应用PCR-SSCP银染检测膀胱癌中H-ras基因突变

目的 :了解膀胱癌中H ras基因突变情况。方法 :应用PCR SSCP银染和DNA测序技术对 31例膀胱癌组织进行检测。结果 :H ras基因突变发生率为 38 7% ,突变位点在H ras基因的第 1外显子的第 12位密码子 ,由GGC变为GTC。结论 :H ras基因突变与膀胱癌的发生发展存在着一定的联系 ,H ras基因突变可望作为膀胱癌早期临床诊断有价值的指标。     

应用PCR—SSCP银染检测膀胱癌中H—ras基因突变

目的：了解膀胱癌中H-ras基因突变情况。方法：应用PCR－SSCP银染和DNA测序技术对31例膀胱癌组织进行检测。结果：H－ras基因突变发生率为38．7％，突变位点在H－ras基因的第1外显子的第12位密码子，由GGC变为GTC。结论：H-ras基因突变与膀胱癌的发生发展存在着一定的联系，H-ras基因突变可望作为膀胱癌早期临床诊断有价值的指标。     

P^21ras,P53在子宫颈癌中的免疫组化研究

目的 探讨p~(21ras),突变型P~(53)蛋白的过度表达与宫颈癌病因学方面的关系。方法 采用免疫组化S—P法检测正常宫颈、慢性宫颈炎、宫颈不典型增生、宫颈癌组织中P~(21ras),突变型P~(53)蛋白的表达。结果 P~(21ras),突变型P~(53)蛋白在正常宫颈和慢性宫颈炎中不表达,在宫颈不典型增生中有表达,在宫颈癌中过度表达,相互间差异显著(P<0.05)。结论 宫颈癌的发生与ras癌基因变异及P~(53)抑癌基因突变有关,且ras癌基因变异可能是宫颈癌发生的早期事件,P~(53)抑癌基因突变可能是宫颈癌发生的晚期事件,代表肿瘤的恶性倾向。     

猪苓多糖对膀胱癌细胞癌基因蛋白表达的影响

目的：分析猪苓多糖对体外培养T24膀胱癌细胞癌基因蛋白表达的影响。方法：应用免疫荧光法、激光共聚焦显徽镜对p53、H—ras基因蛋白表达进行定位、定量观察．结果：猪苓多糖显著增加p53蛋白表达，24小时表达最高，呈弥漫性分布，随后逐渐下降；对照组在24小时表达很弱，48小时表达最强。猪苓多糖对H—ras基因蛋白表达无明显影响。结论：猪苓多糖对T24细胞p53基因蛋白表达有一定的调节作用，对H-ras基因蛋白表达无明显影响。     

ras p21及p53基因的表达与胃癌生物学行为关系的探讨

应用SP免疫组化法检测1980～1989年存档的33例胃癌及其癌旁组织石蜡包埋标本的ras p21和p53基因表达情况,并与临床、病理和随访资料进行对比分析。结果显示:胃癌标本的ras p21阳性表达7例(21.21％),p53蛋白的阳性表达11例(33.33％)。ras p21的阳性表达与病理类型、性别、年龄、民族以及肿瘤部位无关,但肿瘤浸润深度及有无淋巴结转移与ras p21阳性表达之间显著相关。生存不足1年组的ras p21表达阳性率(50％)明显高于1～5年组(22.22％)和5年以上组,表明P21蛋白的表达与胃癌的浸润、进展和预后有关,提示ras p21的检测有可能成为胃癌预后指标,并有指导临床治疗的意义。p53蛋白的表达与患者的临床病理状况无显著相关,提示p53基因的改变可能主要发生在癌变早期,对胃癌的发生起关键作用,但并不影响胃癌细胞的生物学行为。p~53蛋白的表达与ras p~21蛋白表达之间无明显关系。     

