肿瘤坏死因子、白细胞介素-2、α-干扰素及合用异博定对人乳腺癌细胞多药耐药性的逆转作用研究

目的检测肿瘤坏死因子、白细胞介素-2、α-干扰素及合用异博定对人乳腺癌耐药细胞系的耐药性的调节作用。方法MTT法检测药物对MCF-7/Adr细胞的抑制率变化,流式细胞术检测肿瘤坏死因子、白细胞介素-2、α-干扰素及合用异博定后,细胞内罗丹明-123的药物浓度变化。结果α-干扰素可增加耐药细胞内的药物浓度,α-干扰素与异博定合用比单用异博定也可增加细胞内的药物浓度。各用药组均可不同程度提高阿霉素对耐药细胞的抑制率。结论乳腺癌化疗中,合用α-干扰素及异博定,可在减少副作用的基础上逆转肿瘤的耐药性。     

α-干扰素对肝癌多药耐药株SMMC-7221/ADM的逆转及其机制研究

目的:研究α-干扰素对SMMC-7221/ADM的逆转作用.方法:用MTT法检测常用化疗药物对SMMC-7221/ADM的毒性.用流式细胞仪(FCM)检测SMMC-7221/ADM细胞的P-糖蛋白(P-gp)的表达及细胞内柔红霉素的相对浓度.结果:α-干扰素可提高SMMC-7221/ADM细胞内化疗药物的浓度,增加阿霉素等化疗药物对SMMC-7221/ADM的毒性作用.结论:α-干扰素可逆转人肝癌多药耐药株SMMC-7221/ADM.     

α—干扰素对肝癌多药耐药株SMMC—7221／AMD的逆转及其机制研究

目的：研究α－干扰素对人肝癌多药耐药细胞SMMC－7221／ADM的逆转作用。方法：用MTT法检测常用化疗药物对SMMC－7221／ADM的毒性。用流式细胞仪（FCM）检测SMMC－7221／ADM细胞的P－糖蛋白（P－gp)的表达及细胞内柔红霉素的相对浓度，结果：α干扰素可提高SMMC－7221／ADM细胞内化疗药物的浓度，增加阿霉素等化疗药物对SMMC－7221／ADM的毒性作用。结论：α－干扰素可逆转人肝癌多药耐药株SMMC－7221／ADM。     

干扰素和环孢霉素A 协同逆转K562/ ADM细胞对阿霉素的耐药性

  目的 观察干扰素(α-Interleron，α-IFN)和环孢霉素A(Cyclosporine A,CsA)对白血病K562/ADM细胞耐药性的协同逆转效应。方法 以多药耐药基因／P-糖蛋白(Muhidrug resistance gene／P-glycoprotein，mdrl／P-gp)超表达的K562／ADM细胞为靶细胞，MTT比色法检测药物的细胞毒效应；流式细胞仪检测细胞P-糖蛋白(P-glycoprotein，P-gp)表达水平；激光共聚焦显微镜观察细胞内阿霉素含量变化。结果 K562／ADM细胞对阿霉素呈高度耐药性，并与柔红霉素和鬼臼乙叉甙交叉耐药，但与CsA无交叉耐药。CsA和α-IFN单独或联合应用均对K562／ADM细胞的耐药性有较强的抑制效应。流式细胞仪和激光共聚焦显微镜分析发现α-IFN和CsA单独或联合均不能下调细胞mdrl/P-gp的表达，反而应激性地刺激耐药细胞P-gp的合成增加，但可抑制P-gp的功能、增加K562／ADM细胞内阿霉素的积聚。结论 α-IFN和CsA联合可协同逆转耐药白血病细胞的耐药性，其作用机制为抑制P-gp的功能而非下调mdrl／P-gp的表达水平。     

