液性癌患者经手术切除的卵巢癌组织标本各4例,分别提取总RNA和miRNA,在miRNA微阵列芯片中杂交检测分析,获得miRNA表达差异谱;利用real-timePCR技术进一步验证化疗耐药与敏感卵巢浆液性癌各4例组织中miRNA表达水平。应用生物信息学软件预测表达差异miRNA可能的靶基因。结果芯片筛选出3个与卵巢浆液性癌耐药相关miRNA,其中2个(has-miR-210与has-miR-1307)表达差异上调,1个(has-miR-134)表达差异下调。Real-timePCR显示has-miR-134、has-miR-210和has-miR-1307表达差异结果与miRNA微阵列芯片结果一致。经过生物信息学预测has-miR-134可能靶基因为MRP1/ABCC1,K-ras,RhoGDI2;has-miR-210可能靶基因为HOXA9,FGFRL1,EFNA3;has-miR-1307可能靶基因为BCL-2,SCN5,CIC。结论 miRNA微阵列分析技术是一种快速、高效的研究生物信息的分子生物学技术;has-miR-134、has-miR-210和has-miR-1307可能通过预测的靶基因参与卵巢浆液性癌耐药形成。     

子宫内膜癌组织COX-2和VEGF及KDR蛋白表达临床意义的探讨

目的:分析子宫内膜癌组织COX-2、VEGF和KDR蛋白的表达及临床意义.方法:应用免疫组化法对112例子宫内膜癌组织COX-2、VEGF和KDR蛋白进行检测.结果:112例子宫内膜癌组织COX-2、VEGF和KDR蛋白的阳性率分别为47.32%、66.07%和52.68%,三者表达具有协同性.Ⅱ+Ⅲ+Ⅳ期子宫内膜癌组织COX-2、VEGF和KDR蛋白表达阳性率分别为68%、88%和72%,高于Ⅰ期41.38%、59.77%和47.13%,P<0.05.低分化子宫内膜癌组织COX-2和VEGF蛋白表达阳性率100%,高于中分化61.11%和69.44%以及高分化的29.69%和57.81%,P<0.05.肌层浸润＞1/2子宫内膜癌组织COX-2、VEGF和KDR蛋白表达阳性率62.5%、96.88%和84.38%,高于肌层浸润≤1/2者41.25%、53.75%和40%,P<0.05.结论:COX-2、VEGF和KDR蛋白在子宫内膜癌织中的表达水平均较高且具有协同性.COX-2、VEGF及KDR是参与肿瘤发生、发展和转移的重要基因.     

雌激素硫酸基转移酶在卵巢浆液性肿瘤组织中的表达及其临床意义

卵巢上皮性癌(卵巢癌)的病死率高居妇科恶性肿瘤首位,近年来虽然卵巢癌的诊治手段取得了一定的进展,但其病死率仍无明显改善.     

HuR VEGF和COX-2 表达及临床病理因素与早期宫颈癌患者预后关系的分析

目的：分析和评价临床病理因素（年龄、临床分期、病理类型、组织学分级、癌灶大小、淋巴结转移）和生物学因素（HuR 、VEGF及COX-2）与早期（Ⅰ～Ⅱ期）宫颈癌手术预后的关系。方法：采用免疫组化方法检测早期宫颈癌组织中HuR 、VEGF及COX-2 蛋白的表达,将可能与预后有关的因素进行单因素分析后再进行多因素分析。结果：癌灶大小、HuR 蛋白阳性表达、COX-2 蛋白阳性表达与预后相关（P 均<0.05）;临床分期、组织学分级、有无淋巴结转移、VEGF蛋白阳性表达与预后明显相关（P均≤0.01）,不同年龄、病理类型与预后无关（P 均>0.05）。 组织学分级低者5 年累计生存率显著低于组织学分级高者,前者死亡危险度是后者的2.948 倍,是影响宫颈癌手术预后的第一位独立因素。其次为VEGF阳性表达,其相对危险度为2.801。结论：早期宫颈癌手术预后与临床分期、组织学分级、癌灶大小、有无淋巴结转移、HuR 蛋白阳性、VEGF蛋白阳性、COX-2 蛋白阳性有关,与年龄、病理类型无关。组织学分级、VEGF蛋白阳性是影响宫颈癌手术预后最显著的独立因素。     

SULT1A1和雌、孕激素受体蛋白在子宫肌瘤中的表达及其临床意义

目的 检测人子宫肌瘤组织、相应肌瘤包膜外肌层组织及正常子宫肌层中硫酸基转移酶1A1(SULT1A1)、雌激素受体亚型(ERα、ERβ)、孕激素受体(PR)的表达,并分析其相互关系.方法 用免疫组化S-P法检测30例子宫肌瘤组织、相应肌瘤包膜外肌层组织及10例正常子宫肌层组织中SULT1A1、ERα、ERβ和PR的表达,用SPSS11.0统计分析软件对其进行统计及相关性分析.结果 肌瘤包膜外肌层组织及正常子宫肌层组织中SULT1A1蛋白的含量明显高于子宫肌瘤组织中含量(P<0.05),子宫肌瘤组织中ERα、PR蛋白表达明显高于肌瘤包膜外肌层组织及正常子宫肌层组织(P<0.05)且与SULT1A1之间均存在显著负相关.结论 ERα、PR是子宫肌瘤发生、发展的促进因素,SULT1A1可能是子宫肌瘤发生过程中的抑制因素.