乙型肝炎病毒核心抗原特异性细胞毒性T淋巴细胞作用的靶细胞的建立

目的建立ＨＢｃＡｇ特异性ＣＴＬ作用的靶细胞系统,为进一步研究ＨＢＶ基因变异对ＣＴＬ细胞毒效应的影响奠定基础。方法采用两种质粒ｐＸＴ１和ＥＢＯ－ｐｌｐｐ构建ＨＢＶＣ基因真核细胞表达载体并转染水生化Ｂ细胞,ＤＮＡ分析和流式细胞仪检测ＨＢＶＣ基因在宿主细胞中的复制、表达。结果在转染重组质植ｐＸＴ１－ＨＢＶｃ和ＥＢ０－ｐｌｐｐ－ＨＢＶｃ的Ｂ细胞中,均能检测到目的基因;分另有８９．８１％和８８．５１％的宿主细胞能检测到ＨＢｃＡｇ;连续培养３周后,分别有８８．３０％和７２．１９％的宿主细胞表达ＨＢｃＡｇ。结论重组逆转录病毒表达载体ｐＸＴ１－ＨＢＶｃ和ＥＢ病毒表达载体ＥＢＯ－ｐｌｐｐ－ＨＢＶｃ转染的永生化人外周血Ｂ细胞能有效地表达靶抗原（ＨＢｃＡｇ）,可作为较为理想的ＨＢＶ特异性ＣＴＬ作用的靶细胞。     

SURGICAL TREATMENT OF HALLUX VALGLUS BY RECONSTRUCTION OF METATARSAL ARCH AND MODIFIED MCBRIDE OPERATION （40 CASES REPORT）

ＳＵＲＧＩＣＡＬＴＲＥＡＴＭＥＮＴＯＦＨＡＬＬＵＸＶＡＬＧＬＵＳＢＹＲＥＣＯＮＳＴＲＵＣＴＩＯＮＯＦＭＥＴＡＴＡＲＳＡＬＡＲＣＨＡＮＤＭＯＤＩＦＩＥＤＭＣＢＲＩＤＥＯＰＥＲＡＴＩＯＮ（４０ＣＡＳＥＳＲＥＰＯＲＴ）ＷｅｎｇＸｉｓｈｅｎｇ（翁习生）；Ｈｅ...     

乙型肝炎病毒DNA转染细胞的一种内参标准:真核细胞报告基因SEAP

目的 建立用真核细胞报告基因ＳＥＡＰ转染人肝癌细胞系及鸡肝癌细胞系（ＬＭＨ）的表达系统,供研究ＨＢＶ基因功能应用。方法 分别将带有分泌性碱性磷酸酶（ＳＥＡＰ）报告基因的ｐＢＣ１２／ＰＬ／ＳＥＡＰ及ｐＢＣ１２／ＣＭＶ／ＳＥＡＰ质粒ＤＮＡ转染Ｈｕｈ７、ＨｅｐＧ２及ＬＭＨ细胞,并用ｐＢＣ１２／ＣＭＶ／ＳＥＡＰ质粒ＤＮＡ与Ｓ基因区变异体的克隆ＨＢＶ ＤＮＡ共转染ＨｅｐＧ２细胞。培养后收取细胞培养液,用ＥＬ     

ABNORMAL CARDIOVASCULAR REFLEXES IN PATIENTS WITH ACHALASIA

ＡＢＮＯＲＭＡＬＣＡＲＤＩＯＶＡＳＣＵＬＡＲＲＥＦＬＥＸＥＳＩＮＰＡＴＩＥＮＴＳＷＩＴＨＡＣＨＡＬＡＳＩＡＧｅＦｅｎｇ（戈烽）；ＬｉＺｅｊｉａｎ（李泽坚）ａｎｄＫｅＭｅｉｙｕｎ（柯美云）（ＰＵＭＣＨｏｓｐｉｔａｌ，ＣＡＭＳ＆ＰＵＭＣ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１...     