α-干扰素对骨巨细胞瘤细胞凋亡和bFGF及其受体表达的影响

目的:探讨α-干扰素对体外培养的骨巨细胞瘤细胞碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)及受体Bek表达与生物学行为的影响,为骨巨细胞瘤术后复发转移的防治探索新途径.方法:采用不同浓度的α-干扰素诱导体外培养的第三代骨巨细胞瘤细胞,观察α-干扰素对瘤细胞生物学行为的影响,流式细胞术与细胞-酶联免疫吸附法分析α-干扰素诱导48h后瘤细胞凋亡情况及Bek/bFGF表达的变化.结果:浓度为1 000IU/ml以上的α-干扰素作用10～12h左右,瘤细胞即出现退缩现象,生长明显受到抑制;至48h,瘤细胞数目明显减少,且出现大量细胞碎片.α-干扰素可诱导第三代骨巨细胞瘤细胞发生凋亡,其凋亡率随α-干扰素作用浓度增加而递增,呈明显的剂量依赖关系.α-干扰素可抑制第三代骨巨细胞瘤细胞bFGF和Bek的表达,其抑制强度也随α-干扰素作用浓度的增加而增加,呈明显的量效关系.当α-干扰素作用浓度达到1 000IU/ml以上时,其诱导凋亡与抑制Bek/bFGF表达的效应均发生显著性变化.结论:α-干扰素对体外培养的第三代骨巨细胞瘤细胞具有明确的抗肿瘤效应,可作为骨巨细胞瘤术后辅助治疗,以防治和减少其复发转移.     

急性早幼粒细胞白血病对全反式维甲酸耐药的机制及其逆转

目的　揭示急性早幼粒细胞白血病 (APL)产生维甲酸耐药的机制 ,探讨耐药性逆转的方法。方法　MTT法测定细胞增殖 ,极限稀释法诱导APL细胞耐药性。RT PCR及流式细胞仪测定MDR1、消炎痛及PGE1增殖影响实验分别间接测定GST酶活性或cAMP作用。干扰素、高三尖杉酯碱(HHT)及三氧化二砷 (As2 O3 )进行体外耐药细胞逆转实验。结果　对全反式维甲酸 (ATRA)耐药的HL6 0细胞MDR1阴性 ,初发时MDR1为阴性的APL患者复发后仍为阴性。消炎痛对耐药的HL6 0增殖分化无影响 ,前列腺素E(PGE)可部分恢复ATRA对耐药HL6 0的作用。干扰素可明显逆转HL6 0的耐药性。As2 O3 与HHT对ATRA耐药的HL6 0细胞有明显作用。结论　APL细胞耐药并非多药耐药 ,消炎痛或干扰素明显逆转其耐药性 ,ATRA与As2 O3 化疗药无交叉耐药性。     

维拉帕米等6种药物对人卵巢癌细胞系顺铂耐药性的逆转作用

目的　研究维拉帕米（ 异博定,钙离子阻滞剂）、双嘧达莫（ 潘生丁） 、丹参、黄体酮、环孢菌素Ａ、他莫昔芬等药物对人卵巢癌细胞系（ 具有多药耐药的特征） 顺铂（ＤＤＰ） 耐药性的逆转作用。　方法　用ＭＴＴ 法测定上述药物对Ａ２７８０／ＤＤＰ耐药细胞的细胞毒性作用,用高效液相色谱仪（ＨＰＬＣ） 测定细胞内ＤＤＰ 含量。　结果　除丹参以外的其他５ 种药物,能不同程度地逆转耐药细胞对顺铂的耐药性;可增加耐药细胞内顺铂的药物浓度。　结论　耐药细胞逆转作用主要是由于这些药物使耐药细胞内对顺铂解毒系统功能降低,致使细胞内药物浓度增加,与多药耐药基因（ ＭＤＲ１） 关系不大。     

5-氟尿嘧啶联合干扰素α对胃癌细胞的影响

目的：探讨化疗药物与细胞因子联合应用对肿瘤细胞增殖的影响。方法：首先MTT法测出不同浓度干扰素α（IFN）和5-氟尿嘧啶（5-FU）对胃癌细胞的抑制率，根据公式求出5-FU的半抑制浓度，然后用此浓度的5-FU与不同浓度的干扰素α配伍作用于胃癌细胞，用MTT法检测抑制率。用免疫细胞化学方法检测干扰素α、5-FU和干扰素α＋5-FU作用组的p53、p27、PCNA、Fas—L蛋白的表达情况。结果：MTT检测结果未发现干扰素α明显抑制肿瘤细胞增殖作用；5-Fu有抑制肿瘤增殖作用，且有浓度相关性；与5-FU作用组相比干扰素α＋5-Fu作用组的抑制率大于单纯5-FU组，且与配伍的干扰素浓度呈正相关性。之后的免疫组化试验发现IFNα＋5FU组p53、p27、Fas—L蛋白表达的阳性率高于单纯的5-FU组的阳性率，更明显高于IFN组的阳性率，而PCNA蛋白则相反。结论：5-FU对SGC7901胃癌细胞有明显的抗增殖作用，IFNα未见明显的抗增殖作用，但这两药物联合应用时，IFNα明显增强5-Fu的抗增殖作用；联合用药组的凋亡相关蛋白表达阳性率与5-FU组明显不同，IFNα增强5-Fu的抗肿瘤增殖作用可能是由凋亡途径参与作用的。     

