兔角膜新生血管形成过程中三氧化二砷的抑制作用

目的：观察兔角膜碱烧伤后创面愈合过程中应用不同浓度三氧化二砷对角膜新生血管形成的抑制。方法：本实验于2005-03／2005-09在哈尔滨医科大学第一临床医学院动物实验室及中国农业科学院哈尔滨兽医研究所疫病实验室完成。④建立兔角膜碱烧伤模型。②随机将48只兔分为对照组和3个实验组（三氧化二砷0．1mL组，0．3mL组和0．5mL组），每组12只。对照组结膜下注射0．3mL生理盐水；3实验组结膜下分别注射浓度为lg／L的三氧化二砷0．1mL，0．3mL，0．5mL，2次／周。⑨分别于碱烧伤后第7，14，28天，用裂隙灯显微镜观察兔角膜新生血管的生长情况。各组于各时间点随机处死4只实验动物，利用反转录一聚合酶链反应方法检测兔角膜血管内皮生长因子的表达。结果：①兔角膜碱烧伤后的大体情况：兔角膜的一般状态，实验组比对照组好，并随三氧化二砷剂量的增加而一般状态渐好。②兔角膜碱烧伤后角膜新生血管面积：在各时间点上，各实验组角膜新生血管面积均小于对照组，各实验组分别与对照组比较，差异均有显著性意义（P〈0．05）。③生理盐水及不同剂量三氧化二砷对兔碱烧伤后角膜血管内皮生长因子的作用：在角膜碱烧伤后7d血管内皮生长因子有较高表达[对照组，0．1mL组，0．3mL组，0．5mL组依次为（233．52&;#177;11．84），（158．28&;#177;9．62），（．108．94&;#177;11．48），（0.01&;#177;0．00）ng]，14d达到高峰[对照组，0．1mL组，0．3mL组，0．5mL组依次为（290．01&;#177;30．40），（181．13&;#177;10．64），（13320&;#177;2：14，76），（0．01&;#177;0．00）ng]，28d时明显降低，且对照组明显高于实验组（P〈0．0001），各实验组血管内皮生长因子的表达随三氧化二砷剂量的增加而减少（P〈0．0001）。结论：①低剂量的三氧化二砷对碱烧伤后兔角膜新生血管的形成具有明显的抑制作用。局部应用低浓度三氧化二砷未见眼部不良反应发生。（2）血管内皮生长因子的表达和角膜新生血管形成呈正相关。三氧化二砷通过抑制细胞血管内皮生长因子的表达而抑制血管的生成。     

重组人血管内皮抑素对视网膜新生血管的抑制作用

目的探讨重组人血管内皮抑素（恩度）对高氧诱导的小鼠视网膜病变模型中新生血管的抑制作用。方法将60只C57BL／6J小鼠随机分为正常对照组、高氧对照组、生理盐水对照组与恩度干预组,每组15只。除正常对照组外。其余各组均建立视网膜病变模型。正常对照组与高氧对照组小鼠不做处理,生理盐水对照组于第12天给予腹腔注射0．1mL生理盐水,恩度干预组于第12天给予腹腔注射恩度0．1mL（17．5μg）,连续注射5d,鼠龄17d时,视网膜组织切片行HE染色计数突破内界膜的新生血管内皮细胞核数目;采用免疫组织化学染色法检测视网膜中血管内皮生长因子表达情况。结果高氧对照组和生理盐水对照组突破内界膜的新生血管内皮细胞核数目及血管内皮生长冈子表达阳性率明显高于正常对照组及恩度干预组（P〈0．01）,恩度干预组高于正常对照组（P〈0．05）。结论恩度可抑制小鼠模型中视网膜新生血管形成,有可能成为防治血管增生性视网膜病变的一种方法。     