TNF,IFN,MHCⅠ类分子基因“正反馈”式放大表达的重组腺病毒载体

目的：为使外源性 Ｔ Ｎ Ｆ, Ｉ Ｆ Ｎ 基因和内源性主要组织相容性复合物Ⅰ类（ Ｍ Ｈ ＣⅠ）分子基因表达呈现“正反馈”式放大效 应,构建在 Ｈ Ｌ Ａ Ｂ７ 启动子调控、 Ｉ Ｒ Ｅ Ｓ连接下协同表达 Ｔ Ｎ Ｆα和 Ｉ Ｆ Ｎβ基因的重组腺病毒载体。方法和结果：从ｐ Ｇ Ｌ３ Ｂ７ Ｔ Ｎ Ｆ及ｐ Ｉ Ｒ Ｉ Ｆ中切下 Ｂ７ｐｒｏ Ｔ Ｎ Ｆ和 Ｉ Ｒ Ｅ Ｓ Ｉ Ｆ Ｎβ基因片段,先后插入ｐ Ｂｌｕｅｓｃｒｉｐｔ Ｓｋ （＋ ）, 构建成ｐ Ｂ Ｌ Ｂ７ Ｔ Ｎ Ｉ Ｒ Ｉ Ｆ。回收 Ｔ Ｎ Ｆα Ｉ Ｒ Ｅ Ｓ Ｉ Ｆ Ｎβ基因片段,连入 Ａｄ Ｃ Ｍ Ｖ Ｌｉｎｋ１ 中,构建成 Ｃ Ｍ Ｖ 启动子驱动表达的 Ａｄ Ｃ Ｍ Ｖ Ｔ Ｎ Ｉ Ｒ Ｉ Ｆ（＋ ）。回收 Ｂ７ｐｒｏ Ｔ Ｎ Ｆ Ｉ Ｒ Ｅ Ｓ Ｉ Ｆ Ｎβ基因片段,连入缺失 Ｅ１ 和 Ｅ３ 区及启动子的 Ａｄ ＢｇｌⅡ中, 构建成 Ｈ Ｌ Ａ Ｂ７ 启动子驱动表达的 Ａｄ Ｂ７ Ｔ Ｎ Ｉ Ｒ Ｉ Ｆ（－ ）。结论：此两种载体为“正反馈”式放大肿瘤免疫原性提供一条新途径。     

造血干细胞移植治疗白血病和淋巴瘤

目的：探讨造血干细胞移植治疗白血病和淋巴瘤的疗效、移植过程中的并发症及其预防和移植后的植活证据及微小残余病灶检测等问题。方法：２例行同胞间异基因骨髓移植（Ａｌｌｏ－ＢＭＴ）、５例行自体外周血干细胞移植（ＡＰＢＳＣＴ）。采用ＣｓＡ＋ＭＴＸ预防ＧＶＨＤ;ＰＧＥ１＋潘生丁预防ＨＶＯＤ;以ＡＰＯＢ、ＳＭ７和Ｄ１Ｓ８０三个位点多态性分析作为植活证据;以ｂｃｒ／ａｂｌ、ＡＭＬ１－ＥＴＯ融合基因或ＩｇＨ基因重排     

ANTITUMOR ACTIVTY OF LAK CELLS FROM THE C0RD BLOOD AND THE PERIPHERAL BLOOD OF NORMALDONORSANDCANCERPATIENTS

ＡＮＴＩＴＵＭＯＲＡＣＴＩＶＴＹＯＦＬＡＫＣＥＬＬＳＦＲＯＭＴＨＥＣ０ＫＤＢＬＯＯＤＡＮＤＴＨＥＰＥＲＩＰＨＥＲＡＬＢＬＯＯＤＯＦＮＯＲＭＡＬＤＯＮＯＲＳＡＮＤＣＡＮＣＥＲＰＡＴＩＥＮＴＳＸｕＸｉｕ，ＣａｏＲｏｎｇｈｕａ，ＨｏｕＧｕｉｈｕａ（Ｄｅｐｔ...     

