HPLC法测定柴胡口服液中柴胡皂苷a、d的含量

目的建立测定柴胡口服液中柴胡皂苷a、d含量的方法。方法用高效液相色谱法测定制剂中柴胡皂苷a和d的含量。色谱柱:W elchrom C18(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相:乙腈-水(43∶57),检测波长:210 nm;流速:1.0 m l·m in-1。结果柴胡皂苷a线性范围为1.962~11.772μg,r=0.999 8,平均回收率99.66%,RSD为0.10%;柴胡皂苷d线性范围为2.772~16.632μg,r=0.999 9,平均回收率99.68%,RSD为0.28%。结论该方法操作简便、灵敏度高、结果准确、专属性强,能有效的控制柴胡口服液的质量。     

HPLC法测定宁夏产柴胡中柴胡皂苷a、d的含量

HPLC法测定10种柴胡中柴胡皂苷a、d的含量。色谱条件：ODS-C18柱15cm×6．0cm，流动相甲醇-水（77：33），测定波长204nm，结果：10种柴胡中柴胡皂苷a，d含量及其二者比例差异较大，其中柴胡、银洲柴胡、线叶柴胡和窄竹叶柴胡中柴胡皂苷a，d较高。     

RP—HPLC法测定不同品种不同产地柴胡中柴胡皂苷a、d的含量

目的：建立柴胡中柴胡皂苷a、d含量的RP—HPLC测定方法,以分别考察不同种植基地柴胡及野生柴胡中柴胡皂苷a、d的含量。方法：采用BonChrom C18色谱柱（200mm×4．6mm,5μm）,流动相为乙腈-水（40：60）,流速1．0ml·min^-1,检测波长204nm。结果：柴胡皂苷a线性范围为1．94～19．44μg（r=0．9999）,柴胡皂苷d线性范围为1．96～19．60μg（r=0．9998）,柴胡皂苷a平均回收率为99．35％（RSD=1．14％）,柴胡皂苷d平均回收率为99．52％（RSD=1．18％）。不同品种不同产地柴胡中柴胡皂苷a、d含量之和的分布范围为0．44％-0．67％。结论：本法简便快捷,结果准确,重复性好,地道中药材规范化种植（GAP）基地的柴胡皂苷含量较高。     

HPLC法测定柴胡片中柴胡皂苷a的含量

目的:建立HPLC法测定柴胡片中柴胡皂苷a含量的方法。方法:样品经70%甲醇超声提取后,采用HPLC法测定柴胡片中柴胡皂苷a的含量,使用C18色谱柱,乙睛-水(35:65)为流动相.检测波长208nm,流速1.0mL/min。结果:柴胡皂苷a线性范围1.005～9.045μg,相关系数r=0.99964,平均回收率98.92%。结论:样品处理方法合理,方法学考察符合定量要求,结果准确,可用于柴胡片中柴胡皂苷a的含量测定。     

SPE-UPLC-ELSD法测定柴胡中柴胡皂苷a、d的含量

目的：应用超高效液相色谱-蒸发光散射（UPLC—ELSD）检测柴胡中柴胡皂苷a、d的含量。方法：采用Waters Acquity UPLC BEH C18色谱柱（2．1mm×100mm,1．7μm）;以乙腈（A）-水（B）为流动相梯度洗脱（0－3min,43％A;3～9min,43％A→63％A）;流速：0．2mL．min-1：柱温：30℃;ELSD检测器漂移管温度为40℃,气体压力为40psi,测定柴胡中柴胡皂苷a、d的含量。结果：柴胡中柴胡皂苷a在浓度为64．2-385．2Dg·mL—1（r=0．9994）内线性范围良好：柴胡皂苷d在浓度为67．3～403．8μg·mL-1（r=0．9992）内线性范围良好。结论：该方法简便、灵敏、可靠、准确、重现洼好,可作为柴胡的质量控制方法。     

HPLC-ELSD法测定柴胡中柴胡皂苷a、d的含量

目的采用高效液相色谱法测定柴胡中柴胡皂苷a、d的含量.方法采用Alltech C18 (4.6 mm×250 mm,5 μm)色谱柱,甲醇-乙腈-水-冰醋酸(18∶40∶42∶0.2)为流动相,流速1.00 ml/min,Alltech ELSD-500检测器,外标法定量.结果柴胡皂苷a在5.025～15.075 μg 范围呈线性,回收率为96.2%,RSD为1.43%(n=9);柴胡皂苷d在5.670～17.010 μg范围呈线性,回收率为95.0%,RSD为1.76%(n=9).结论本法简便可行,重现性好,可作为柴胡药材质量检测的方法.     

