mRNA疫苗制备方法的优化及验证北大核心CSCD

目的筛选获得高效的mRNA疫苗制备方法,为mRNA疫苗研发提供参考。方法本研究使用了A、B、C三种不同的mRNA疫苗体外合成方法,比较筛选出最优方法并在小鼠体内进行了效果验证。结果3种方式合成的mRNA凝胶电泳条带清晰、完整,紫外分光光度法测定mRNA OD_(260nm)/OD_(280nm)均在1.9~2.0的范围之内,纯度较好。其中,C方法转录后mRNA的浓度最高且体外转录的eGFP mRNA转染细胞后,其表达量更高,持续时间更长。动物体内活体成像也表明,C方法转录的萤火虫荧光素酶(firefly luciferase,Fluc)mRNA经脂质纳米颗粒递送可在动物体内高效表达,并且经该方法合成的登革病毒mRNA疫苗接种小鼠21 d后可产生体液免疫。结论通过对比筛选出的C方法为mRNA疫苗制备的最佳方法,可用于后续各类mRNA疫苗研发。     

新生儿无汗性外胚层发育不良1例

患儿男,19天,因生后持续发热入院。第2胎,足月顺产。无早破水及羊水污染。生后6小体温上升,持续在39℃左右,哭声响,吃奶良好。无抽搐、呕吐及咳喘。药物降温效果差。胞兄第1胎足月顺产,生后第2天发热,持续至第5天不明原因死亡。父母非近亲婚配,家族成员中无类似病史。体检:体重4kg,身长51cm。体温39.6℃,神清、反应稍差,全身皮肤干燥、无汗毛。头发、眉毛稀疏,睑睫毛缺如。前囟门2cm×2cm,平坦。颈软,双肺呼吸音粗糙,无罗音。心腹检查正常。四肢无畸形。血常规:白细胞16×10~9/L,中性0.8,淋巴0.2,血红蛋白91.8g/L。胸片正常。拟诊为“新生儿败血症”。用抗生素、激素静点,暴露降温,体温波动在38—40℃,吃奶、睡眠正常。7天血培养阴性,查头颅平片齿胚缺如,皮肤发汗试验无出汗。诊断本病,停用药物治疗,每日用30℃温水洗浴2～3次,体温于次日降致正常。出院半年随访,生长发育良好,随气     

转移因子治疗小儿肠炎疗效观察

我院1986.11～1987.1月在小儿肠炎流行期间试用转移因子治疗48例婴幼儿肠炎,同时设对照组42例;随机分组;发病年龄4月～3岁;两组性别年龄构成无差异。两组90例患儿均有腹泻;发热56例(62.2%),呕吐68例(75.6%);轻度脱水39例,中度脱水44例,重度脱水4例。     

登革病毒多价DNA疫苗构建及免疫保护效果验证北大核心CSCD

目的研究登革病毒(dengue virus,DENV)的多价DNA疫苗pVAX1-EDIII在小鼠体内的免疫原性及其保护作用。方法采用真核表达载体p VAX1,设计并构建含4种血清型登革病毒EDIII结构域的DNA疫苗。在第0、14和42天采用电脉冲肌肉导入方式免疫小鼠。末次免疫后1周,ELISA检测针对4种血清型登革病毒的血清特异性IgG抗体水平;ELISpot检测免疫后小鼠脾细胞分泌特异性IL-4、IFN-γ的水平;体内中和实验检测小鼠免疫后血清对感染DENV和寨卡病毒(Zika virus,ZIKV)乳鼠的保护效力。结果与对照组相比,电脉冲肌肉导入DNA疫苗诱导产生较高滴度的IgG抗体与较强的细胞免疫应答。免疫后血清对致死剂量DENV感染的3日龄乳鼠有完全保护作用,对ZIKV感染C57BL/c 1日龄乳鼠有部分保护作用。结论电脉冲肌肉导入登革DNA多价疫苗免疫可诱导针对4种血清型登革病毒的特异性体液免疫以及细胞免疫应答并能有效抵抗DENV的致死剂量攻毒,对ZIKV也能产生一定的保护效应,具有广谱抗黄病毒感染的潜力。     

东莨菪碱辅佐治疗小儿重症肺炎43例疗效

６个月以下４３例重症支气管肺炎患儿，在综合治疗措施基础上，加入东莨菪碱治疗中毒性脑病。结果在治疗呼吸衰竭及止喘、促进肺部湿罗音消退方面取得了显著效果，与对照组比较，经统计学处理差异有高度显著性。本文对用药方法，药物副作用作了具体介绍，并讨论了东莨菪碱的药理作用。     

放射性碘标记前列腺癌特异性溶瘤重组腺病毒的研究及其稳定性分析

目的 核素125I标记hTERT/PSA双调控增殖型溶瘤腺病毒,构建125I-RSOAds-hTERT/PSA核素-溶瘤病毒标记物,并考察不同反应条件下病毒标记物标记率的影响.方法 125I标记采用N-溴代琥珀酰亚胺(NBS)作为氧化剂进行标记,分别设定不同浓度的溶瘤病毒和NBS进行作用,确定最佳的标记条件.分别考察125I的用量、反应时间、PH值、反应体积对125I-RSOAds-hTERT/PSA核素-溶瘤病毒标记物标记率的影响.采用凝胶柱层析法分离纯化核素-溶瘤腺病毒标记物;纸层析法测定125I-RSOAds-hTERT/PSA标记物不同时间的放射性纯度.结果 125I-RSOAds-hTERT/PSA放化纯度达95％以上,4℃冰箱放置7d其放化纯度基本稳定,保持在93％ ～94％.125I用量为0.5 μL(约0.2 mCi,7.4 MBq),NBS用量为25μg,8×109 VP/mL,125I-RSOAds-hTERT/PSA病毒液用量为100 μL,反应时间为3 min,PH值为7.5,加入PBS体积120 μL为最优条件.结论 核素125I标记hTERT/PSA双调控增殖型溶瘤腺病毒确切可行,标记物在一定条件下放化纯度稳定.