EFFECT OF VERAPAMIL ONCa~（2＋） INFLUX ANDCVB3－RNA REPLICATION IN CULTURED NEONATALRAT HEART CELLS INFECTED WITH CVB3

ＥＦＦＥＣＴＯＦＶＥＲＡＰＡＭＩＬＯＮＣａ~（２＋）ＩＮＦＬＵＸＡＮＤＣＶＢ３－ＲＮＡＲＥＰＬＩＣＡＴＩＯＮＩＮＣＵＬＴＵＲＥＤＮＥＯＮＡＴＡＬＲＡＴＨＥＡＲＴＣＥＬＬＳＩＮＦＥＣＴＥＤＷＩＴＨＣＶＢ３ＹａｎｇＹｉｎｇｚｈｅｎ；（杨英珍），ＧｕｏＱｉ?..     

A RAPID ESTIMATION OF CELL CYCLE PARAMETERS：ONE HOUR COUNTINUOUS BROMODEOXYURIDINE（BrdUrd）LABELING METHOD

ＡＲＡＰＩＤＥＳＴＩＭＡＴＩＯＮＯＦＣＥＬＬＣＹＣＬＥＰＡＲＡＭＥＴＥＲＳ：ＯＮＥＨＯＵＲＣＯＵＮＴＩＮＵＯＵＳＢＲＯＭＯＤＥＯＸＹＵＲＩＤＩＮＥ（ＢｒｄＵｒｄ）ＬＡＢＥＬＩＮＧ　ＭＥＴＨＯＤＳｈｉＸｕｅｇｅｎｇ（石学耕）（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＢ...     

EXPERIMENTAL STUDY ON THE EFFECTS OF HYPERTHERMIA COMBINED WITH CHEMOTHE－RAPY AND IRRADIATION ON ESOPHAGEAL CARCINOMA IN VITR

ＥＸＰＥＲＩＭＥＮＴＡＬＳＴＵＤＹＯＮＴＨＥＥＦＦＥＣＴＳＯＦＨＹＰＥＲＴＨＥＲＭＩＡＣＯＭＢＩＮＥＤ　ＷＩＴＨＣＨＥＭＯＴＨＥ－ＲＡＰＹＡＮＤＩＲＲＡＤＩＡＴＩＯＮＯＮＥＳＯＰＨＡＧＥＡＬＣＡＲＣＩＮＯＭＡ　ＩＮ　ＶＩＴＲＯＺｈｏｎｇＨｏｎｇ（钟竑...     

人类巨细胞病毒对人胚肺细胞HOX基因表达的影响

应用半定量RT PCR技术研究人胚肺 (HEL)细胞HOX基因的表达状态及人类巨细胞病毒 (HCMV)感染对HEL细胞HOX基因表达的影响。结果发现 :HEL细胞表达HOXB7基因 ;HCMV感染后 ,其表达上调 ;用全反式维甲酸 (ATRA)处理HEL细胞 ,HCMV对HOXB7基因表达的上调作用更强。提示HCMV可能通过影响HOXB7基因的表达导致胚胎发育畸形。 更多还原     

人类巨细胞病毒对人胚肺细胞HOXB1，HOXB1，HOXB5，HOXB6及HOXB9基因表达的影响

目的：研究人胚肺（HEL）细胞HOXB1，HOXB5，HOXB6及HOXB9基因的表达状态及人类巨细胞病毒（HCMV）感染对上述基因表达的影响。方法：采用半定量逆转录－聚合酶链反应（RT－PCR）技术。结果：①HEL细胞表达HOXB5和HOXB6，但不表达HOXB1和HOXB9；②HCMV感染后，HEL细胞HOXB6基因的表达上调，且被HCMV诱导表达HOXB9T，而HOXB5基因的表达无明显改变，HOXB1基因仍旧不表达；③全反式维甲酸（ATRA）能上调HCMV感染后HOXB9基因的表达，但对HCMV感染晚期HOXB6基因的表达有抑制作用。结论：HCMV能诱导HOXB6和HOXB9基因表达异常，这可能在先天性HCMV感染导致胚胎发育畸形中起重要作用。     