MNNG诱发大鼠腺胃癌模型的建立及p53,ras基因表达的研究

目的建立N一甲基一N’一硝基一N一亚硝基胍（N－methy1－N’－nitro－N－nitrosoguanidine，MNNG）诱发大鼠腺胃癌模型并观察p53，ras基因的表达。方法给Wistar大鼠饮用MNNG水溶液（终浓度为80μg／ml），用ABC法检测P53和P21蛋白的表达。结果MNNG成功地诱发出了胃癌、胃腺瘤、胃息肉、胃粘膜不典型增生和历上皮化生等病变。胃癌肝转移2例，淋巴结转移1例。P53蛋白在肠化及不典型增生皆阴性，胃癌阳性率为50％；P21蛋白在肠化及不典型增生中阳性率为44％，在癌组织中为23％。结论MNNG能诱发大鼠脾胃癌等病变，P53基因突变在胃癌发生发展过程中起一定作用，而ras基因激活是一个早期现象。     

P21ras、P53在大肠癌中的表达及意义

目的研究大肠癌中P21ras、P53表达及临床病理意义.方法用链霉菌抗生物素蛋白-过氧化酶免疫组化染色技术(SP法)检测80例大肠癌组织P21ras、P53表达.结果大肠癌原发病灶中P21ras、P53的阳性表达率分别为71.3%及53.8%.癌组织二种蛋白同时表达占42.5%.P21ras的阳性表达与肿瘤的组织类型、肿瘤浸润深度、淋巴结转移有关;P53的阳性表达与临床病理指标均无统计学意义.结论P21ras及P53可能与大肠癌的发生有关,二者在大肠癌的发生中可能起协同作用,其蛋白阳性表达与预后无相关性.     

肺癌组织K—ras与Bcl-2表达临床意义研究

目的：探讨肺癌组织中K—ras蛋白与Bcl-2蛋白的表达意义及其相关性。方法：选取2005—01—01—2012—06—30在苏州市立医院本部手术切除并经病理确诊的99例肺癌石蜡标本,应用组织芯片和免疫组化法观察K—ras及Bcl-2蛋白在肺癌组织中的表达,分析其表达相关性及与患者临床因素的关系。结果：K—ras和Bcl-2蛋白在肺癌组织中的表达阳性率分别为25．3oA（25／99）和26．3％（26／99）。K—ras蛋白的表达与性别、病理类型及分化程度差异有统计学意义,P〈0．05;与年龄、有无淋巴结转移及TNM分期等因素差异无统计学意义,P〉0．05。Bcl-2蛋白的表达与年龄、性别、病理类型、分化程度、有无淋巴结转移及TNM分期等因素之间差异均无统计学意义,P〉0．05。K—ras与Bcl-2蛋白表达呈显著正相关,rs=0．657,P〈0．01。结论：K—ras与Bcl-2蛋白可能参与肺癌的发生发展,并且存在相互促进作用。     

胃癌P21^ras表达与临床,病理部分相关因素的研究

对93例胃癌患者进行P21ras检测，结果显示P21ras阳性表达率为56%，而高分化腺癌阳性表达率为96%，低分化腺癌28％（P<0．01）。晚期胃癌P21ras阳性表达率为72％，而早期胃癌P21ras阳性表达率为19%（p＜0．01）、阳性表达患者一年内复发占77％，阴性表达患者一年内复发占31%（p<0．05）。随访结果表明．阳性表达患者中位生存期为10．8个月，阴性表达患者中位生存期为19．3个月。本文研究结果揭示胃癌患者出现P21ras阳性表达，尤其在高表达的出现是一种愈后不良的因素，所以对胃癌患者出现P21ras高表达患者术后应密切随访，加强术后的综合治疗。     

ras p21及p53基因的表达与胃癌生物学行为关系的探讨

应用SP免疫组化法检测1980～1989年存档的33例胃癌及其癌旁组织石蜡包埋标本的ras p21和p53基因表达情况，并与临床、病理和随访资料进行对比分析。结果显示：胃癌标本的ras p21阳性表达7例(21．21％)，p53蛋白的阳性表达11例(33．33%)。ras p21的阳性表达与病理类型、性别、年龄、民族以及肿瘤部位无关，但肿瘤浸润深度及有无淋巴结转移与ras p21阳性表达之间显著相关。生存不足1年组的ras p21表达阳性率(50%)明显高于1～5年组(22．22％)和5年以上组，表明P21蛋白的表达与胃癌的浸润、进展和预后有关，提示ras p21的检测有可能成为胃癌预后指标，并有指导临床治疗的意义。p53蛋白的表达与患者的临床病理状况无显著相关，提示p53基因的改变可能主要发生在癌变早期，对胃癌的发生起关键作用，但并不影响胃癌细胞的生物学行为。p53蛋白的表达与ras p21蛋白表达之间无明显关系。     

