细胞因子信号转导抑制因子3基因沉默对高脂喂养肥胖幼年大鼠的影响

目的 观察RNA干扰(RNA interference, RNAi)沉默细胞因子信号转导抑制因子3(suppressor of cytokine signaling3, SOCS3)能否改善高脂喂养幼年大鼠的肥胖和瘦素抵抗。方法 32只5周龄健康雄性SD大鼠, 随机分为4组干扰+普食组, 对照+普食组, 干扰+高脂组, 对照+高脂组, 每组各8只。侧脑室注射慢病毒载体SOCS3干扰液或慢病毒载体对照液, 然后给予高脂或普通饲料喂养28 d, 期间测摄食量和体重。处死后取血, 放射免疫法测瘦素(leptin)含量, 全自动生化分析仪测血糖(plasma glucose, PG)、总胆固醇(total cholesterol, TC)、甘油三脂(triglycerides, TG)水平。结果 干扰+高脂组大鼠的摄食量和体重分别于注射后第14天和第21天起低于对照+高脂组(P＜0.05);于注射后第22天起和第28天高于对照+普食组(P＜0.05)。干扰+高脂组大鼠瘦素水平(0.86±0.12)ng/mL低于对照+高脂组(0.97±0.13)ng/mL, 高于对照+普食组(0.75±0.10)ng/mL(P＜0.05)。结论 SOCS3基因沉默可改善幼年大鼠高脂喂养诱导的肥胖和瘦素抵抗。     

大鼠重组瘦素对成熟脂肪细胞细胞因子信号转导抑制因子3表达的影响

目的模拟肥胖者体内高瘦素环境,探讨瘦素处理脂肪细胞细胞因子信号转导抑制因子3(SOCS-3)mRNA及蛋白表达变化。方法分离SD雄性大鼠附睾成熟脂肪细胞,RT-PCR法检测瘦素长型受体(OB-Rb)mRNA表达,并采用0.5～500nmol/L重组大鼠瘦素处理分离的成熟脂肪细胞0、0.5、2和6h,RT-PCR法检测SOCS-3 mRNA表达。免疫沉淀及Western blot检测SOCS-3蛋白表达。结果成熟脂肪细胞可表达少量的OB-Rb;未经瘦素处理的脂肪细胞SOCS-3 mRNA和蛋白只有少量表达,瘦素浓度0.5nmol/L时SOCS-3表达无明显变化,当瘦素浓度在5、50及500nmol/L时,SOCS-3表达量随时间延长而增加。结论瘦素可对脂肪细胞产生直接作用,并且可以诱导SOCS-3的表达增加。     

高脂喂养肥胖大鼠下丘脑及肝脏内细胞因子信号转导抑制物-3 mRNA表达的研究

目的瘦素抵抗被认为是儿童肥胖症的主要发病机制。细胞因子信号转导抑制物-3（suppressors—of—cytokine—signaling3，SOCS3）作为瘦素受体后Janus蛋白激酶一信号转导及转录激活蛋白（JAK—STAT）信号传导通路的主要负性调节因子，可能参与瘦素抵抗的发生。本研究从瘦素受体基因表达和瘦素受体后Janus蛋白激酶-信号转录及转录激活蛋白传导通路水平，研究瘦素抵抗的可能发生机制。方法以高脂饮食制备幼年、雄性肥胖大鼠模型，利用半定量RT—PCR法检测肥胖大鼠下丘脑及肝脏组织内中细胞因子信号转导抑制物-3mRNA、瘦素长型受体（OB—Rb）mRNA表达的改变，探讨细胞因子信号转导抑制物-3mRNA表达与高瘦素血症及与瘦素长型受体mRNA表达的关系。结果与对照组相比，肥胖大鼠下丘脑及肝脏内，细胞因子信号转导抑制物-3表达升高（P〈0.01），并与血清瘦素水平呈正相关（r＝0.666，r＝0．790，P〈0．01）。肥胖组大鼠下丘脑及肝脏内，细胞因子信号转导抑制物-3mRNA（相对灰度值）与瘦素长型受体mRNA水平呈显著负相关（r=-0．526，r=-0.585，P〈0.05）。结论肥胖大鼠中枢及外周组织的细胞因子信号转导抑制物-3表达上调，使瘦素受体后JAK—STAT信号转导通路抑制，可能参与了瘦素抵抗的发生机制。     