干扰素-α联合姜黄素对B-NHL淋巴瘤Raji细胞的增生抑制作用

目的研究干扰素-α联合姜黄素对B-NHL淋巴瘤Raji细胞的诱导凋亡作用及其作用机制。方法以不同浓度干扰素-α(500、1000、2000／L),不同浓度的姜黄素6．25、12．5、25μmol／L)和IC502000U／L的干扰素-α联合不同浓度姜黄素作用于体外培养的Raji细胞,观察细胞生长状态变化。MTT法检测细胞生长的抑制率,应用流式细胞仪法观察细胞凋亡,Western blot法检测24h,姜黄素IC5025μmol／L联合2000U／L的干扰素-α作用于caspase6、caspase8、caspase9的蛋白表达。结果干扰素-α与姜黄素联合应用可显著抑制Raji细胞的生长．诱导细胞发生凋亡,两者具有协同效应。凋亡蛋白caspase6、 caspase8、caspase9表达显著增高,其作用呈现出明显的量-效与时-效关系。结论干扰素-α与姜黄素联合应用对B-NHL淋巴瘤Raji细胞具有明显的增生抑制作用,促进凋亡蛋白的表达及诱导细胞凋亡,可能是其重要作用机制之一。     

三氟拉嗪逆转肺癌细胞多药耐药性研究

目的研究三氟拉嗪（ＴＦＰ）逆转肺癌细胞多药耐药的作用。方法应用ＭＴＴ比色法体外实验研究三氟拉唪对多药耐药性人肺癌细胞株Ａ５４９／阿霉素（ＡＤＭ）耐药性的逆转作用。结果（１）ＴＦＰ对细胞具有药物浓度依赖性毒性作用，ＩＰＰＣ浓度的ＴＦＰ细胞抑制率可达２９．７％±８．７％。（２）ＴＦＰ可显著逆转细胞对顺铂、长春新碱、阿霉素的耐药性，与单独化疗药物比较，有显著差异（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１）。其作用同样具有药物浓度依赖性，各药物浓度间细胞抑制率有显著差异（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１）。结论三氟拉嗪具有逆转肺癌细胞耐药的作用。     

黄芩素对卵巢癌耐药细胞株A2780/ADM逆转作用实验研究

目的探讨黄芩素对卵巢癌耐药细胞株A2780/ADM耐药逆转作用及机制.方法MTT法观察药物对细胞的生长抑制作用;免疫组化法检测细胞P-糖蛋白(P-Gp)和多药耐药相关蛋白(MRP)的表达;采用高效液相色谱法(HPLC)测定细胞内ADM的浓度.结果卵巢癌耐药细胞株A2780/ADM对多种化疗药物产生多药耐药性,耐药细胞P-Gp和MRP的阳性率显著高于亲本细胞(P＜0.01);黄芩素在非细胞毒剂量时与ADM合用后能逆转A2780/ADM对ADM的耐药性;ADM与黄芩素合用时,其细胞内ADM的含量较单独使用明显增高.结论卵巢癌耐药细胞株A2780/ADM对多种化疗药物具有多药耐药性,其多药耐药性与P-Gp和MRP过量表达有关;黄芩素在非细胞毒剂量时能逆转A2780/ADM对ADM的耐药性,其逆转作用可能与降低P-Gp药物外排功能、增加细胞内药物浓度有关.     

板蓝根组酸活性单体-5b对不同肝癌耐药细胞的逆转作用

目的 研究板蓝根组酸活性单体-5b对不同肝癌耐药细胞的逆转作用及机制。方法 利用不同的肝癌多药耐药模型BEL-7402/ADM和BEL-7404/ADM作为研究对象，应用免疫组化和高效液相色谱法（HPLC）观察板蓝根组酸活性单体-5b对两种不同耐药模型进行逆转试验。结果 板蓝根组酸活性单体-5b能降低两种不同的肝癌耐药细胞对ADM的耐药性，细胞大量坏死，其细胞内ADM的含量明显增高，但细胞MDR，P-gp的表达改变不明显。结论 板蓝根组酸活性单体-5b能逆转两种不同的肝癌耐药细胞对ADM的耐药性，其逆转作用可能与降低P-gp药物外排功能，增加细胞内药物浓度有关。     