人类巨细胞病毒感染对人胚肺细胞HOXB1,HOXB5,HOXB6及HOXB9基因表达的影响

目的 :研究人胚肺 (HEL)细胞HOXB1,HOXB5 ,HOXB6及HOXB9基因的表达状态及人类巨细胞病毒(HCMV)感染对上述基因表达的影响。方法 :采用半定量逆转录 -聚合酶链反应 (RT -PCR)技术。结果 :①HEL细胞表达HOXB5和HOXB6 ,但不表达HOXB1和HOXB9;②HCMV感染后 ,HEL细胞HOXB6基因的表达上调 ,且被HCMV诱导表达HOXB9T ,而HOXB5基因的表达无明显改变 ,HOXB1基因仍旧不表达 ;③全反式维甲酸 (ATRA)能上调HCMV感染后HOXB9基因的表达 ,但对HCMV感染晚期HOXB6基因的表达有抑制作用。结论 :HCMV能诱导HOXB6和HOXB9基因表达异常 ,这可能在先天性HCMV感染导致胚胎发育畸形中起重要作用     

人类巨细胞病毒感染对U251细胞HOXB1基因表达的影响

目的：通过研究人神经胶质瘤U251细胞株的HOX基因表达状态及人类巨细胞病毒(HCMV)感染对U251细胞HOXBI基因表达的影响，以探讨HCMV致畸的可能机制。方法：应用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术。结果：U251细胞表达HOXBI基因；HCMV感染后，U251细胞HOXBI基因表达明显上调；ATRA能显著上调HCMV感染后U251细胞HOXBI基因的表达。结论：HCMV感染能诱导U251细胞HOXBI基因表达上调，HCMV有可能通过调控HOXB基因表达异常引起胚胎发育畸形。     

人类巨细胞病毒感染对神经胶质瘤细胞HOXB5,HOXB6,HOXB7及HOXB8基因表达的影响

以半定量RT -PCR技术检测经人类巨细胞病毒 (HCMV)感染和 /或全反式维甲酸 (ATRA)处理的神经胶质瘤细胞U2 5 1株的HOXB5 ,HOXB6 ,HOXB7和HOXB8的相对表达水平 ,以探讨HCMV致畸的可能机制。结果示 ,未经处理的U2 5 1细胞不表达HOXB5 ,HOXB6及HOXB8,但表达HOXB7;HCMV感染和 /或ATRA处理后 ,细胞仍不表达HOXB5及HOXB6 ,但在第二代时均表达HOXB8,尤以HCMV和ATRA共同处理后更明显 ;第三代后HOXB8的表达恢复正常。HCMV和 /或ATRA处理细胞后 ,HOXB7的表达在第一代即上调 ,第二代、第三代其表达稍下降 ,至第四代时表达又上调。表明HCMV致畸作用可能是通过诱导HOX基因的表达进而调节其它基因的异常表达而实现。     

人类巨细胞病毒感染对神经胶质瘤细胞HOXB5，HOXB6，HOXB7及HOXB8基因表达的影响

以半定量RT－PCR技术检测经人类巨细胞病毒（HCMV）感染和／或全反式维甲酸（ATRA）处理的神经胶质瘤细胞U251株的HOXB5,HOXB6,HOXB7和HOXB8的相对表达水平,以探讨HCMV致畸的可能机制。结果示,未经处理的U251细胞不表达HOXB5,HOXB6及HOXB8,但表达HOXB7,HCMV感染和／或ATRA处理后,细胞仍不HOXB5及HOXB6,但在第二代时均表达HOXB8,尤以HCMV和ATRA共同处理后更明显,第三代后HOXB8的表达恢复正常,HCMV和／或ATRA处理细胞后,HOXB7的表达在第一代即上调,第二代,第三代其表达稍下降,至第四代时表达又上调,表明HCMV致畸作用可能是通过诱导HOX基因的表达进而调节其它基因的异常表达而实现。     