饮食诱导肥胖大鼠脂肪细胞对瘦素反应影响

瘦素具有促进脂肪分解、调节体重作用,但许多肥胖者血清瘦素水平增高,说明存在瘦素抵抗.细胞因子信号转导抑制因子3(suppressor of cytokinesignaling-3,SOCS-3)可由瘦素诱导产生,而SOCS-3又可抑制瘦素信号通路.     

高脂饲料诱导肥胖及肥胖抵抗大鼠的瘦素、胰岛素水平

目的:探讨高脂饲料肥胖诱导大鼠的瘦素、胰岛素水平与肥胖抵抗的关系。方法:将50只雄性Wistar大鼠随机分为肥胖诱导组和正常对照组,分别喂以高脂饲料和基础饲料8周,观察体脂含量的变化,第8周末根据体重增加量筛选出膳食诱导肥胖(DIO)组大鼠和膳食诱导肥胖抵抗(DIO-R)组大鼠,采用酶法测定血脂4项,酶联免疫法测定瘦素和胰岛素水平并进行比较。结果:高脂饲料喂养导致肥胖组和肥胖抵抗组大鼠的血清总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、瘦素和胰岛素水平均显著高于正常对照组,也使肥胖组大鼠体重显著高于肥胖抵抗组与正常对照组大鼠,肥胖抵抗组大鼠体重和正常对照组比较没有差异。结论:高脂饲料诱导肥胖抵抗大鼠不易产生瘦素抵抗和胰岛素抵抗,但伴有一定程度的血脂代谢紊乱。     

高脂诱导肥胖与肥胖抵抗大鼠血糖、血脂、瘦素及胰岛素敏感性比较

【目的】研究高脂诱导下的肥胖及肥胖抵抗大鼠血清血糖、甘油三酯(triglyceride，TG)、瘦素及胰岛素敏感性的变化。【方法】高脂饲料喂养大鼠8周，按体重分出肥胖与肥胖抵抗大鼠，检测各项指标。【结果】肥胖及肥胖抵抗大鼠血糖、TG都升高，但只有肥胖大鼠出现瘦素、胰岛素抵抗。【结论】肥胖抵抗大鼠存在着能量代谢紊乱，但不易发生瘦素、胰岛素抵抗。     

SOCS-3抑制对膳食诱导肥胖大鼠脂肪细胞PPARγ及aP2表达的影响

目的通过对膳食诱导肥胖大鼠脂肪细胞SOCS-3进行抑制,探讨是否可以恢复瘦素的抗脂肪合成作用。方法采用SOCS-3小发夹RNA（shRNA）慢病毒,感染瘦素抵抗肥胖大鼠成脂诱导分化后的脂肪细胞,检测SOCS-3的抑制效果。再采用50 nmol/L瘦素处理6 h,观察脂肪合成相关基因（PPARγ及aP2）mRNA表达的变化。结果 SOCS-3 shRNA慢病毒可有效抑制脂肪细胞SOCS-3 mRNA的表达,抑制率达50%。50 nmol/L瘦素处理6 h后,感染SOCS-3 shRNA慢病毒组PPARγ及aP2 mRNA的表达显著降低（P〈0.01）,空白对照组和感染阴性对照病毒组的表达无明显变化（P〉0.05）。结论通过抑制膳食诱导肥胖大鼠的脂肪细胞SOCS-3,在一定程度上可以解除脂肪细胞的瘦素抵抗。     