色素上皮衍生因子对角膜碱烧伤后新生血管形成的抑制

背景：角膜新生血管导致角膜透明性降低,造成严重的视觉障碍.色素上皮衍生因子是一种内源性血管生成抑制剂,其对于角膜新生血管是否具有抑制作用尚不清楚.目的：探索局部运用色素上皮衍生因子对大鼠角膜碱烧伤后角膜新生血管的抑制作用.方法：将20只大鼠随机分为生理盐水组与色素上皮衍生因子组,每组10只.用NaOH溶液将大鼠右眼角膜烧伤诱导产生新生血管.碱烧伤后2组每日分别给予生理盐水和色素上皮衍生因子点眼,并采用裂隙灯显微镜观察和测量各组角膜新生血管生长情况.碱烧伤后12 d处死大鼠,将角膜组织固定切片,行苏木精-伊红染色观察,并进行免疫组织化学染色检测各组大鼠角膜血管内皮生长因子和 CD31的表达.结果与结论：大鼠角膜碱烧伤后3,7,12 d,色素上皮衍生因子组大鼠角膜新生血管面积均小于生理盐水组（P 〈0.05）.角膜碱烧伤后12 d,苏木精-伊红染色显示生理盐水组大鼠角膜产生大量新生血管,角膜组织结构紊乱;色素上皮衍生因子组新生血管较少,角膜组织结构趋于整齐.角膜碱烧伤后12 d,免疫组织化学染色示生理盐水组大鼠角膜上皮和基质层可见血管内皮生长因子大量表达,角膜基质层可见血管内皮生长因子和CD31大量表达;色素上皮衍生因子组新生血管稀少,CD31表达较弱.证实局部应用色素上皮衍生因子可有效抑制大鼠角膜化学伤后的血管新生.     

无缝线骨髓间充质干细胞羊膜移植治疗兔角膜新生血管的实验研究

目的探讨无缝线骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchyme stem cells,BMMSCs）羊膜移植在兔角膜缘干细胞缺损模型的应用效果。方法选择新西兰白兔36只（72眼）,制作兔角膜缘干细胞缺损模型第7天随机分为两组：实验组进行无缝线BMMSCs羊膜移植术组,对照组进行单纯羊膜移植术。分别于术后1、2、3、7、14、28d观察眼压情况、角膜新生血管、角膜透明度、前房反应及泪液分泌情况,术后1周和1个月每组各处死3只兔,摘除眼球,12眼（两组各6眼）作病理切片检查,HE染色观察比较炎症细胞和角膜上皮细胞形态并进行细胞计数。结果裂隙灯检查眼压、前房反应和并发症在组间各时间点差异无显著性（P均〉0．05）。而术后1个月泪液分泌、角膜新生血管和透明度组间比较差异有统计学意义（tch3／=5．692,tcr=6．316,tsr=9．197,P均〈0．05）,HE显示两组角膜上皮数有显著性差异（t=7．287,P〈0．05）,炎症细胞数也有显著性差异（t=9．178,P〈0．05）。结论无缝线BMMSCs羊膜移植应用于兔角膜新生血管中炎症反应小,泪液分泌影响少,角膜透明度高。     

缝线诱导角膜新生血管形成：术后核因子κB表达的动态变化

背景：角膜新生血管化不但严重影响视力，也是同种异体角膜移植术后发生排斥反应的高危因素，因此研究角膜新生血管发病机制和能阻止其形成的抑制剂，一直是眼科学的热点和难点。目的：采用缝线法建立大鼠角膜新生血管模型，以地塞米松作为糖皮质激素类角膜新生血管抑制剂，探讨核因子κB在角膜新生血管发生发展中的作用机制。设计：随机对照的实验研究。单位：南方医科大学珠江医院眼科。材料：实验于2005—01／04在解放军第一军医大学珠江医院眼科完成。选用55只出生二三个月雄性健康清洁级Wistar大鼠。兔抗大鼠核因子κB P65多克隆抗体，兔抗大鼠血管内皮生长因子、细胞间粘附分子1多克隆抗体均购自武汉博士德生物工程有限公司。方法：①实验干预：摸球法随机将大鼠分为生理盐水组（n=25）、地塞米松组（n=25）、正常角膜组（n=5）。生理盐水对照组及地塞米松组大鼠采用缝线法建立大鼠角膜新生血管模型后，分别给予生理盐水及地塞米松眼液点右眼，2滴，次，3次／d，至术后18d。正常角膜组无干预措施。②实验评估：术后1，3，7，12，18d对生理盐水对照组及地塞米松组大鼠进行角膜新生血管生长评分，取各组角膜切片后光镜下观察各组角膜组织学变化，并采用免疫组织化学染色检测各组角膜核因子κB与细胞间粘附分子1、血管内皮生长因子的表达。主要观察指标：①角膜新生血管生长评分。②角膜组织学变化。③各组角膜核因子κB与细胞间粘附分子1、血管内皮生长因子的表达。结果：①角膜新生血管生长评分：地塞米松组角膜新生血管受到了明显的抑制，其术后各时间点的角膜新生血管评分均低于生理盐水组（P〈0．05～0．01）。②角膜组织学变化：地塞米松组角膜缝线诱导后新生血管及炎性细胞浸润均较对?     

