白血病患儿自然杀伤细胞活性的研究

自然杀伤细胞(Natural killer Cell 简写NK 细胞)是体内一组具有自发性抗肿瘤、抗病毒、抗未分化正常组织细胞的效应细胞群,自1978年 Herberman 等发现这种细以来,人们对其复杂而重要的生物学特性进行了广泛,深入的研究,发现 NK 细胞是机体免疫监视的主要细胞,而肿瘤在体内发生与发展取决于机体的免疫监视能力。在成人自血病的研究中发现 NK 细胞活性明显低于正常人。但小儿白血病患者此方面研究较少,因此,我们观察了一些白血病患儿的 NK 细胞活性,对于了解小儿体内免疫功能及指导临床治疗可能具有一定的意义。     

细胞因子对早期NK细胞分化的调节作用

ＮＫ细胞是不同于Ｔ,Ｂ淋巴细胞而能够直接杀伤靶细胞效应的一个特殊淋巴细胞系,由骨髓造血干细胞发育而来,其分化过程受多种细胞因子的调节,其中ＩＬ－２作用ＣＤ３４＾＋造血干细胞产生的ＮＫ可能是ＮＫ前体细胞,具有部分的杀伤活性;ＩＬ－１２是效应最强的ＮＫ细胞激活因子,但是,单独促进生成ＮＫ细胞的分化能力很弱;ＩＬ－１５地骨髓中,可能是ＮＫ细胞分化成熟的天然调节因子;ＩＬ－７可直接诱导ＮＫ细胞产生ＬＡＫ活     

间充质干细胞及其在造血系统疾病治疗中的应用

间充质干细胞(MSC)是骨髓内除了造血干细胞之外的另一重要成分,具有多向分化潜能;体外培养时MSC可分泌多种细胞因子和生长因子,具有长期造血支持功能,造血系统肿瘤基质的组成与功能异常可能与MSC相关。MSC除了可在组织工程中作为重要的替代细胞外,在造血重建、移植免疫和基因治疗等方面也展现出较好的应用前景。     

人NK细胞系的建立及研究进展

随着肿瘤免疫研究的深入,人们对NK细胞的抗肿瘤效应有了新的认识,NK细胞的基础和临床应用研究已成为近年来研究的热点。如何纯化及体外大量扩增建立可连续传代培养的NK细胞系,开展对NK细胞的基础和临床抗肿瘤研究有其重要意义。以下对NK细胞建系状况及临床应用研究进展作一综述。     

Flt3配体在生物治疗中应用的研究进展

Flt3配体（Flt3　ligand，FL）是一种与造血调控有关的早期造血生长因子。FL与造血干细胞表面的Fm样酪氨酸激酶受体3结合，激活造血前体细胞，促进其增殖；与其他细胞因子联合应用，可显著提高造血效应。研究还证实，FL作为一种免疫佐剂，单独或者联合其他细胞因子能在体内外扩增树突状细胞（dendritic　cells，DCs），促进其发育、成熟。树突状细胞是免疫系统中一类重要的专职抗原提呈细胞，能够摄取外来抗原，与自身的MHC形成复合物，提呈给T细胞，显著刺激抗原特异性T细胞反应，在肿瘤免疫治疗中发挥重要作用。和T细胞不同，NK细胞不需要抗原提呈细胞的作用，通过分泌干扰素等细胞因子能够直接杀伤肿瘤细胞；FL联合其他细胞因子能够诱导NK前体细胞（pro—NKcell）的扩增和增殖，进而增强机体的抗肿瘤能力。目前FL已经被应用于造血系统疾病、乳腺肿瘤、前列腺肿瘤、肝脏肿瘤、神经系统肿瘤等疾病的基础或临床研究。此外，在抗感染、抗宿主移植以及自身免疫反应疾病等方面FL也有较好的作用。随着研究的不断深入，FL显示出了优越的生物学效应，展示了其在生物治疗领域中的广阔前景。     

重组人生长激素促进小鼠同基因骨髓移植后造血重建

自体骨髓移植(ABMT)最大问题是ABMT后造血重建过程缓慢,病人在一定间期内处于极易感染状态.近年来发现人生长激素对免疫系统的发育与功能有重要调节作用.已知生长激素在体外可促进红系细胞和粒细胞成熟,但体内资料甚少.我们曾观察到生长激素缺乏的侏儒鼠处于一种造血低水平状态,注射生长激素可部分缓解其造血低能状态.本研究将进一步采用正常鼠模型,观察重组人生长激素(rhGH)对其ABMT后骨髓重建的影响.BALB/c.鼠在致死照     