P53ras基因表达与大肠癌临床病理及预后的关系

大肠癌的发生发展是一多因素多阶段的过程。在这过程中,癌基因的激活与抑癌基因的失活起着重要的作用。近年研究显示。P53基因突变或缺失及ras基因激活与大肠癌发生及发展有较密切的关系,但同时研究P53及ras基因在大肠癌中表达的报道还较少。本研究联合检测了大肠癌中P53蛋白及P21蛋白的表达,并初步探讨了其临床病理意义及预后价值。     

肠道非霍奇金淋巴瘤中的EB病毒感染和p21ras、p53蛋白表达及意义探讨

目的：研究肠道非霍奇金恶性淋巴瘤的EB病毒感染、p53、p21ras蛋白表达及其相关性。方法：应用单克隆抗体CD45RO)、CD20、CD78a、CD45RA、CD56、LCA、CD30、CD15、CD5、CD8、TIA-1、GramB、p53、p21；多克隆抗体CD3、κ、λ对瘤细胞进行免疫组化标记，用SABC免疫组化的方法检测瘤细胞p53、p21ras基因的表达及EB病毒寡核苷酸探针(EBER)原位杂交，观察了40例NHL的免疫表型、EBV感染情况及p53、p21ras蛋白的表达。结果：40例申，经免疫组化证实6例为T细胞淋巴瘤(15％)，34例为B细胞淋巴瘤(85％)。T细胞淋巴瘤为外周T细胞性和肠病型T细胞性淋巴瘤。B细胞淋巴瘤9例为弥漫性大细胞性淋巴瘤23.5％，25例为边缘区B细胞性淋巴瘤(76.5％)。EBV-ERBR原位杂交6／40例有阳性表达，均为T细胞淋巴瘤，阳性细胞占肿瘤细胞的30％～80％。P53的表达共有25例，21例有p21ras的表达。有16例同时检出p53和p21ras的表达。结论：肠道淋巴瘤以边缘区B细胞淋巴瘤多发临床为惰性。如为T细胞性淋巴瘤，更多见的是侵袭性，且T细胞淋巴瘤与EBV相关性较高B细胞淋巴瘤則无相关性。P53的表达与EBV感染无明显相关性，而p21ras的表达与EBV感染似有关系。     

广西人肝细胞癌β—catenin基因突变及蛋白表达

目的研究广西地区人肝细胞癌发生、发展过程中β-catenin基因突变和蛋白表达状况。方法采用PCR联合基因直接测序法,检测108例肝细胞癌癌组织中β-catenin基因的突变;同时采用免疫组化方法检测β—catenin蛋白的表达状况。结果108例HCC癌组织中仅有12例发生β-catenin基因突变,突变率为11．1％。108例HCC癌组织中β—catenin蛋白阳性表达率为70．0％（75／108）,其中14．6％（11／75）为细胞核阳性;57．3％（43／75）为细胞质阳性;28．0％（21／75）为细胞膜阳性。β—catenin蛋白在12例有突变的样本中表达阳性率为100％。结论广西地区肝癌中β—catenin基因突变率比较低;β—catenin基因突变可能为导致β—catenin蛋白过表达的因素之一,并参与了肝癌癌变过程。     