不同浓度血管抑素抑制大鼠角膜血管的新生

背景:血管抑素在角膜中是否抑制组织中的新生血管生长尚不清楚。目的:观察血管抑素溶液对大鼠角膜新生血管生长的作用。方法:24只大鼠制备左眼碱烧伤角膜新生血管模型,随机抽签法分为4组,对照组给予生理盐水,25,50,75mg/LAS组分别给与25,50,75mg/LAS血管抑素溶液滴眼,4次/d至实验结束。结果与结论:造模后第3天各组角膜均可见少量血管新生,但对照组角膜新生血管生长较其他3组明显。3～7d,各组角膜新生血管生长速度加快,对照组角膜新生血管粗大。烧伤后14d,对照组角膜新生血管仍然粗大未见明显消退,各浓度组较前消退明显。碱烧伤后不同时间点各浓度组角膜新生血管面积较对照组少(P<0.05),75mg/LAS组碱烧伤14d各时间新生血管面积较其他3组减少(P<0.05)。Real-TimePCR结果显示:各浓度组间CD31mRNA表达差异均有显著性意义(P<0.01)。Westernblot结果显示血管抑素作用大鼠后,各浓度组角膜组织的CD31表达均较对照组降低,且随着血管抑素溶液浓度的增加而减少。提示血管抑素能够阻止角膜新生血管的生长。     

iNOS在碱烧伤角膜新生血管形成中的表达及意义

【目的】探讨碱烧伤后角膜新生血管形成过程中诱导型一氧化氮合成酶 (iNOS)的表达及作用。【方法】采用碱烧伤诱导角膜新生血管模型 ,将 2 6只SD大鼠随机分成三组 :A组为对照组 ,B组为治疗组 ,C组为正常组。治疗组给予 1%L NAME滴眼液局部应用。采用裂隙灯照相 ,免疫组织化学染色 ,多媒体彩色图像病理分析系统分别计算d7角膜新生血管面积和iNOS免疫组化染色的平均光密度值。【结果】正常大鼠角膜上皮基底膜和基质层即表达iNOS ,新生血管对照组iNOS表达明显增强 ,L NAME治疗组其表达明显受抑制。【结论】iNOS表达水平与炎性角膜新生血管明显相关 ,局部应用 1%的L NAME滴眼液通过抑制iNOS的表达而产生抗新生血管的作用。     

兔角膜碱烧伤模型房水中肿瘤坏死因子α及血管内皮生长因子表达与姜黄素的抑制

背景：稳定的角膜新生血管动物模型是研究角膜新生血管调控机制,姜黄素对碱烧伤角膜新生血管具有抑制作用和保护作用。目的：探讨姜黄素对碱烧伤角膜新生血管模型中肿瘤坏死因子α及血管内皮生长因子表达的影响,为防治角膜新生血管提供理论依据。方法：纳入33只新西兰大耳白兔,随机取3只设为正常组,其余30只建立兔角膜碱烧伤诱发角膜新生血管模型,右眼设为对照组给予生理盐水,左眼设为干预组给予姜黄素,裂隙灯观察角膜新生血管生长及角膜混浊情况,酶联免疫吸附实验检测肿瘤坏死因子α和血管内皮生长因子在房水中的表达。结果：正常组没有角膜新生血管生成。与对照组比较,干预组角膜新生血管受到抑制且角膜混浊较轻（P〈0.05）。房水肿瘤坏死因子α和血管内皮生长因子在3组中均有表达,对照组和干预组明显高于正常组,但干预组低于对照组（P〈0.05）。说明姜黄素可以有效降低角膜碱烧伤后房水肿瘤坏死因子α及血管内皮生长因子的表达进而抑制兔角膜碱烧伤后角膜新生血管的生长。     