HPLC测定柴胡、春柴胡中柴胡皂苷a、d的含量

目的：测定市售柴胡、春柴胡柴胡皂苷a、d的含量。方法：采用HPLC法,使用C18柱,乙腈一水为流动相进行梯度洗脱,检测波长为210nm,流速1．0ml·min-1,柱温35℃。结果：柴胡皂苷a．d的线性范围分别为0．19-12．13μg（r=0．9999）,0．26～16．52μg（r=0．9999）,回收率分别为96．30％及98．23％。结论：商品柴胡的柴胡皂苷a、d含量差异悬殊,目前市场上作为春柴胡使用的南柴胡地上部分药用价值有待商榷。     

HPLC法测定川产道地药材柴胡中柴胡皂苷a及柴胡皂苷d的含量

目的建立一种高效液相色谱法测定剑阁产柴胡中柴胡皂苷a和柴胡皂苷d含量的方法,为当地的柴胡评价提供依据,考察了基地产两年生柴胡的柴胡皂苷a和柴胡皂苷d的含量。方法采用Phenomenex luna C1(85μm,4.6mm×250mm)色谱柱;以甲醇-水(74∶26)为流动相;流速为0.9mL/min;柱温为35℃,检测波长为200nm,waters2695色谱仪,Waters Empower化学工作站,外标法定量。结果测定基地两年生柴胡中柴胡皂苷a和柴胡皂苷d平均值分别为0.661%和0.712%。结论研究所建立的方法适合基地柴胡中柴胡皂苷a和柴胡皂苷d的定量分析,并且简便可行,重现性好,结果准确可靠。     

空心柴胡不同部位中柴胡皂苷a、d和总黄酮的含量比较

摘 要 目的：比较空心柴胡不同部位中柴胡皂苷a、d和总黄酮的含量,为临床合理使用药用部位提供参考。方法: 柴胡皂苷a、d含量测定采用HPLC法：色谱柱Inertsil C18柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）;流动相：乙腈-水（40∶60）,流速：1.0 ml·min^-1;检测波长：210 nm,柱温：40 ℃,进样量：10 μl。总黄酮的测定采用比色法：检测波长为500 nm。结果: 柴胡皂苷a、柴胡皂苷d和柴胡总黄酮分别在0.21～1.26 mg·ml^-1(r=0.999 6)、0.25～1.51 mg·ml^-1(r=0.999 7)和4.00～25.00 μg·ml^-1(r=0.999 6)范围内与峰面积呈良好的线性关系;平均回收率分别为99.27%(RSD=2.15%,n=6)、99.4%(RSD=2.14%,n=6)和99.03%(RSD=1.34%,n=6）。空心柴胡根中柴胡皂苷a、d含量分别为0.31%、0.50%,其他部位含量较低;总黄酮在花中含量高达8.48%,在叶、茎、根中依次降低。结论:空心柴胡地上部分富含黄酮类化合物,根中柴胡皂苷含量较高,临床使用带根全草比较合理。     

HPLC测定柴胡口服液中柴胡皂苷a、d含量方法的改进

目的:改进HPLC测定柴胡口服液中柴胡皂苷a、d含量的方法.方法:采用Purospher STAR C18色谱柱(4.6mm×250 mm,5μm);流动相:甲醇-0.05％磷酸(80∶20);流速:1.0 ml· min-1;柱温:35℃;检测波长为210 nm.结果:柴胡皂苷a线性范围为0.04192 ～ 2.096 μg,r=0.999 9,平均回收率99.08％,RSD为0.40％;柴胡皂苷d线性范围为0.032 18～1.609 μg,r=0.999 8,平均回收率98.27％,RSD为0.55％.结论:该法灵敏、简便、准确,适用于市售柴胡口服液中柴胡皂苷a、d的含量测定.     

Structure and actions of saikosaponins isolated from Bupleurum falcatum L. I. Anti-inflammatory action of saikosaponins.