癌基因产物ras P21在不同类型胃癌之表达

目的：探讨ras P21与胃癌生长速度之关系。方法：为在免疫组化的基础上探讨ras P21与胃癌生长速度之关系．作者设计了与过去文献不同的观察方法，不仅像过去文献那样观察胃癌之粘膜层之抗体表达，还分别观察粘膜下层、肌层、浆膜层及转移到局部淋巴或其他脏器癌细胞ras P21之表达，标本取自常观病理检查，均作H.E及ABC染色。结果：ras P21在胃癌细胞之检出率及反应强度在胃各层及局部淋巴转移的癌细胞中相似。早期胃癌ras P21检出率低于进展胃癌。结论：ras P21癌基因对胃癌之生长速度无明显影响。     

驱动蛋白样DNA结合蛋白、p21ras在乳腺癌中的表达及与患者淋巴结转移的关系

目的 探讨驱动蛋白样DNA结合蛋白(KNSL4)、p21ras在乳腺癌中的表达及与患者淋巴结转移的关系.方法 收集82例乳腺癌患者的临床资料和随访资料,依据随访结果将患者分为淋巴结转移组(n=48)、淋巴结未转移组(n=34).收集乳腺癌患者石蜡包埋的乳腺癌组织及其癌旁组织标本,采用免疫组织化学染色法检测乳腺癌组织及其癌旁组织中KNSL4、p21ras的表达情况,分别采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、蛋白质印迹法(Western blot)检测乳腺癌组织中KNSL4、p21ras mRNA和蛋白相对表达量.分析不同临床特征乳腺癌患者乳腺癌组织中KNSL4、p21ras的表达情况,比较淋巴结转移组、淋巴结未转移组乳腺癌患者乳腺癌组织中KNSL4、p21ras mRNA和蛋白相对表达量,采用Spearman相关分析法分析乳腺癌淋巴结转移与KNSL4、p21ras基因表达的相关性.结果 乳腺癌组织中KNSL4阳性表达率明显低于癌旁组织,p21ras阳性表达率明显高于癌旁组织,差异均有统计学意义(P﹤0.01).有淋巴结转移的乳腺癌患者乳腺癌组织中KNSL4阳性表达率明显低于无淋巴结转移的患者,而p21ras阳性表达率明显高于无淋巴结转移的患者,差异均有统计学意义(P﹤0.01).淋巴结转移组患者乳腺癌组织中KNSL4 mRNA和蛋白相对表达量均明显低于淋巴结未转移组,而p21ras mRNA和蛋白相对表达量均明显高于淋巴结未转移组,差异均有统计学意义(P﹤0.01).Spearman相关性分析结果显示,乳腺癌淋巴结转移与KNSL4表达量呈负相关,但与p21ras表达量呈正相关(P﹤0.05).结论 乳腺癌淋巴结转移与KNSL4、p21ras基因表达密切相关,KNSL4、p21ras可为乳腺癌的早期诊治提供参考.     

子宫内膜癌前病变中K-ras与MTS1/p16基因的表达及意义

 目的　探讨K ras激活与MTS1/ p16基因突变 /缺失在子宫内膜癌中的发生发展关系。 方法　对子宫内膜癌及癌前病变组织K ras与MTS1/p16蛋白的免疫组化测定并用PCR技术对MTS1/ p16基因在子宫内膜癌中的纯合性缺失进行检测。结果　K ras、p16蛋白广泛存在于子宫内膜癌和癌前病变组织中 ,癌前病变K ras表达为 11.9% ,癌组为 6 2 .96 % (P <0 .0 5 ) ,而p16表达分别为 76 .5 9%与5 1.85 %。 13例 p16蛋白表达阴性子宫内膜癌PCR扩增 ,7例显示外显子 1缺失。K ras表达与细胞恶性程度呈正相关 ,p16表达则呈负相关。 结论　 (1)K ras基因激活与MTS1/ p16基因突变 /缺失导致细胞周期增殖失控 ,是内膜癌发生发展的一个重要环节 ;(2 )子宫内膜癌中p16基因外显子 1纯合子缺失可能是p16蛋白表达降低的机制之一 ;(3)动态观测内膜增生组织中的p2 1ras表达阳性者 ,对子宫内膜癌的早期发现可能有积极意义     