雷帕霉素滴眼液对兔角膜新生血管的抑制作用

背景:雷帕霉素为抗移植排斥反应的药物,近年来有实验证实雷帕霉索能有效抑制小鼠视网膜及虹膜新生血管.目的:验证新型免疫抑制荆雷帕霉素对碱烧伤诱导兔角膜新生血管的影响,并与地塞米松相比较.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2007-07/2008-02在重庆医科大学基础研究所免疫组织化学实验室及神经病学重点实验室完成.材料:选用健康成年新西兰家兔30只30眼,制作中度碱烧伤诱导的兔角膜新生血管模型.方法:将造模成功的30只兔30眼按随机数字表法分为5组(n=6),即10,20 mg/L雷帕霉素组、2.5 g/L地塞米松组、雷帕霉素溶媒组及空白对照组,空白对照组不给予任何干预措施,其余各组均于碱烧伤后第2天给予相应药物滴眼,4次,d.主要观察指标:于碱烧伤后第3,7,14天应用显微镜观察各组兔角膜新生血管的长度及面积,用免疫组织化学方法定性观察血管内皮生长因子的表达.结果:①10,20 mg/L雷帕霉索组、2.5 g/t,地塞米松组兔角膜新生血管的长度与面积均小于雷帕霉素溶媒组及空白对照组(P＜0.01).其中10,20 mg/L几雷帕霉素组小于2.5 g/L地塞米松组(P＜0.05),不同剂量的雷帕霉素组差异不明显.②角膜血管内皮生长因子在10,20mg/L雷帕霉索组及2.5 g/L地塞米松组表达减弱.在雷帕霉素溶媒组与空白对照组表达增强.结论:局部滴用10,20 mg/L雷帕霉素滴眼液及2.5 g/L地塞米松滴眼液均可抑制碱烧伤诱导兔角膜新生血管的生长,雷帕霉素作用强于地塞米松.     

三七和丹参对视网膜新生血管化小鼠血管内皮细胞生长因子的影响

目的：了解活血化瘀中药三七和丹参对视网膜新生血管形成的小鼠血管内皮细胞生长因子的影响．方法：实验于2003-05／2003-06在广州中医药大学中药学院完成。C57BL／6J幼小鼠40只，随机分为正常对照组、模型对照组、三七组、丹参组，每组10只、建立氧诱导的血管增生性视网膜病变幼鼠模型，模型对照组、三七组、丹参组动物均置于密闭容器内，容器内氧气分压控制为75％；正常对照组在正常空气环境下饲养。5d后将动物取出置于正常空气环境下饲养，三七组每天腹腔注射血栓通注射液（三七总皂苷35g/L）1次，丹参组每天腹腔注射丹参注射液1次，按10mL／kg体质量给药，正常对照组及模型对照组每天腹腔注射等容积生理盐水1次。5d后所有动物自眼球取血，采用双抗体夹心法测定血清血管内皮细胞生长因子含量。结果：实验小鼠40只全部进入结果分析。血管内皮细胞生长因子含量：丹参组低于模型对照组[（15．65&;#177;2．51），（19．34&;#177;4．88）ng／L，P〈0．05]；三七组和正常对照组低于模型对照组[（12．87&;#177;3．26），（9．28&;#177;1．26）ng／L，P〈0．01]。结论：活血化瘀药物三七和丹参能减少血管增生性视网膜病变小鼠的血管内皮生长因子含量，可通过改善局部缺氧环境或影响各种新生血管生长因子而阻止视网膜新生血管形成。     

Transfection of cytochrome P4504B1 into the cornea increases angiogenic activity of the limbal vessels