瘦素抵抗肥胖大鼠脂肪组织SOCS-3、PPARγ及ACO mRNA水平的探讨

目的观察高脂饮食诱导的肥胖瘦素抵抗大鼠细胞因子信号转导抑制因子-3(SOCS-3)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)及乙酰辅酶A氧化酶(ACO)mRNA表达水平的变化。方法30只Wistar雄性大鼠,6只为对照组喂饲基础饲料,24只为高脂组喂饲高脂饲料,第8周末按体重增量从高脂组中筛选出8只大鼠作为肥胖组,测定对照组和肥胖组大鼠血清瘦素,附睾脂肪组织中SOCS-3,PPARγ以及ACO mRNA表达。结果肥胖组大鼠体重以及血清瘦素水平均显著高于对照组(P<0.05);肥胖组脂肪组织SOCS-3、PPARγ mRNA水平显著高于对照组(P<0.05),而ACO mRNA则显著低于对照组(P<0.05)。结论高脂饮食诱导的肥胖大鼠存在瘦素信号转导通路的抑制,脂肪酸氧化能力降低,脂肪合成能力增强。     

单纯性肥胖儿童血清瘦素胰岛素及血糖关系的研究

通过对单纯性肥胖儿童的血清瘦素、胰岛素、血糖及其相关性进行研究 ,为预防和治疗肥胖及其并发症提供一定的科学依据 ,对 58名肥胖儿童和 55名非肥胖儿童测定其血清瘦素、胰岛素、C-肽、血糖 ,并测定皮褶厚度 ,计算体脂百分比 (% BF)、体质指数 (BMI)。结果肥胖组儿童血清瘦素、胰岛素、 C-肽显著高于非肥胖组儿童 (P<0 .0 5) ,肥胖组与非肥胖组儿童血糖浓度没有显著性差异 (P>0 .0 5)。% BF、 BMI与血清瘦素、胰岛素、 C-肽均呈显著正相关 (P<0 .0 5) ,瘦素与胰岛素、 C-肽呈显著正相关 (P<0 .0 5)。肥胖儿童存在瘦素抵抗 ,通过降低体重来减轻瘦素抵抗能改善高胰岛素血症进而治疗 型糖尿病     

毒鼠强中毒鼠肝细胞因子信号转导抑制因子-3和肿瘤坏死因子-α的表达

为探讨细胞因子信号转导抑制因子-3(SOCS-3)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA表达在毒鼠强中毒(TEMP)致多器官功能衰竭(MODS)中的作用,将30只健康雄性BALB/c小鼠随机分成TEMP模型组(n=10)、生理盐水对照组(n=10)、正常对照组(n=10),分别于中毒后2、6、12、24 h取小鼠的肝脏,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定肝组织SOCS-3和TNF-αmRNA表达水平。结果显示,中毒后2、6、12和24 h肝组织中SOCS-3 mRNA表达量均明显高于对照组(P均<0.05),24 h达到峰值。TNF-αmRNA表达量均明显高于对照组(P均<0.05),12 h达峰值。相关分析显示,肝脏中SOCS-3 mRNA与TNF-αmRNA表达存在明显的正相关性(y=0.091+0.747x,r=0.912,F=261.2,P<0.01)。提示不同时间点TEM中毒小鼠肝脏中SOCS-3、TNF-αmRNA均升高且表达趋势一致。     

亮氨酸对高脂膳食喂养大鼠胰岛素敏感性的影响

目的探讨亮氨酸(Leucine,Leu)对高脂膳食诱导的胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)大鼠胰岛素敏感性的影响。方法给正常大鼠和高脂膳食大鼠分别补充0,1.5%,3.0%和4.5%水平的亮氨酸24w。进行胰岛素耐量实验。检测血清Leu水平、血糖,血胰岛素,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。Western blot检测肝脏哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)及磷酸化mTOR表达水平。结果高脂喂养大鼠Leu干预组胰岛素耐量曲线下面积值(AUC)明显降低,血胰岛素水平及HOMA-IR明显降低。Leu可显著增强胰岛素刺激后肝脏pSer2448 mTOR的表达。Leu补充对正常大鼠上述指标无明显影响。结论膳食补充Leu可以增强高脂喂养胰岛素抵抗大鼠的胰岛素敏感性。[营养学报,2012,34(6):545-548,552]     