HCMV感染对人胚肺成纤维细胞MCM2和MCM8表达的影响

目的研究HCMV感染对人胚肺成纤维（HEL）细胞微小染色体维持蛋白2（MCM2）和微小染色体维持蛋白8（MCM8）表达的影响，探讨HCMV感染可能的发病机制。方法用HCMV感染血清饥饿法同步化的HEL细胞。HCMV感染的HEL细胞作为HCMV感染组，同时设非感染组为对照组。于HCMV感染后12、24、48、72和96h收获细胞，提取总RNA，采用半定量逆转录-聚合酶链反应技术（RT-PCR）检测HEL细胞MCM2和MCM8 mRNA的表达水平。结果12、24、48、72、96h时2组细胞MCM2和MCM8 mRNA表达水平差异均有显著性（P均〈0.05），12h和24h时HCMV感染组表达水平低于非感染组，48、72、96h时HCMV感染组表达水平明显高于非感染组。非感染组MCM2、MCM8 mRNA表达水平的高峰出现在感染后24h，而HCMV感染组表达水平的高峰则出现在感染后48h，较之有明显滞后。结论HCMV能诱导HEL细胞MCM2及MCM8 mRNA表达异常．使MCM2及MCM8 mRNA表达水平迟滞，这可能是HCMV感染阻滞宿主细胞周期的发病机制之一。     

地塞米松、二甲亚砜及低速离心对人巨细胞病毒复制的影响

本文报道低速离心、地塞米松和二甲亚砜对人类巨细胞病毒AD_(169)株在人胚肺细胞上增殖的影响。结果表明本法能使人类巨细胞病毒的细胞病变分别提前2～3天。地塞米松能增加人类巨细胞病毒AD_(169)株在人胚肺细胞上空斑形成能力约3倍。     

HCMV感染对HEL细胞MCM装载因子Cdc6的影响

目的研究人类巨细胞病毒（human cytomegalovirus，HCMV）感染对人胚肺成纤维（human embryonic lung fibroblastic，HEL）细胞的MCM装载因子Cdc6表达的影响，从分子水平上探讨HCMV的发病机制。方法用血清饥饿法同步化HEL，细胞于G0／G1期，用HCMV感染同步化的HEL细胞作为感染组，同时设模拟感染组为对照组。于感染后12、24、48、72和96h收获细胞，提取总的RNA，采用半定量逆转录一聚合酶链反应（RT-PCR）技术检测Cdc6mRNA的表达水平。结果12、24、48、72和96h两组HEL细胞Cdc6mRNA表达水平均有显著性差异（P〈0．05），12、24和48h时感染组较模拟感染组明显增加，72h和96h时模拟感染组较感染组明显升高。感染组在感染后12h时Cdc6mRNA表达水平最高，后逐渐下降，至72h时达最低水平，96h时又稍有回升；模拟感染组在感染12h时Cdc6mRNA表达水平最高，后逐渐下降,至48h时达最低水平，72h时后开始回升，96h时继续回升。结论HCMV诱导Cdc6mRNA过度表达，导致Cdc6的积聚，最终将影响细胞周期的进程。     

人巨细胞病毒对细胞周期调控靶点-p53的影响

目的:了解HCMV对细胞周期调控靶点p53的影响。方法:建立体外HCMV感染HEL模型，用倒置显微镜观察不同时间下各组HEL的病变效应和用S—P免组化法检测p53蛋白的表达并以FQ—PCR法检测HEL细胞内HCMVDNA拷贝数。结果:(1)HCMV感染使HEL细胞发生病变，细胞内HCMVDNA拷贝数随时间的延长逐渐增加。(2)S—P免疫组化结果提示HCMV感染使HEL细胞p53蛋白的水平升高。结论:HCMV的感染改变了细胞内p53的水平，可能影响其在细胞周期中的正常功能，营造可能有利于病毒复制的环境。