Injury to the ocular surface induces the production of the corneal epithelial-derived 12-hydroxyeicosatetrienoic acid (12-HETrE), which exhibits stereospecific potent inflammatory and angiogenic properties and is formed by a cytochrome P450 (P450) enzyme, CYP4B1. We have cloned the rabbit corneal CYP4B1 into the expression plasmid pIRES2-enhanced green fluorescent protein (EGFP) and examined the effect of CYP4B1 overexpression on corneal inflammation in vivo and limbal vessel sprouting ex vivo. Cultured rabbit corneal epithelial cells transfected with pIRES2-EGFP-CYP4B1 metabolized arachidonic acid to 12-HETrE at a rate five times higher than that of pIRES2-EGFP-transfected cells (3.53 +/- 0.08 versus 0.62 +/- 0.10 nmol/h/10(6) cells; mean +/- S.E.M., n = 6, p < 0.05), indicating a functional expression of the CYP4B1. Injection of either plasmid into the rabbit cornea resulted in EGFP fluorescence in the corneal epithelium. However, corneal neovascularization, as measured by the length of penetrating blood vessels, was significantly greater in the corneas of eyes transfected with the pIRES2-CYP4B1 compared with pIRES2-EGFP. Corneal-limbal explants from eyes transfected with pIRES2-CYP4B1 showed a marked angiogenic activity (46 +/- 10 versus 12 +/- 3 mm capillary length, n = 6, p < 0.05), which correlated with increased levels of 12-HETrE, the CYP4B1-derived angiogenic 12-hydroxyeicosanoid (0.93 +/- 0.18 versus 0.15 +/- 0.02 pmol/explant, n = 6, p < 0.05), and was inhibited (76 +/- 5%) by the P450 inhibitor 17-octadecynoic acid. The results further implicate the corneal CYP4B1 as a component of the inflammatory and angiogenic cascade initiated by injury to the ocular surface and raise the possibility of a new therapeutic target for preventing corneal neovascularization, namely, the CYP4B1-12-HETrE system.     

高危角膜移植后免疫排斥反应与颈淋巴结切除

背景:颈淋巴结是角膜的引流区淋巴结.角膜移植后,抗原提呈细胞随着房水经由脉络膜巩膜外途径引流至颈淋巴结而诱发角膜免疫排斥反应.目的:观察在碱烧伤的角膜植床上行角膜移植后的免疫排斥反应现象,认识颈淋巴结切除抑制角膜移植后免疫排斥的效应.设计:随机对照动物实验.单位:中山大学中山眼科中心.材料:实验于2005-05/2007-02在中山大学中山眼科中心完成(眼科学国家重点试验室.实验室编号2006DA105054).选用SD大鼠104只, Wistar大鼠40只,均为雄性,鼠龄1～2个月,均由中山大学实验动物中心提供.实验所用的白细胞介素2 和干扰素γ ELISA试剂盒由美国Biource International公司提供.实验过程对动物的处置符合在眼科研究使用动物的ARVO声明.方法:以SD鼠为受体,Wistar鼠为供体,所有受体大鼠均行同种异体角膜移植.受体鼠被随机分为4组:正常对照组:行正常角膜移植;B组为颈淋巴结切除组:正常大鼠切除双侧颈淋巴结;碱烧伤后角膜移植组:角膜碱烧伤后21 d时行角膜移植;碱烧伤后角膜移植合并颈淋巴结切除组:角膜碱烧伤后立即行双侧颈淋巴结切除,21 d后再行角膜移植;每组20只.应用ELISA法检测角膜移植后各组植片中干扰素γ、白细胞介素-2蛋白的表达,记录角膜排斥反应发生的时间并比较各组植片平均存活时间.其余24只受体鼠用于在裂隙灯下及组织切片后显微镜下观察碱烧伤后角膜炎症及新生血管的动态变化.结果: ①病理组织学:正常角膜无炎症及新生血管.碱烧伤后3天时,角膜基质中存在着大量的炎症细胞浸润.3周末时无明显的炎症征象,但角膜新生血管达到高峰.碱烧伤后8周时,角膜新生血管已完全消退.②植片平均存活时间: 正常对照组、颈淋巴结切除组、碱烧伤后角膜移植组、碱烧伤后角膜移植合并颈淋巴结切除组分别为(10.40±1.14),(46.30±9.46),(7.00±1.58)和(15.00±3.39)d;颈淋巴结切除组较正常对照组明显延长(P < 0.05),而碱烧伤后角膜移植合并颈淋巴结切除组较碱烧伤后角膜移植组明显延长,差异具有显著性意义 (P < 0.05).③移植后角膜中干扰素γ及白细胞介素2蛋白的表达:角膜移植后颈淋巴结切除组植片中无干扰素γ及白细胞介素2蛋白的表达.在角膜移植后3,7,10,14 d,碱烧伤后角膜移植合并颈淋巴结切除组干扰素γ和白细胞介素-2的表达均明显下降,与碱烧伤后角膜移植组比较,差异有显著性意义(P < 0.05).结论:颈淋巴结切除能有效抑制正常及碱烧伤后角膜移植术后的免疫排斥反应.     