Ras基因激活与乳腺癌发生及临床预后的关系

目的　探讨ras基因激活与乳腺癌发生及临床预后的关系。方法　采用LSAB免疫组化法对 8例乳腺纤维腺瘤、76例乳腺癌、3 4例淋巴结转移灶进行P2 1蛋白检测 ;用PCR -RFLP法对 6例乳腺纤维腺瘤、2 2例乳腺癌 ( 6例新鲜标本 )组织进行H ras12位点点突变检测。结果　 76例乳腺癌P2 1蛋白表达率为 76.3 % ,伴淋巴结转移组阳性率明显高于无转移组 (P <0 .0 5 ) ;与组织学分级比较 ,Ⅰ级P2 1蛋白阳性率明显低于Ⅱ、Ⅲ级 (P <0 .0 5 ) ;随着临床分期的升高P2 1蛋白表达率有增高的趋势。H ras12位点点突变率在乳腺纤维腺瘤为 16.7%、乳腺癌为 2 7.3 % ,其中伴淋巴结转移组 3 7.5 %、无转移组 2 8.6%。结论　ras基因激活与乳腺癌的发生及转移有关。H ras12位点点突变率明显低于P2 1蛋白表达率 ,说明该位点突变并非是乳腺癌的主要激活方式。     

骨肉瘤p21~(ras)蛋白、p21~(waf1/cip1)蛋白、PCNA与AgNOR的表达及其临床意义

目的探讨骨肉瘤组织中p21ras蛋白、p21waf1/cip1蛋白、PCNA与AgNOR的表达及其临床意义。方法应用免疫组化方法和组织化学方法检测45例骨肉瘤病人的骨肉瘤组织、20例骨软骨瘤病人的骨软骨瘤组织和20例正常骨组织中p21ras蛋白、p21waf1/cip1蛋白、PCNA与AgNOR的表达情况,对有关临床病理指标综合分析。结果45例骨肉瘤组织中p21ras蛋白、p21waf1/cip1蛋白和PCNA的阳性表达率分别为86.7%、13.3%和100%,AgNOR计数为9.63±2.47,阳性表达率与AgNOR计数均高于骨软骨瘤和正常骨组织;p21ras蛋白的表达与PCNA的表达存在平行关系;AgNOR计数与PCNA的表达呈正相关;四者的表达与骨肉瘤有关临床病理指标之间存在一定的关系。结论检测p21ras蛋白、p21waf1/cip1蛋白、PCNA与AgNOR为骨肉瘤恶性程度和预后的评估提供了重要的辅助参考指标。     

骨肉瘤p21 ras蛋白、p21 wafl/cip1蛋白、PCNA与AgNOR的表达及其临床意义

目的探讨骨肉瘤组织中p21ras蛋白、p21wafl/cip1蛋白、PCNA与AgNOR的表达及其临床意义.方法应用免疫组化方法和组织化学方法检测45例骨肉瘤病人的骨肉瘤组织、20例骨软骨瘤病人的骨软骨瘤组织和20例正常骨组织中p21ras蛋白、p21wafl/cipl蛋白、PCNA与AgNOR的表达情况,对有关临床病理指标综合分析.结果45例骨肉瘤组织中p21ras蛋白、p21wafl/cipl蛋白和PCNA的阳性表达率分别为86.7%、13.3%和100%,AgNOR计数为9.63±2.47,阳性表达率与AgNOR计数均高于骨软骨瘤和正常骨组织;p21ras蛋白的表达与PCNA的表达存在平行关系;AgNOR计数与PCNA的表达呈正相关;四者的表达与骨肉瘤有关临床病理指标之间存在一定的关系.结论检测p21ras蛋白、p21waf1/cip1蛋白、PCNA与AgNOR为骨肉瘤恶性程度和预后的评估提供了重要的辅助参考指标.     

人类癌症并不经常发生P21蛋白第12氨基酸的突变

最近的研究指出人膀胱癌细胞株细胞致癌基因C-Ha-ras 发生了点突变,C-Ha-ras 基因产物是P21,突变将P21第12氨基酸从甘氨酸转变为缬氨酸,突变后的P21的膀胱癌细胞株DNA 转化N1H3T3 细胞的能力有关.其他有关ras 基因的P21经突变后似