Anti-inflammatory action of saikosaponins isolated from the root of Bupleurum falcatum L were examined using female albino rats. The anti-exudative action by granuloma pouch method and the antigranulomatous action by cotton pellet method were demonstrated with i.m. and oral administrations of saikosaponins. The oral administration of saikosaponins in 10 times the dosage of i.m. injection showed almost the same effect. Among saikosaponins isolated from Bupleurum falcatum, saikosaponins a and d, not c, were demonstrated to have anti-inflammatory action. The relationship between structure and action of saikosaponins was discussed. No changes in body weight, adrenal weight, plasma-11-OH-corticosteroid level and hematocrit value were observed.     

HPLC-ELSD法同时测定柴胡中柴胡皂苷a、c、d、f的含量

目的:建立高效液相色谱-蒸发光散射检测(HPLC-ELSD)法同时测定柴胡中柴胡皂苷 a、c、d、f 含量。方法:采用Phenomenex C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-水为流动相进行梯度洗脱(0 min:30:70,40 min:50:50,50 min:50:50),流速1.00 mL·min~(-1),Alltech ELSD-2000ES 检测器,漂移管温度:108℃,气体:空气,流速:3.0 L·min~(-1),柱温:室温。结果:柴胡皂苷 a、c、d、f 分别在0.18～8.84,0.17～8.28,0.21～10.40,0.16～8.20μg的范围内线性关系良好(r 分别为0.9997,0.9999,0.9997,0.9997);平均回收率(n=9)分别为103.3%,99.26%,102.0%,101.7%。结论:本法简便、准确,重复性好,可作为柴胡药材质量检测的方法。     

不同干燥和炮制方法对北柴胡皂苷类化合物的影响

目的以北柴胡中柴胡皂苷a、d及总皂苷的含量为考察指标,评价不同干燥和炮制方法对北柴胡中皂苷类化合物的影响。方法采用HPLC法与可见分光光度法,测定不同干燥和炮制方法的北柴胡中柴胡皂苷a、d及总皂苷的含量。结果不同干燥方法干燥品中柴胡皂苷a、d的含量:红外干燥品>100℃烘干品>微波干燥品>50℃烘干品>晒干品>阴干品,含量差异显著;总皂苷含量:100℃烘干品>微波干燥品>阴干品>红外干燥品>晒干品>50℃烘干品,但差异不大。不同炮制方法炮制品中柴胡皂苷a的含量:生品>鳖血黄酒共炙品>清炒品>蜜炙品>酒拌品>醋拌品>酒炙品>鳖血炙品>醋炙品;柴胡皂苷d的含量:生品>鳖血黄酒共炙品>醋拌品>蜜炙品>酒拌品>酒炙品>清炒品>醋炙品;总皂苷的含量:蜜炙品>醋拌品>酒拌品>鳖血炙品>酒炙品>鳖血黄酒共炙品>醋炙品>生品>清炒品。结论红外、微波、100℃烘干等干燥方法能明显提高柴胡皂苷a、d的含量,总皂苷含量差异不大;炮制品中柴胡皂苷a、d的含量相对于生品都有所下降,其中醋炙品中含量最低,蜜炙品中总皂苷含量升高明显,其他炮制品总皂苷含量变化很小。     

HPLC法同时测定黑柴胡药材中柴胡皂苷a和d的含量

目的:建立同时测定黑柴胡药材中柴胡皂苷a和d含量的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Inertsil C18(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-水(38∶62,V/V),流速为1.0 ml/min,检测波长为210 nm。结果:柴胡皂苷a和d的进样量分别在0.425⁶.375μg和0.1306.375μg和0.130³.250μg范围内与各自峰面积积分值呈良好线性关系(r均为0.999 9);精密度、稳定性和重复性试验的RSD<2%;平均加样回收率分别为96.66%(RSD=1.11%,n=6)和96.20%(RSD=0.78%,n=6)。结论:该方法简便、重复性好,结果稳定、可靠,可用于黑柴胡药材的质量控制。     

Cytotoxicity and anti-hepatitis B virus activities of saikosaponins from Bupleurum species