角膜移植后核因子κB表达动态以及环孢霉素A的干预作用

背景:核因子κB在转录水平调控着许多细胞因子、黏附因子的表达,在角膜移植排斥反应中可能起着中心调控作用.目的:观察核因子κB和细胞间黏附分子1、血管内皮生长因子在角膜植片中的动态表达规律以及环孢霉素A的干预作用.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2005-01/07在解放军第一军医大学珠江医院眼科完成.材料:选用健康清洁级SD大鼠40只及Wistar大鼠50只.随机分为3组:同基因移植组Wistar大鼠10只为供者,Wistar大鼠20只为受者;同种异体移植组Wistar大鼠10只为供者,SD大鼠20只为受者:同种异体移植+环孢霉素A治疗组Wistar大鼠10只为供者,SD大鼠20只为受者.方法:建立大鼠角膜移植模型,移植后所有受者术眼结膜下注射庆大霉素,隔日1次,每次2000U,共用3次;2.5 g/L氯霉素眼液滴眼,2次/d,每次2滴,连续用18d.50/L托品酰胺眼液滴眼,1次/d,每次2滴,连用1周.环孢霉素A治疗组移植后第1天开始用10g/L环孢霉素A眼液滴眼,3次/d,每次2滴,连续用18 d.主要观察指标:各组移植后3,7,12,18d测定角膜移植排斥反应指数评分,并于各时间点观察角膜植片病理学变化,检测核因子κB与细胞间黏附分子1、血管内皮生长因子的表达.结果:在观察期18 d内,同基因组未出现排斥反应,同种异体移植组在各时间点的排斥反应指数高于同基因移植组(P.<0.05),而同种异体移植+环孢霉素A治疗组排斥反应指数低于同种异体移植组(P<0.05).免疫组织化学结果显示:核因子κB与细胞间黏附分子1、血管内皮生长因子分布角膜上皮层、基质层及新生血管内皮细胞.各时间点,同种异体移植组角膜中核因子κB与细胞间黏附分子1、血管内皮生长因子的表达高于同基因移植组(P<0.05),而低于同种异体移植+环孢霉素A治疗组(P<0.05).结论:环孢霉素A通过减弱核因子κB核转位和发挥活性,抑制受其调控的多种细胞因子、黏附分子等移植排斥相关因子的表达,从而抑制角膜移植排斥反应的发生发展.     

血管内超声评价祛瘀消斑胶囊和辛伐他汀稳定易损斑块的作用

目的应用血管内超声技术（IVUS）评价祛瘀消斑胶囊和辛伐他汀对易损斑块的稳定作用。方法43只实验兔采用球囊损伤腹主动脉＋高脂饲料喂养;12周末改喂普通饲料并随机分为A（对照）、B（祛瘀消斑胶囊）、C（辛伐他汀）组,药物干预12周;24周末对3组实验兔斑块局部转染携带P53基因的腺病毒载体;26周末,应用蝰蛇毒和组胺进行药物触发。测定血脂并行体表超声、IVUS和病理学检测。结果与A组比较,B组和C组斑块破裂率显著降低（P均〈0.05）,血清总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）（P〈0.05～0.01）、内中膜厚度（IMT）（P均〈0.01）、斑块面积（PA）（P均〈0.01）、管腔面积狭窄率（LAS%）（P均〈0.01）、病理测量IMT（P分别〈0.05和0.01）显著降低,平均回声强度的校正值（AIIc%）（P均〈0.05）、纤维帽厚度及纤维帽/IMT比值（P〈0.05～0.01）显著升高。C组TC和LDL-C（P分别〈0.05和0.01）,IMT（P〈0.05）,PA（P〈0.05）显著低于B组。结论祛瘀消斑胶囊和辛伐他汀能有效稳定易损斑块,IVUS可为观察各种干预治疗前后斑块的稳定性和消退提供一种可靠手段。     

米帕明对大鼠脑缺血-再灌注后自由基损伤的保护作用

目的:研究米帕明(Imipramine,Imi)对局灶性脑缺血-再灌注后大鼠脑组织中含水(H2O)量及超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量的影响,探讨Imi脑保护作用的机制。方法:选用体重280-320 g健康Wistar大鼠60只随机分成假处理组(A组)、模型组(B组)、小剂量Imi组(C组)及大剂量Imi组(D组)各15只,制造大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型。C、D组于术前60min分别给予Imi 10及20 mg/kg腹腔内注射。应用TTC染色观察梗死体积、检测脑缺血组织H2O、MDA含量及SOD活性。结果:①H2O和MDA含量,C、D组均明显低于B组,D组低于C组(P<0.01、0.05)。②SOD活性,C、D组明显高于B组,D组高于C组(P<0.01、0.05)。③梗死体积,C、D组明显小于B组,D组小于C组(P<0.01、0.05)。结论:Imi可减少大鼠脑缺血-再灌注后自由基生成及梗死体积,疗效与剂量有关。     