白细胞介素2活化骨髓

近年来研究发现骨髓细胞在体外与白细胞介素2（IL-2)短期培养后，所产生的白介2活化骨髓(ABM)具有强的体内外抗肿瘤及抗病毒作用，对靶瘤细胞的杀伤效应明显高于LAK细胞或IL-2。采用ABM进行自身骨髓移植(ABMT）并联合IL-2输注治疗可诱发受者产生移植物抗肿瘤作用，且不影响骨髓造血功能的重建．ABM的发现使骨髓由被动的移植物转变为主动的抗瘤成份，从而为自身骨髓移植引入了移植物抗肿瘤作用．这一全新概念为临床骨髓移植减少复发率，进一步清除残留白血病细胞带来了新希望。     

IL-12诱导白血病细胞分化后免疫激活效应的研究

白细胞介素12(IL-12)对T细胞及NK/LAK细胞的活化有多种促进作用,可单独或协同IL-12诱导lFN-γ产生,从而间接发挥抗肿瘤作用.IL-12可促进Thl细胞的分化和增殖,IL-4可以促进Th2细胞的应答,两者之间的相互作用,对免疫平衡的调节具有重要意义.肿瘤细胞的诱导分化治疗,是肿瘤基础和临床研究的重点之一.关于IL-12直接作用于肿瘤细胞,诱导其分化的研究,尚未见文献报道.为进一步探讨IL-12的抗肿瘤作用机制,寻找新的诱导分化疗法,以小     

人外周血树突状细胞的体外扩增及鉴定

树突状细胞(DC)作为抗原提呈细胞,在激发T细胞免疫应答及T细胞依赖性抗体生成中起重要作用,骨髓及外周血的CD34造血前体细胞在GM-CSF和TNF-α的作用下,可在体外分化发育,生成树突状细胞.本研究从正常人外周血分离获得单核细胞,加入100ng/ml hGM-CSF、500U/ml hIL-4,体外培养1周后,获得大量高纯度的树突状细胞,其高表达MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ类分子及共刺激分子B7-1和CD40,能强烈激发同种异体T淋巴细胞增殖,培养条件以应用自体血清或胎牛血清为最佳;单独应用hGM-CSF只能生成巨噬细胞;在培养末期加入TNFα可促进DC进一步成熟.本研究为DC的深入研究与临床应用奠定了基础.     

天然免疫-肿瘤免疫治疗不容忽视的领域

天然免疫是机体抵御病原微生物入侵的第一道防线,因其即时性且缺乏记忆性,在抗感染免疫中被广泛研究,而在肿瘤免疫治疗中研究较少.随着对巨噬细胞和NK细胞的深入研究,天然免疫细胞的抗肿瘤作用也得到一定认可,但因效应细胞在体内的活性、数量、杀伤效率及抗瘤谱有限,使其临床应用受限.然而近年发现一种具有天然抵御肿瘤能力的小鼠,发挥抗肿瘤作用的效应细胞是以中性粒细胞、单核/E噬细胞和NK细胞为主的天然免疫细胞,且该种能力不仅能遗传还能移植,这为肿瘤的免疫治疗带来新的希望.本文将综述上述3种天然免疫中主要的效应细胞在抗肿瘤治疗中的研究进展.     

NK细胞抗肿瘤临床转化研究进展

NK细胞是过继免疫治疗(adoptive immunotherapy,AIT)肿瘤中的一种独特免疫效应细胞,具有短期内大量增殖、调节机体免疫力、抗肿瘤、抗菌、抗病毒、抗衰老等特点,受到普遍关注,临床应用也显示出巨大潜力和广阔前景.本文仅就国际上有关NK细胞抗肿瘤生物学机制、培养和扩增方法、免疫调节作用,以及NK细胞和其他临床肿瘤治疗方法的联合应用,特别是近几年抗肿瘤临床转化的研究现状和进展作一简要综述,并对目前国际上NK细胞治疗中存在的问题和对策进行了有益的探讨.     