肠胃清对人结直肠癌耐长春新碱细胞株HCT8/V的逆转作用

目的：探讨中药复方肠胃清对人结直肠癌耐长春新碱（vincristine，VCR）细胞株HCT8／V多药耐药的逆转作用。方法：采用细胞增殖抑制实验MTT法观察肠胃清药物血清对HCT8／V细胞株多药耐药性的逆转作用，采用高效液相色谱方法检测肠胃清药物血清作用后的耐药细胞内VCR药物浓度的改变。结果：本实验所采用的人结直肠癌耐VCR细胞株HCTS／V的耐VCR倍数为20．24倍，且对5-氯尿嘧啶、顺铂、羟基喜树碱和丝裂霉素这4种结构和作用机制各异的化疗药物有交叉耐药现象，具有多药耐药性，肠胃清能够逆转HCTS／V的耐药现象。高效液相色谱法结果显示，肠胃清药物血清处理HCT8／V48h后，细胞内的VCR浓度明显增高，且呈剂量依赖性。结论：肠胃清药物血清可提高HCT8／V细胞内化疗药物的浓度，有效逆转耐药细胞的多药耐药现象。     

抑制缺氧诱导因子-1α改善卵巢癌化疗耐药的研究进展

缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)是卵巢癌的一个关键调节因子，可通过多种机制促进卵巢癌细胞对化疗的耐药性，并且在一定程度上与卵巢癌患者的不良预后相关。直接或间接抑制HIF-1α的表达或活性的药物可以提高卵巢癌细胞对化疗的反应性。全文就抑制HIF-1α改善卵巢癌化疗耐药方面的研究进展作一综述。     

板蓝根组酸活性单体-5b逆转肝癌细胞耐药的实验研究

目的：研究板蓝根组酸活性单体-5b对肝癌耐药细胞BEL-7404／ADM逆转作用及机制。方法：利用BEL-7404细胞的多药耐药模型BEL-7404／ADM，应用MTT法、免疫组化法和高效液相色谱法(HPLC)观察板蓝根组酸活性单体-5b对BEL-7404／ADM多药耐药逆转。结果：板蓝根组酸活性单体-5b能降低肝癌耐药细胞BEL-7404／ADM对ADM的耐药性，细胞MDR，p—gp的表达改变不明显，其细胞内ADM的含量明显增高。结论：板蓝根组酸活性单体-5b能逆转肝癌耐药细胞BEL-7404／ADM对ADM的耐药性，其逆转作用可能与降低P-gP药物外排功能、增加细胞内药物浓度有关。     

核因子-kB抑制剂逆转人胃癌细胞对长春新碱耐药性的研究

目的研究核因子-kB(NF—kB)抑制剂MG-132逆转胃癌耐药的可能性。方法以胃腺癌细胞株SGC7901及其长春新碱(VCR)耐药株SGC7901／VCR为研究对象，通过凝胶电泳迁移率分析检测NF-kB DNA结合活性，ELISA法检测细胞内IkB-α蛋白的表达，免疫细胞化学法观测细胞内p65核转位，MTT法检测癌细胞对药物的敏感性。结果SGC7901／VCR耐药细胞中，NF-kB的基础活性及不同浓度VCR诱导的NF-kB活化程度均比敏感细胞高。NF-kB抑制剂MG-132(2．5μmol／L)预处理耐药细胞30min，可明显抑制VCR诱导的NF-kB活化、IkB-α降解和p65核转位。VCR对耐药细胞和敏感细胞的半数抑制浓度分别为40．03mg／L和0．26mg／L，MG-132可显著提高耐药细胞对VCR的敏感性，耐药倍数由154.0降至16．5，但对敏感细胞影响不大。结论MG-132可通过抑制NF-kB的活化，在一定程度上逆转胃癌细胞对长春新碱的耐药性，提高化疗效率。     