人血清瘦素水平与肥胖、胰岛素和血脂的关系

目的　探讨血清瘦素水平与脂肪含量、年龄、性别、血糖、血脂、胰岛素的关系。方法　 85例受试者按体质量指数 (BMI)分为 3组 :Ⅰ组BMI<2 3kg/m2 2 0例 ,Ⅱ组 2 3kg/m2 ≤BMI<2 5kg/m2 18例 ,Ⅲ组BMI≥ 2 5kg/m2 4 7例。测定其空腹血清瘦素水平、空腹血糖、空腹胰岛素、身高、体质量、收缩压、舒张压、脂肪百分数、甘油三酯、总胆固醇等。结果 (1)女性瘦素浓度高于男性 (P <0 .0 1)。Ⅲ组瘦素水平高于Ⅱ组和Ⅰ组 ;(2 )血清瘦素水平与BMI(r=0 .4 71,P <0 .0 1) ,脂肪百分数 (r=0 .318,P <0 .0 1) ,胰岛素 (r=0 .388,P <0 .0 1)、甘油三酯 (r=0 .371,P <0 .0 1)、胆固醇 (r=0 .4 91,P <0 .0 1)和收缩压 (r=0 .2 2 0 ,P <0 .0 5 )成正相关。结论　性别、脂肪含量、空腹胰岛素、血脂与瘦素存在着显著的相关性 ,高瘦素血症和瘦素抵抗可能与高胰岛素血症、胰岛素抵抗和 2型糖尿病有关     

瘦素对下丘脑腹内侧核损伤性肥胖大鼠的代谢影响

目的 :　探讨外周输注瘦素对下丘脑腹内侧核 (ventromedial hypothalamus,VMH)损伤性肥胖大鼠的代谢影响。方法 :　大鼠分成四组 ,分别是 (1 ) VMH损伤 +瘦素 ,(2 ) VMH损伤 +生理盐水 ,(3 ) VMH伪损伤 +瘦素 ,(4 ) VMH伪损伤 +生理盐水。在 VMH损伤或伪损伤后 ,在背部植入灌注瘦素或生理盐水的微泵 ,每天记录体重、摄食量。 7d后 ,留取血样测定血浆葡萄糖、甘油三酯、总胆固醇、胰岛素及瘦素 ;分离子宫外周脂肪垫 (perimetric fat pad,PFD)并称重 ;留取胰腺组织测定胰岛细胞增殖细胞核抗原 (proliferating cell nuclear antigen,PCNA)。结果 :　在VMH损伤的两组中 ,瘦素和生理盐水输注的大鼠体重增加和摄食量没有差别 ,但在 VMH伪损伤两组中 ,瘦素输注组的体重增加和摄食量少于生理盐水输注组。瘦素输注的 VMH损伤和伪损伤组的血浆胰岛素、甘油三酯、总胆固醇分别低于其相应的生理盐水对照组。瘦素输注的 VMH损伤和伪损伤两组的血浆瘦素水平没有差别 ,而在 VMH伪损伤的两组中 ,瘦素输注组的瘦素水平高于其输注生理盐水的对照组。在 VMH损伤的两组中 ,瘦素和生理盐水输注的肥胖大鼠 PFD没有差别 ;在 VMH伪损伤的两组中 ,瘦素输注组的 PFD少于生理盐水输注组。在 VMH损伤组中 ,瘦素输注组的 PCNA阳性率明     