IL-2单独或联合IL-12活化骨髓抗肿瘤效应研究

目的 :研究白细胞介素 - 2 (IL - 2 )和白细胞介素 - 12 (IL - 12 )活化骨髓的抗肿瘤效应与重建造血功能 ;探讨活化骨髓的性质和杀伤肿瘤细胞的机制。方法 :测定活化骨髓杀伤肿瘤细胞的活性 ;检测活化骨髓的细胞表面分化抗原 ,特别是CD34 /CD38-细胞群的表达。结果 :活化骨髓与L12 10 细胞、新鲜白血病细胞共同培养后显示有杀伤肿瘤细胞作用 ,以培养 3～ 4天时最强 ;活化骨髓细胞的CD3、CD8、CD16、CD5 6分化抗原表达与新鲜骨髓相比升高 ,有显著性差异 (P <0 0 1)。L12 10 细胞、新鲜白血病细胞与活化骨髓共同培养后分化抗原CD71、CD95表达下降 ,超二倍体、亚二倍体等异倍体减少 ,与对照组相比有显著性差异 (P <0 0 5 ) ;活化骨髓中CD34 /CD38-细胞分化抗原表达与新鲜骨髓相比没有显著性差异 (P >0 0 5 )。IL - 12活化骨髓效靶比 (E∶T)稀释一倍后杀伤白血病细胞活性仍然比IL - 2活化骨髓明显 ;IL - 2联合IL - 12诱导后活化骨髓抗肿瘤活性进一步增强。结论 :活化骨髓具有抗肿瘤效应 ,其中有细胞毒T细胞、自然杀伤细胞的作用 ,也有凋亡机制参与 ;活化骨髓还保留有重建造血的功能 ;IL - 12活化骨髓比IL - 2活化骨髓的活性高 ;且IL - 2联合IL - 12诱导后活化骨髓抗肿瘤活性进一步增强     

用微血管内皮细胞体外扩增的骨髓造血干细胞重建大剂量化疗后的小鼠造血功能

目的探索造血干细胞体外培养扩增的新方法。方法采用磁性细胞分离技术纯化小鼠骨髓血管内皮细胞,将其与骨髓造血细胞一起培养。培养的骨髓细胞移植给大剂量化疗后的小鼠,观察其造血重建功能。结果纯化的血管内皮细胞具有鹅卵石样细胞形态,表达多种内皮细胞相关抗原如ＣＤ３１,ＣＤ３４,ＩＣＡＭ１,ＶＣＡＭ１和凝集素ＢＳ１结合位点。将内皮细胞与骨髓造血细胞共同培养后,骨髓细胞数明显增加,其中６０％为原始的造血细胞,后者移植后能有效重建血功能。结论骨髓微血管内皮细胞能促进造血干细胞体外扩增,并有效阻止其分化。扩增的造血干细胞具有造血重建功能。     

记忆性NK细胞在抗肿瘤研究中的进展

自然杀伤(NK)细胞是骨髓起源的大颗粒淋巴细胞,是固有免疫系统的关键组成部分.NK细胞是一群主要针对肿瘤和病毒感染细胞发挥杀伤活性的免疫细胞,具有无需预先致敏、高效性等特点,在抗肿瘤、抗感染免疫以及调节特异性免疫应答中发挥重要作用.最近,NK细胞已被证明具有类似适应性免疫T细胞和B细胞记忆性的特征.本篇综述在概括了NK细胞记忆性证据和机制的基础之上,探讨了NK细胞免疫记忆性所提供的新见解,并展望了应用NK细胞记忆性在抗肿瘤治疗中的新策略,有助于进一步加深理解和推动记忆性NK细胞在抗肿瘤领域中的科学研究.     

NK细胞在肿瘤过继性免疫治疗中的临床应用与研究进展

目的 自然杀伤(natural killer,NK)细胞是固有免疫细胞,是机体抗肿瘤的第一道防线.NK细胞无需预先致敏即可杀伤肿瘤细胞,具有良好的安全性和抗肿瘤作用.NK细胞作为抗肿瘤过继免疫细胞治疗制剂在世界范围内广泛应用.本文总结NK细胞在肿瘤过继性免疫治疗中的临床应用与研究进展.方法 应用PubMed、Elsevier、Springer、Wiley Online Library和CNKI文献检索系统,以“NK细胞,NK细胞与肿瘤生物治疗,NK细胞与肿瘤过继性免疫治疗”为关键词,检索1964-06-2015-12的有关文献.纳入标准:1)与NK细胞生物学相关的文献;2)与NK细胞体外扩增相关的文献;3)与NK细胞过继治疗血液性肿瘤及实体瘤的Ⅰ期及Ⅱ期临床研究相关的文献;4)与未来NK细胞临床应用研究方向相关的文献.根据纳入标准分析文献81篇.结果 NK细胞对肿瘤的杀伤活性主要取决于细胞表面活化性受体和抑制性受体间的动态平衡.目前,广泛认为基于NK细胞的过继性免疫治疗是具有良好潜力的肿瘤治疗方案.能否在GMP水平体外激活、扩增获得大量的NK细胞对肿瘤的过继治疗至关重要.用于体外扩增的NK细胞的来源包括外周血、脐带血以及干细胞.用于刺激NK细胞扩增的方法也不尽相同,包括可溶性细胞因子、抗体以及其他分子等.目前,自体或同种异体NK细过继疗法在血液或实体肿瘤治疗中广泛应用,但国外更倾向于应用同种异体NK细胞过继治疗.结论 NK细胞在肿瘤的过继性免疫治疗中具有重要临床意义和应用潜力,同时也面临诸多技术难题有待突破.     