Saikosaponins, the main active constituents of Bupleurum spp., have been shown to possess immunomodulatory, hepatoprotective, anti-tumor and anti-viral activities. In this study, saikosaponins a, c and d were evaluated for cytotoxicity and anti-hepatitis B virus ( HBV) activities. Results showed that, with the exception of saikosaponins a and d, HBV-transfected human hepatoma cells (2.2.15 cells) cultured with saikosaponin c showed a significantly lower level of HBeAg in culture medium. Saikosaponin c also possessed activity in inhibiting HBV DNA replication; this inhibitory effect was not due to the cytotoxicity of saikosaponin c or its effect on 2.2.15 cell proliferation. Although saikosaponin d exhibited cytotoxicity on 2.2.15 cells, it failed to inhibit HBV multiplication. The cytotoxicity of saikosaponin d against HepG2 human hepatocellular carcinoma cells was due to the induction of apoptosis through the activation of caspases 3 and 7, which subsequently resulted in poly-ADP-ribose-polymerase (PARP) cleavage. DNA fragmentation was clearly noted at more than 6 h after HepG2 cells exposure to saikosaponin d. The present study concludes that saikosaponin c exhibits anti-HBV activity and saikosaponin d possesses potent cytotoxicity against human hepatocellular carcinoma cells.     

Purification of anti-ulcer polysaccharides from the roots of Bupleurum falcatum.

A water-soluble crude polysaccharide fraction (BR-1) prepared from the root of Bupleurum falcatum L. (Japanese name = Saiko) prevented HCl/ethanol induced ulcerogenesis in mice significantly. BR-1 was fractionated into four polysaccharide fractions (BR-2, BR-3, BR-4, and BR-5) by the addition of cetyltrimethylammonium bromide, and the strongly acidic polysaccharide fraction BR-2 showed the most potent inhibition of gastric lesion formation. When BR-2 was further fractionated by anion-exchange chromatography, the most potent anti-ulcer activity was observed in the pectin-like polysaccharide, bupleuran 2IIc. Bupleuran 2IIc was homogeneous as determined by electrophoresis and gel filtration. Bupleuran 2IIc was composed mainly of galacturonic acid with small proportions of arabinose, rhamnose, and galactose, and its average relative molecular mass was estimated to be 63,000 d. BR-2 lost most of its activity after treatment with periodate or digestion with endo-polygalacturonase indicating that the polygalacturonan region and/or the molecular mass may contribute to activity.     

高效液相色谱法测定不同产地柴胡的皂苷a含量

目的:建立柴胡皂苷a的含量测定方法,并测定41种不同产地柴胡中的皂苷a含量。方法:采用高效液相色谱法(HPLC),伊利特C18柱,以乙腈-水(40∶60)为流动相,流速:1.0mL·min-1,检测波长:210nm。结果:柴胡皂苷a在1.92~19.20μg范围内呈良好的线性关系,r=0.9994。平均回收率为96.74%,RSD为1.6%。结论:不同产地柴胡中的皂苷a含量差异较大。     

HPLC测定不同产地与不同部位千层塔中石杉碱甲和石杉碱乙含量

目的:测定不同产地、不同部位千层塔药材中石杉碱甲和石杉碱乙的含量。方法:采用UItimate XB-C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-甲醇-水(10∶55∶240),含0.32%磷酸和0.5%三乙胺,流速1.0 mL.min-1,检测波长309 nm,柱温25℃。结果:测得各地千层塔中石杉碱甲、石杉碱乙最高含量分别为0.0900%和0.0183%,各地石杉碱甲、石杉碱乙最低含量分别为0.0014%和0。结论:所测定的方法简便、可靠、快速,重复性好,结果稳定,适用于千层塔药材中石杉碱甲和石杉碱乙的同时快速含量测定,该研究可为千层塔最佳产地及最佳药用部位的确定提供参考。     

HPLC法测定白木香叶和远志地上部分芒果苷的含量

目的:建立测定白木香叶和远志地上各部分(包括远志整个地上部分、远志叶和远志茎)芒果苷含量的高效液相色谱法,为寻找富含芒果苷的植物资源奠定基础。方法:采用Kromasil 100C18(4.6 mm"250 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.5%磷酸溶液(15∶85)为流动相,等度洗脱10 min,流速为1 mL.min-1,检测波长为258 nm,柱温为30℃。结果:在本色谱条件下,芒果苷和样品中其他成分分离良好,并且浓度在0.116～580μg.mL-1范围内线性良好。加样回收率(n=6)分别为97.5%(白木香叶),97.3%(远志地上部分),97.1%(远志叶),98.5%(远志茎);RSD分别为1.6%,2.1%,1.8%,0.21%。结论:本方法操作简单、快捷、准确,重复性好,可用于测定白木香叶、远志地上部分等不同来源植物中芒果苷的含量。