耐糖皮质激素人类弥漫大B细胞淋巴瘤细胞系的建立及其生物学特性观察

目的 采用长期间歇小剂量糖皮质激素（GC）递增诱导法建立耐GC的人类弥漫大B细胞淋巴瘤细胞系Toledo／地塞米松（DEX）,并观察耐药和亲本细胞株两者之间的生物学特性差异,探讨其耐药机制.方法 以DEX为诱导剂,将对数期亲本Toledo细胞接种在含DEX起始浓度为1×10-s mol／L的培养液中培养96 h后,改为不含药物的培养液培养,待细胞增殖再次进入对数生长期,提高DEX浓度1倍,直至在含DEX 1.024×10-5 mol／L的浓度中稳定生长.并通过细胞学、遗传学、免疫学、分子生物学和裸鼠致瘤实验等多种方法观察耐药和亲本细胞系两者之间的生物学特性差异,探讨GC耐药机制.结果 Toledo／DEX细胞系可以在含DEX 1.024×10-5 mol／L的浓度中稳定生长.耐药及亲本细胞系在形态及免疫表型上完全一致.对超微结构观察可见Toledo／DEX细胞表面局部可见片层状突起,有细长微绒毛.耐药细胞致瘤性强,对多种化疗药有耐药性且耐药指数高,提示耐药细胞更具侵袭性.耐药细胞增殖慢,较多被阻滞在G1期,染色体变异多,但未形成两个相关克隆.此外,GC受体（GR）α、GR β表达异常参与GC耐药的形成.结论 Toledo／DEX是一株生物学特性稳定的高耐药细胞系,为研究GC耐药机制及探索逆转GC耐药性的药物提供了生物学基础.     

人类白血病多药耐药细胞株K562/ADM、HL60/ADM的耐药性及耐药逆转的研究

目的：研究K562／ADM、HL60／ADM的耐药性及CsA对其耐药的逆转作用。方法：MTT比色法检测细胞耐药性及CsA对细胞耐药性的影响，流式细胞仪检测Pgp、MRP的表达及细胞内柔红霉素(DNR)的浓度。结果：K562／ADM、HL60／ADM对DNR、ADM、VCR、Har、VP16、MIT交叉耐药，对Acla和Ara—C基本不耐药。K562／ADM细胞Pgp过度表达，HL60／ADM细胞的MRP过度表达。CsA使K562／ADM、HL60／ADM细胞内药物浓度增加，逆转了K562／ADM、HL60／ADM的耐药性，而对K562、HL60的耐药性基本无影响。结论：两种不同耐药机制的细胞株对8种常用化疗药物的耐药谱相似，对Acla基本不产生耐药性，故在防止和克服多药耐药的基础上，Acla可能取代DNR、ADM。环孢菌素A(CsA)对两种不同耐药机制的细胞株的耐药性均有逆转作用，主要是通过增加胞内药物浓度来达到逆转作用。     

干扰素α对Raji细胞的生长抑制作用及其作用机制

目的：探讨干扰素α对白血病Raji细胞的生长抑制作用及其作用机制。方法：以不同浓度的干扰素α作用于体外培养的Raji细胞，MTT法检测细胞生长抑制率，应用流式细胞仪及hoechst33258荧光染色法观察细胞凋亡，FRAP-PCR-ELISA法检测细胞凋亡前后的端粒酶活性。结果：干扰素α可显著的降低Raji细胞端粒酶活性，抑制细胞的生长及诱导细胞发生凋亡。并呈现出明显的量-效与时-效关系。结论：干扰素α能抑制Raji细胞的生长并诱导细胞发生调亡，降低细胞端粒酶活性可能是其重要作用机制之一。     

核因子-κB抑制剂逆转人胃癌细胞对长春新碱耐药性的研究

目的研究核因子2κB(NF2κB)抑制剂MG2132逆转胃癌耐药的可能性。方法以胃腺癌细胞株SGC7901及其长春新碱(VCR)耐药株SGC7901/VCR为研究对象,通过凝胶电泳迁移率分析检测NF2κBDNA结合活性,ELISA法检测细胞内IκB2α蛋白的表达,免疫细胞化学法观测细胞内p65核转位,MTT法检测癌细胞对药物的敏感性。结果SGC7901/VCR耐药细胞中,NF2κB的基础活性及不同浓度VCR诱导的NF2κB活化程度均比敏感细胞高。NF2κB抑制剂MG2132(2.5μmol/L)预处理耐药细胞30min,可明显抑制VCR诱导的NF2κB活化、IκB2α降解和p65核转位。VCR对耐药细胞和敏感细胞的半数抑制浓度分别为40.03mg/L和0.26mg/L,MG2132可显著提高耐药细胞对VCR的敏感性,耐药倍数由154.0降至16.5,但对敏感细胞影响不大。结论MG2132可通过抑制NF2κB的活化,在一定程度上逆转胃癌细胞对长春新碱的耐药性,提高化疗效率。