增强NK细胞肿瘤杀伤活性的研究进展

调节其他免疫细胞的功能,是机体天然免疫的主要承担者,也是获得性免疫的核心调节细胞,故NK细胞在抗肿瘤免疫中的地位越来越受到重视,随之增强NK细胞肿瘤杀伤活性的研究也逐步深入.可以通过细胞因子、单抗及多功能抗体介导NK细胞活化,通过调节抑制性信号和活化性信号传递加强NK细胞活性,通过免疫药物刺激及基因修饰提高NK细胞功能等多种途径增强NK细胞的肿瘤杀伤作用.结论:研究增强NK细胞杀伤活性的方法,将促进NK细胞在肿瘤免疫治疗中的应用.     

NK细胞的发育,识别与免疫学调节功能

一、引言 NK细胞为“MHC非限制性”,“裸细胞”,“大颗粒淋巴细胞”.NK细胞的发育过程不甚明了.外周血及器官中的成熟NK功能主要根据对某些肿瘤细胞(如人的K562、小鼠YAC-1)的天然杀伤能力而定性定量.上述诸项NK的基本概念近几年均有惊人发展,其在抗癌免疫反应中可探索的空间均得以较大扩展.二、NK细胞的发育生物学1、NK和T、B细胞的共同前体细胞的发现 淋巴类细胞系决定着T、B和NK细胞的产生.人们一直尽力寻找这三类细胞的共同前体细胞.发现小鼠编码锌指纹蛋白(IKAROS)的基因发生突变或Knockout后,HSC向淋巴类细胞的分化被中止,其它造血细胞的分化不受影响,推测IKAROS基因的表达涉及HSC向淋巴类细胞的分化.2、NK细胞与T细胞分化发育的关系 联合重症免疫缺陷综合征(SCID)病人体内缺乏T细胞和NK细胞,但含有B细胞和其它髓样细胞,提示人类T细胞和NK细胞含有共同前体细胞;人类胚胎未成熟NK可表达CD3的所有四条链的基因.成熟NK受IL-2激活仍可表达CD3分子.NK细胞所承担的细胞毒效应与CTL有相近之处,NK细胞分泌细胞因子的种类及数量与Th细胞相近,故倾向认为NK细胞和T细胞为个体发育上关系十分接近的两类细胞.     

白细胞介素21抗肿瘤作用的研究进展

白细胞介素21(interleukin-21, IL-21) 是新近发现的具有免疫调节活性的细胞因子, 属于IL-2细胞因子家族新成员,主要由活化的CD4~+ T 细胞分泌,IL-21与其受体结合后可调节T细胞、自然杀伤(natural killer,NK)细胞和B细胞的增殖、分化和功能,有效增强机体的天然免疫及获得性免疫.在多种肿瘤模型中已证实,IL-21具有抗肿瘤活性,且Ⅱ期临床试验正在转移性黑素瘤和肾细胞癌中进行,其在恶性肿瘤治疗方面具有广泛的应用前景.本文对IL-21的抗肿瘤作用及其联合其他药物在未来肿瘤免疫治疗中的应用前景进行综述.     

自然杀伤细胞抗肿瘤免疫治疗研究进展

摘 要：自然杀伤细胞（NK）是体内不同于T细胞和B细胞的一群大颗粒淋巴细胞,由于其在机体抗病毒感染及肿瘤防御方面发挥重要作用,现已成为肿瘤免疫治疗的研究热点。全文就NK细胞的起源（发育与分化）、表面受体、杀瘤机制、细胞来源及其质量影响因素及目前NK细胞过继免疫治疗肿瘤的进展情况——从实验室扩增到临床应用进行综述。     

白细胞介素-2的抗肿瘤机制及其在急性髓系白血病中的临床应用

白细胞介素-2(IL-2)作为机体免疫网络中最重要的起调节作用的细胞因子,由活化的T或NK细胞以自分泌或旁分泌方式产生,在激活和维持免疫应答以及促进淋巴细胞发育中起着重要的作用,并已应用于肿瘤的临床治疗及试验性研究中,现就IL-2的抗肿瘤机制及其在急性髓系白血病(AML)中的临床应用作一综述.