速度向量成像技术检测兔腹主动脉粥样硬化易损斑块的初步研究

目的 探讨速度向量成像(VVI)技术评价兔腹主动脉粥样硬化斑块生物力学参数的价值.方法 45只雄性新西兰大白兔,随机选择10只作为正常对照组,余35只制成动脉粥样硬化模型.分别对其行常规超声检查及VVI脱机分析,测量右肾动脉分支1 cm以下处腹主动脉内-中膜厚度(IMT)或斑块厚度,记录此处收缩期最大切向速度(Vmax)、应变(Smax)及应变率(SRmax).最后行病理及免疫组化检查.结果 根据病理分为4组:正常对照组(A组,10只)、病理性内膜增厚组(B组,9只)、厚帽纤维粥样斑块组(C组,15只)及薄帽纤维粥样斑块组(D组,11只).C、D组间斑块厚度差异无统计学意义(P>0.05),均大于A、B组IMT(P<0.05).各组间Vmax、Smax、SRmax差异有统计学意义(P<0.05).以Smax>0.37%检测易损斑块的灵敏度为 84.4%,特异度为 91.7%.结论 VVI技术有望成为临床早期发现易损斑块的可靠方法.

Abstract：

Objective To explore the value of biomechanics parameter of rabbit abdominal aortic atheroma using velocity vector imaging(VVI).Methods Ten of 45 male New Zealand rabbits were chosen as normal control group randomly,the rest experimental rabbits were made atheromatous plaque model.The rabbits were examined by two-dimensional ultrasound and VVI respectively.The intima-media thickness(IMT) or thickness of plaques of abdominal aorta 1 cm from right renal artery branch were recorded.Maximum tangential velocity,strain and strain rate of IMT or plaques were measured using VVI.Then the rabbits were killed for pathological and immuno-histochemical examination.Results Based on pathology,the rabbites were divided into 4 groups:control group(group A,n=10),group of pathological endometrial thickening(group B,n=9),group of thick fibrous cap atheromatous plaques (group C,n=15) and group of thin fibrous cap atheromatous plaques (group D,n=11).The difference of plaques thickness and biochemical indicators had no statistically significant between group B and C(P>0.05),both bigger than group A and B (P<0.05).The difference of Vmax,Smax and SRmax had statistically significant each group(P<0.05).With Vmax>0.46×10-2 cm/s,Smax>0.37%,SRmax>1.415×10-2 s-1 to find the vulnerable plaques,the sensitivity were 75.0%,84.4%,84.4% respectively,specificity were 70.8%,91.7%,83.3% respectively.Conclusions VVI can identify plaque biomechanics parameter of different progression periods,which is expected to be a reliable method to find vulnerable plaques earlier in clinic.     