鱼油摄入对肥胖大鼠脂肪组织、瘦素表达和胰岛素水平的影响

目的探讨鱼油摄入对肥胖大鼠体重增量、脂肪组织、瘦素基因表达、血清瘦素及胰岛素水平的影响。方法雄性Wistar大鼠在高脂(猪油20%WT/WT)饮食8 w后,以体重比对照组重30g及以上(约1个标准差)为标准分出肥胖大鼠,并按体重随机分为两组:猪油组(猪油20/100 WT/WT)和鱼油组(鱼油20/100WT/WT),保留对照组,分别饲以相应饲料,继续饲养4w。腹腔麻醉,心脏穿刺取血并分离血清,测血清瘦素及胰岛素水平;处死大鼠,分离腹膜后、附睾脂肪组织,称湿重,做腹膜后脂肪组织切片,以目镜测微计测脂肪细胞直径;RT-PCR检测脂肪组织瘦素mRNA。结果 (1)鱼油组大鼠体重增量、腹膜后、附睾脂肪组织湿重、脂肪细胞体积显著低于猪油组;其脂肪组织瘦素mRNA表达水平、血清瘦素、胰岛素水平均有降低趋势,但未达到统计学意义上的显著差异。(2)猪油、鱼油两组大鼠血清瘦素水平与血清胰岛素水平均呈显著的相关关系。结论鱼油饮食4w能显著降低肥胖大鼠体重增量、脂肪组织含量,但未能显著降低脂肪组织瘦素mRNA水平、血清瘦素及胰岛素水平。[营养学报,2013,35(2):146-149]     

D-核糖对高脂喂饲小鼠胰岛素抵抗的影响

目的观察D-核糖对高脂喂饲的C57BL/6小鼠血糖、血脂及胰岛素等的影响,探讨D-核糖对改善高脂膳食引起的糖耐量异常和胰岛素抵抗的可能性。方法 8 w龄C57BL/6雄性小鼠36只,随机分成正常对照、高脂对照、低剂量的D-核糖+高脂组(高脂+2.5%核糖)和高剂量的D-核糖+高脂组(高脂+5%核糖),喂饲12 w,记录摄食量和体重变化。11w进行葡萄糖耐量试验(OGTT),并计算葡萄糖曲线下面积(AUC)。干预12w处死,进行血生化指标及胰岛素检测。结果高脂+5%核糖组小鼠的血糖水平低于高脂对照组(P<0.05);高脂+2.5%核糖和高脂+5%核糖组糖耐量曲线下面积(P<0.01)、血清胰岛素水平(P<0.05)及胰岛素抵抗指数HOMA-IR(P<0.01)均显著低于高脂对照组。血清胆固醇(CHO)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)在核糖干预后的变化并不明显(P>0.05);高脂+5%核糖组血清低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、血清甘油三酯(TG)及游离脂肪酸(FFA)低于高脂对照组(P<0.05)。结论 D-核糖可以改善高脂饲料喂饲小鼠的糖耐量异常和胰岛素抵抗。[营养学报,2013,35(2):142-145]     

饮食诱导肥胖与肥胖抵抗大鼠血清差异蛋白筛选

目的:探讨高脂饲料诱导的肥胖(diet-inducedobesity,DIO)与肥胖抵抗(diet-inducedobesityresistance,DIO-R)大鼠不同易感性的差异及血清中蛋白表达。方法:健康雄性SD大鼠40只,随机分为基础组和高脂饲料组,分别给予基础饲料和高脂饲料5w后,参照Levin等的方法建立动物模型,按照体重增加量排序,位于体重上1/3的大鼠筛选为肥胖大鼠,位于体重下1/3的大鼠筛选为肥胖抵抗大鼠。处死动物,收集血清样品检测各组相关指标的差异,并应用SELDI蛋白质芯片技术检测DIO与DIO-R大鼠血清蛋白的差异表达。结果:DIO大鼠体重﹑体脂比﹑血糖﹑血脂均与DIO-R大鼠有显著性差异。由蛋白质芯片检测图可见,在分子量2～100ku范围内,分子量为7945和9513的蛋白峰在DIO大鼠和DIO-R大鼠血清中存在差异;分子量为6256、6267、4496的蛋白峰在DIO-R大鼠和基础组大鼠血清中存在差异。结论:SD大鼠对高脂饮食诱导的DIO和DIO-R存在易感性差异,应用SELDI蛋白质芯片技术筛选出了DIO大鼠与DIO-R大鼠血清差异蛋白,为以后进行蛋白质分离﹑纯化及鉴定提供依据。     

高脂日粮改变小鼠股骨基因表达谱的聚类分析

目的研究饲喂高脂日粮对小鼠股骨基因表达谱的影响。方法 4w龄C57BL/6雄性小鼠,体重13～14g,饲养正常日粮4d后,根据体重随机分为对照组(基础日粮)和高脂日粮组(19.5%猪油),每组8只小鼠,饲养12w后处死,迅速分离股骨,每组4份50mg股骨,提取RNA后等量合并,应用Affymetrix MOE430A小鼠基因表达芯片获得股骨基因表达谱变化的信息,通过DAVID在线分析工具进行聚类分析。结果长期饲喂高脂日粮导致C57BL/6小鼠股骨基因显著表达差异主要涉及如下功能:阳离子通道、信号转导和转入调控、骨矿化、磷代谢调控和胶原合成。结论长期摄入高脂日粮导致小鼠骨组织众多骨代谢相关基因表达改变,造成骨形成减少。     

瘦素受体基因外显子表达对肥胖儿童脂质代谢的影响

目的探讨瘦素受体(Leptin receptor,LEPR)基因第20外显子变异对脂质代谢的影响。方法用PCR-RFLP方法及聚丙烯酰胺凝胶电泳方法分析瘦素受体基因的第20外显子基因变异频率,并测定单纯型肥胖儿童的血清中甘油三脂(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL),按公式计算脂肪百分比(%fat)。结果有3种第20外显子的基因型,其酶切片段分别为:A/A型:201bp,75bp;A/G型:201bp,173bp,75bp,28bp;G/G型:173bp,75bp,28bp。肥胖儿童与健康儿童相比,前者瘦素受体基因的第20外显子3057位G→A突变频率增高,差异有显著性(P<0.05)。A/A基因型的肥胖儿童其血清TG浓度、体重指数(BMI)、%fat均明显高于G/G基因型者(P<0.01),而血清HDL水平则低于后者(P<0.01),对于A/G型肥胖儿童来说,除其血清TG浓度高于G/G基因型者外(P<0.05),余各项指标均与另外两种基因型无明显差别。结论本组单纯型肥胖儿童瘦素受体基因第20外显子存在基因多态性,且这种变化明显影响肥胖儿童的脂质代谢及体脂分布。监测瘦素受体基因的变化,对减少肥胖儿的发生及其他将罹患疾病有着重要的临床意义。     

蒺藜总皂苷对营养性肥胖大鼠胰岛素抵抗和高脂血症的影响

目的:研究蒺藜总皂苷(STT)对于营养性肥胖大鼠糖脂代谢的影响。方法:利用高脂高糖饲料诱导营养性肥胖大鼠模型,STT灌胃治疗6w,测定与胰岛素抵抗和高脂血症相关的各项身体和血液指标。结果:STT能够有效控制肥胖大鼠体重增加,显著降低血脂水平,同时还可以提高肥胖大鼠的胰岛素敏感性,对口服糖耐量的改善效果与罗格列酮相当。结论:STT具有降低血脂,控制肥胖,提高胰岛素敏感性的作用。     

共轭亚油酸对饮食诱导肥胖大鼠脂代谢及相关基因表达的影响

目的:通过研究共轭亚油酸(CLA)对饮食诱导肥胖大鼠脂肪酸转移蛋白、酰基CoA合成酶基因表达的影响,探讨CLA抗糖尿病机制。方法:选雄性Wistar大鼠,随机分为对照组、高脂组、高脂+CLA组(每100g饲料含CLA分别为0.75、1.50、3.00g),每组动物10只,观察CLA对肥胖大鼠血清游离脂肪酸(FFA)、胰岛素、血糖水平的影响,并应用RT-PCR法检测脂肪酸转移蛋白(FATP)、酰基CoA合成酶(ACS)、过氧化物酶体增殖物活性受体γ(PPARγ)mRNA的表达水平。结果:高脂组大鼠血清FFA、胰岛素和血糖水平显著高于对照组,CLA可降低肥胖大鼠血清FFA、胰岛素、血糖水平,并且可增加肥胖大鼠脂肪组织FATP、ACS、PPARγmRNA的表达水平。结论:CLA可通过激活PPARγ上调FATP、ACS基因的表达,改善肥胖大鼠的胰岛素抵抗。