缝线诱导角膜新生血管形成:术后核因子кB表达的动态变化

背景: 角膜新生血管化不但严重影响视力, 也是同种异体角膜移植术后发生排斥反应的高危因素, 因此研究角膜新生血管发病机制和能阻止其形成的抑制剂, 一直是眼科学的热点和难点。目的: 采用缝线法建立大鼠角膜新生血管模型, 以地塞米松作为糖皮质激素类角膜新生血管抑制剂, 探讨核因子κB在角膜新生血管发生发展中的作用机制。设计: 随机对照的实验研究。单位: 南方医科大学珠江医院眼科。材料: 实验于 2005- 01/04 在解放军第一军医大学珠江医院眼科完成。选用 55 只出生二三个月雄性健康清洁级 Wistar 大鼠。兔抗大鼠核因子κB P65 多克隆抗体, 兔抗大鼠血管内皮生长因子、细胞间粘附分子 1 多克隆抗体均购自武汉博士德生物工程有限公司。方法: ①实验干预: 摸球法随机将大鼠分为生理盐水组(n =25) 、地塞米松组(n =25) 、正常角膜组(n =5) 。生理盐水对照组及地塞米松组大鼠采用缝线法建立大鼠角膜新生血管模型后, 分别给予生理盐水及地塞米松眼液点右眼, 2 滴 / 次, 3 次 /d, 至术后 18 d。正常角膜组无干预措施。②实验评估: 术后 1, 3, 7, 12, 18 d 对生理盐水对照组及地塞米松组大鼠进行角膜新生血管生长评分, 取各组角膜切片后光镜下观察各组角膜组织学变化, 并采用免疫组织化学染色检测各组角膜核因子κB与细胞间粘附分子 1、血管内皮生长因子的表达。主要观察指标: ①角膜新生血管生长评分。②角膜组织学变化。③各组角膜核因子κB与细胞间粘附分子 1、血管内皮生长因子的表达。结果: ①角膜新生血管生长评分: 地塞米松组角膜新生血管受到了明显的抑制, 其术后各时间点的角膜新生血管评分均低于生理盐水组 (P <0.05～0.01)。②角膜组织学变化: 地塞米松组角膜缝线诱导后新生血管及炎性细胞浸润均较对照组明显减轻, 角膜各层结构相对完整。③角膜核因子κB与细胞间粘附分子 1、血管内皮生长因子表达: 地塞米松组各时间点角膜中核因子κB与细胞间粘附分子 1、血管内皮生长因子的表达低于生理盐水组(P < 0.05) , 且核因子κB表达强度与角膜新生血管评分及下游基因细胞间粘附分子 1、血管内皮生长因子的表达强度成正相关(r =0.961, 0.922, 0.958, P < 0.01) 。结论: 核因子κB参与角膜新生血管的形成, 其可能通过上调下游基因血管内皮生长因子、细胞间粘附分子 1 等基因的表达参与角膜新生血管的形成。地塞米松通过减弱核因子κB活性, 抑制受其调控的多种细胞因子、粘附分子等角膜新生血管相关因子的表达, 从而抑角膜新生血管的发生发展。     

Mapping of epitopes on the fiber knobs of human adenovirus serotypes 8 and 15

In order to obtain information on the linear antigenic epitopes on fiber knobs of adenovirus serotypes 8 (Ad8) and 15 (Ad15) of subgenus D, the binding of polyclonal virus- and fiber-specific rabbit antibodies to overlapping peptides covering the fiber knob was studied. The main antigenic epitopes of the fiber knob of Ad8 (FK8) were represented by the peptides P4 [amino acids (aa) 213-227], P6 (aa 233-247), P11 (aa 283-297), P13 (aa 303-317) and P15 (aa 316-325); the peptides P1 (aa 183-197), P8 (aa 253-267), P10 (aa 273-287) and P23 (aa 340-349) were moderately reactive. The peptides P4, P6, P11, P13 and P15 span the beta strands C, D, G and H, parts of the CD and DG loops and the complete GH loop of the fiber knob. The main epitopes of the fiber knob of Ad15 (FK15) were represented by peptides P5 (aa 198-212), P10 (aa 223-237), P12 (aa 233-247), P13 (aa 238-252), P26 (aa 303-317), P29 (aa 318-332) and P32 (aa 333-347), spanning the beta strands B, D, G, H and I, partly strand C, the CD loop, parts of the AB and DG loops, the GH and HI loops and the N-terminal part of the IJ loop. The amino acid sequence alignment showed that the location of the linear FK8 and FK15 epitopes was found to be overlapping to a major extent. Two serotype-specific epitopes were determined on FK15, represented by P10 and P13.     

60角膜缘干细胞移植治疗复发性翼状胬肉的临床研究

目的探讨改进显微手术切除联合自体角膜缘上皮干细胞移植术治疗复发性翼状胬肉的临床疗效。方法88例（88眼）复发性翼状胬肉,随机分别采用单纯显微手术切除方法（A组）和显微手术切除联合自体角膜缘移植术（B组）,各44例（44眼）。术后随访4～28（平均14．30&#177;7．42）。结果A组真性胬肉复发9眼,复发率20．45％;B组真性胬肉复发3眼,复发率为6．82％。两组复发率差异有统计学意义（X^2=1．137,P〈0．05）。结论改良的显微手术切除联合自体角膜缘上皮干细胞移植术是治疗复发性翼状胬肉的理想方法。